血小板抗體陽性及輸血次數(shù)對血液腫瘤患者單采血小板輸血效果的影響研究*

杜旭利,白艷麗△,鄧苗苗,楊俊龍,楊媛媛

(1.西安國際醫(yī)學(xué)中心醫(yī)院輸血科,陜西 西安 710100;2.西安大興醫(yī)院輸血科,陜西 西安 710082)

血液腫瘤種類多樣,且多數(shù)發(fā)病前無明顯征兆,臨床上表現(xiàn)多變,患者很難自己察覺,多在因其他疾病入院治療或健康體檢時(shí)發(fā)現(xiàn),治療難度較大,徹底治愈的概率較低,易復(fù)發(fā),對患者生命質(zhì)量影響較大[1-2]。血小板輸注作為治療該病的主要方法,廣泛應(yīng)用于臨床,但易出現(xiàn)血小板輸注無效(PTR),影響患者預(yù)后[3-4]。目前PTR的發(fā)生原因臨床上缺乏統(tǒng)一結(jié)論,多認(rèn)為可能與血小板抗體表達(dá)和輸血次數(shù)有關(guān)[5-6]。本研究為了探討血小板抗體表達(dá)及輸血次數(shù)對血液腫瘤患者輸血效果的影響,收集西安國際醫(yī)學(xué)中心醫(yī)院90例單采血小板輸血(單采輸血)治療的血液腫瘤患者的病歷資料進(jìn)行分析,具體如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2020年1月至2021年12月西安國際醫(yī)學(xué)中心醫(yī)院進(jìn)行輸血治療的90例血液腫瘤患者的臨床資料,男女比例49∶41;年齡21～64歲,平均(42.36±10.17)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合輸血適應(yīng)證,即外周血血小板計(jì)數(shù)(PLT)<20×109L-1,或PLT 20.00×109L-1～50.00×109L-1,有出血傾向;(2)輸血次數(shù)超過2次;(3)臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)機(jī)體免疫功能發(fā)生異常;(2)患有嚴(yán)重感染疾病;(3)妊娠或哺乳期;(4)輸血前存在活動性出血;(5)輸血前有脾大或使用激素等藥物治療。

1.2方法

1.2.1儀器與試劑 37 ℃孵育器(CU-600,上海一恒),血清學(xué)平板離心機(jī)(LB-300,無錫源博),固相凝集法血小板抗體檢測試劑盒及血小板抗體檢測指示紅細(xì)胞(美國Immucor,Inc.)。

1.2.2血小板來源 本院所有單采血小板均由西安市中心血站提供。無償獻(xiàn)血者經(jīng)過獻(xiàn)血前健康征詢、體格檢查、血液檢測合格后,采用全自動血細(xì)胞分離機(jī)進(jìn)行單采血小板采集,采集后的單采血小板置于22 ℃振蕩血小板保存箱保存,5 d內(nèi)使用。1 U(治療量)單采血小板容量250～300 mL,血小板含量大于2.5×1011個(gè)/袋,殘余白細(xì)胞量小于5.0×106個(gè)/袋,所有單采血小板均經(jīng)白細(xì)胞去除和γ射線輻照后輸注。

1.2.3血小板抗體檢測 取出適量微孔條回溫30 min。每待測微孔加入血小板抗原2滴(100 μL),760 r/min下離心5 min(專用離心機(jī)程序1或程序A)。生理鹽水(或血小板洗滌液)沿管壁加入每個(gè)微孔達(dá)80%滿(塑膠試管6～8滴),快速翻轉(zhuǎn)微孔條,然后移除多余液體。重復(fù)6次。加入2滴(100 μL)低離子強(qiáng)度鹽液后(紫色液體)與1滴(50 μL)待檢血清/漿(陰陽性對照孔分別加入陰性/陽性對照液),液體變?yōu)樗{(lán)色。37 ℃孵育箱孵育30 min。生理鹽水(或血小板洗滌液)沿管壁加入每個(gè)微孔達(dá)80%滿(塑膠試管6～8滴),快速翻轉(zhuǎn)微孔條,然后移除多余液體。加入1滴(50 μL)指示紅細(xì)胞于微孔,2 800 r/min離心1 min(專用離心機(jī)程序2或程序B)。

1.2.4結(jié)果判讀 陽性反應(yīng):指示紅細(xì)胞與待測樣本血漿中血小板抗體黏附,在微孔表面形成均勻單層。陰性反應(yīng):指示紅細(xì)胞因?yàn)殡x心力作用,在微孔底部中央位置聚集形成一個(gè)細(xì)胞點(diǎn)。見圖1。

圖1 血小板抗體檢測結(jié)果判讀示意圖

1.2.5單采輸血 對所有血液腫瘤患者選擇ABO同型單采血小板輸注,以患者能承受的最大速度輸注,并觀察患者情況進(jìn)行調(diào)整。每次輸注1 U單采血小板量,輸注后24 h內(nèi)檢測血常規(guī)并完成輸血病程記錄及輸血后療效評價(jià)。多次輸血的血液腫瘤患者,抽取標(biāo)本在輸血科進(jìn)行血小板抗體檢測,血小板抗體陽性患者,將患者標(biāo)本送往西安市中心血站進(jìn)行血小板交叉配型試驗(yàn),選擇配型陰性單采血小板輸注。

1.2.6血小板交叉配型 采用固相凝集試驗(yàn),患者血漿與制備的血小板懸液進(jìn)行ABO同型交叉配型,具體操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.2.7PTR判定標(biāo)準(zhǔn) 利用PLT增高指數(shù)(CCI)進(jìn)行評估。CCI=(輸注后PLT-輸注前PLT)(109L-1)×體表面積(m2)/輸入的血小板總數(shù)(1011),體表面積=0.006 1×身高+0.012 8×體重—0.015 29。有效為輸注1 h后CCI≥7.5,或24 h后CCI≥4.5,反之為無效[7]。

1.2.8觀察指標(biāo) (1)輸血效果:記錄所選患者的PTR發(fā)生情況。(2)輸血前后相關(guān)參數(shù)變化:分別于輸血前、輸血后24 h檢測患者的PLT、平均血小板體積(MPV)、大型血小板比例(P-LCR)、血小板壓積(PCT)水平。(3)血小板抗體陽性與PTR發(fā)生情況。(4)輸血次數(shù)與PTR發(fā)生情況。(5)PTR患者單采輸血前后相關(guān)參數(shù)變化。

2 結(jié) 果

2.1患者單采輸血前后相關(guān)參數(shù)變化 輸血后,患者PLT、PCT水平均較輸血前升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=69.986、13.416,P<0.05),患者P-LCR、MPV較輸血前變化均不明顯,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表1。

表1 患者單采輸血前后相關(guān)參數(shù)變化

2.2血小板抗體不同表達(dá)患者PTR發(fā)生率比較 90例患者中PTR發(fā)生率為42.22%(38/90)。血小板抗體陽性患者PTR發(fā)生率[53.19%(25/47)]高于血小板抗體陰性患者[30.23%(13/43)],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.852,P<0.05)。

2.3不同輸血次數(shù)患者PTR發(fā)生情況及血小板陽性情況比較 90例患者中累計(jì)輸血次數(shù)大于6次的患者PTR發(fā)生率為60.42%(29/48),血小板陽性率為64.58%(31/48);累計(jì)輸血次數(shù)3～6次的患者PTR發(fā)生率為21.43%(9/42),血小板陽性率為26.19%(11/42),二者比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=13.958、13.266,P<0.05)。

2.4PTR患者單采輸血前后相關(guān)參數(shù)變化 PTR患者單采輸血后PLT、PCT較輸血前均下降,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=7.773、3.808,P<0.05),MPV、P-LCR較輸血前變化均不明顯,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表2。

表2 PTR患者單采輸血前后相關(guān)參數(shù)變化

3 討 論

目前,臨床上認(rèn)為血液腫瘤的發(fā)生與血小板之間存在一定聯(lián)系,當(dāng)惡性腫瘤開始擴(kuò)散時(shí),腫瘤細(xì)胞會侵犯到骨髓,對機(jī)體骨髓造血功能造成一定影響,增加機(jī)體貧血發(fā)生風(fēng)險(xiǎn);另外,惡性腫瘤還會造成血管內(nèi)凝血,進(jìn)一步減少PLT[8]。單采輸血可緩解機(jī)體凝血功能障礙,糾正血小板減少或血小板功能低下導(dǎo)致的出血或出血傾向。本研究結(jié)果顯示,單采輸血后,PLT、PCT水平均顯著升高(P<0.05),P-LCR、MPV變化均不明顯(P>0.05),說明血小板輸注會促使PLT、PCT水平恢復(fù),減輕血液腫瘤對機(jī)體凝血功能造成的影響,與上述文獻(xiàn)觀點(diǎn)一致。

有研究發(fā)現(xiàn),部分患者會發(fā)生PTR,雖然輸注足夠劑量的單采血小板,但低PLT或血小板功能障礙未得到改善[9]。本研究90例患者中38例出現(xiàn)PTR(發(fā)生率為42.22%),說明在血液腫瘤患者經(jīng)過輸血治療后,存在PTR現(xiàn)象。90例患者中血小板抗體陽性47例,25例發(fā)生PTR(53.19%),血小板抗體陰性43例,13例發(fā)生PTR(30.23%),血小板陽性患者PTR發(fā)生率高于陰性患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),說明血小板抗體陽性與PTR相關(guān),血小板抗體陽性者PTR的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)更高。其主要原因?yàn)檠“蹇贵w陽性患者血液中含有HLA抗體或血小板特異性抗體(HPA),這些抗體與血小板發(fā)生反應(yīng),促使單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)也發(fā)生反應(yīng),導(dǎo)致血小板被快速清除,增加PTR發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[10-11]。為避免PTR發(fā)生,血小板抗體陽性患者輸血前需進(jìn)行血小板交叉配型檢測,選擇配型相合單采血小板輸注,可以提高輸血療效[12]。

本研究發(fā)現(xiàn),90例患者有48例輸血次數(shù)大于6次,其中29例PTR發(fā)生率為60.42%,血小板陽性率為64.58%;42例輸血次數(shù)3～6次,其中9例PTR發(fā)生率為21.43%,血小板陽性率為26.19%,相對于大于6次者明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),說明隨著輸血次數(shù)增多、血小板抗體陽性率升高,血液腫瘤患者的PTR發(fā)生率會隨著增高。輸血次數(shù)大于6次患者PTR發(fā)生率、血小板抗體陽性率均較高,與黃秀鳳等[13]研究結(jié)果相似。血液腫瘤患者通常需要長期、多次輸血治療,但長期、多次的輸血治療,會使機(jī)體免疫刺激產(chǎn)生HLA抗體或HPA抗體,當(dāng)再次單采輸血治療會發(fā)生血小板相關(guān)抗原抗體反應(yīng),造成PTR[14]。特發(fā)性血小板減少癥患者體內(nèi)含針對血小板的自身抗體,會增加PTR發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。本研究中,輸血次數(shù)大于6次者與次數(shù)為3～6次者相比,血小板抗體陽性率明顯升高,從而反映了隨著輸血次數(shù)的增多,血小板抗體陽性率會升高,導(dǎo)致單采輸血不能達(dá)到預(yù)期效果[15]。PTR患者單采輸血后PLT、PCT較輸血前下降,說明PTR患者輸血后PLT、PCT會降低。

綜上所述,隨著血小板抗體陽性率升高、輸血次數(shù)增多,血液腫瘤患者的PTR發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)更高。但本研究也存在一些不足,選取的患者為本院就診患者,與其他地區(qū)患者相比,存在一些地域與人群差異,可能會影響研究結(jié)果,需要擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究。