同種異體間充質(zhì)干細(xì)胞在慢性創(chuàng)面修復(fù)中的療效研究

周龍澤，劉國強(qiáng)，鄒佳偉

廣東省韶關(guān)市粵北人民醫(yī)院創(chuàng)傷骨科，廣東韶關(guān) 512000

慢性難愈性創(chuàng)面，常稱為潰瘍，好發(fā)于糖尿病患者與老年人群[1]。慢性難愈性創(chuàng)面的治療是臨床上面臨的一個難題，其發(fā)生發(fā)展與許多因素相關(guān)[2]。創(chuàng)面長時間不愈合，極大地降低了患者的生活質(zhì)量[3]，在人口老齡化這個時代背景下，該病成為醫(yī)療上急待解決的一大難題[4]。目前臨床上主要的治療方法有傳統(tǒng)藥物治療、自體皮瓣移植、負(fù)壓引流等，但長期的治療不僅給患者及家屬帶來了極大的經(jīng)濟(jì)壓力，治療后療效也有待提升。間充質(zhì)干細(xì)胞移植成為近期研究的熱點(diǎn)，Nourian DA等[5]發(fā)現(xiàn)干細(xì)胞移植對于慢性難愈性創(chuàng)面的修復(fù)具有很好的療效。此外，間充質(zhì)干細(xì)胞取材無創(chuàng)、體外增殖能力較強(qiáng)、免疫原性低，具備臨床治療的良好基礎(chǔ)。為探究間充質(zhì)干細(xì)胞對慢性難愈性創(chuàng)面患者的臨床治療有效率、修復(fù)時間、創(chuàng)面組織血管內(nèi)皮細(xì)胞因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）表達(dá)情況、不良事件發(fā)生率影響，選取2021年9月—2022年9月在廣東省韶關(guān)市粵北人民醫(yī)院進(jìn)行慢性創(chuàng)面治療的60例患者開展對比研究，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在本院進(jìn)行慢性創(chuàng)面治療的60例患者作為研究對象。根據(jù)隨機(jī)數(shù)表法分為對照組和觀察組，每組30例，兩組患者一般資料經(jīng)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)過本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)同意后實(shí)施。見表1。

表1 兩組患者一般資料比較

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有研究患者符合慢性創(chuàng)面的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]：創(chuàng)面形成1個月以上而無愈合傾向，應(yīng)用傳統(tǒng)保守治療方法無效；②病程均在1個月以上，均為四肢不同部位的慢性創(chuàng)面，傷口有不同程度的感染，創(chuàng)面的面積20～35cm2患者；③年齡18～65歲患者；④所有患者及其家屬均知曉本研究目的及內(nèi)容，并簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并有心肝肺等重要臟器功能障礙及其他系統(tǒng)性疾病患者；②合并有嚴(yán)重免疫系統(tǒng)疾病患者；③臨床資料不完整，中止研究或拒絕接受研究患者。

1.3 方法

對照組采取常規(guī)治療。入院后先行創(chuàng)傷清創(chuàng)，先以0.5%碘伏充分消毒創(chuàng)面與距創(chuàng)面3 cm以內(nèi)的皮膚組織，再用3%H2O2溶液和0.9%氯化鈉溶液反復(fù)沖洗創(chuàng)面，直至創(chuàng)面清潔，并維持創(chuàng)面濕潤，然后用無菌剪處理創(chuàng)面內(nèi)壞死組織與膿性分泌物，處理后用0.9%氯化鈉溶液再進(jìn)行1次沖洗，根據(jù)創(chuàng)面的情況修剪醫(yī)用海綿，比較大可以選擇硅膠引流管，而較小較淺的創(chuàng)面則選用靜脈輸液器。清除傷口壞死物，感染創(chuàng)面根據(jù)細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)結(jié)果選擇抗生素配合治療。

觀察組消毒清創(chuàng)的方法與對照組相同。同時用無菌剪刀清理創(chuàng)面內(nèi)壞死腐敗的組織，直至創(chuàng)面清潔。此外采用間充質(zhì)干細(xì)胞治療干預(yù)，采用同種異體間充質(zhì)干細(xì)胞萃取液，局部外用噴涂，然后無菌敷料覆蓋患肢創(chuàng)面并進(jìn)行加壓處理和包扎處理，1次/d或根據(jù)創(chuàng)面情況隔日1次換藥，直至傷口愈合。

1.4 觀察指標(biāo)

①對比兩組臨床治療有效率。療效評定標(biāo)準(zhǔn)：顯效為治療后，患者創(chuàng)面愈合完全，無分泌物，疼痛感基本消失，新生上皮肉芽組織覆蓋原創(chuàng)面，皮膚基本平整。有效為治療后，患者創(chuàng)面有較為顯著的縮小及好轉(zhuǎn)，不產(chǎn)生分泌物或分泌物減少，疼痛感覺減少，肉眼可見紅潤肉芽組織增生。無效為治療后，患者創(chuàng)面無顯著的縮小及好轉(zhuǎn)，甚至進(jìn)一步擴(kuò)大，疼痛感覺仍存在，滲出的膿性分泌物明顯增多或無變化?？傆行?（顯效例數(shù)+有效例數(shù)）/總例數(shù)×100%。

②對比兩組創(chuàng)面修復(fù)時間。記錄干預(yù)后兩組患者的愈合時間并進(jìn)行比較。

③對比兩組創(chuàng)面組織VEGF表達(dá)水平。選取創(chuàng)面組織進(jìn)行酶聯(lián)免疫法方法檢測VEGF的表達(dá)水平。

④對比兩組研究不良事件發(fā)生率。

1.5 統(tǒng)計方法

采用SPSS 24.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料符合正態(tài)分布，以（）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)；計數(shù)資料以例數(shù)（n）和率（%）表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者臨床治療有效率比較

觀察組總有效率顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

2.2 兩組患者創(chuàng)面修復(fù)時間與創(chuàng)面組織VEGF表達(dá)水平比較

觀察組創(chuàng)面愈合時間短于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001）；干預(yù)后，觀察組VEGF表達(dá)水平顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001）。見表3。

表3 兩組患者創(chuàng)面修復(fù)時間與創(chuàng)面組織VEGF表達(dá)水平比較()

表3 兩組患者創(chuàng)面修復(fù)時間與創(chuàng)面組織VEGF表達(dá)水平比較()

組別觀察組（n=30）對照組（n=30）χ2值P值創(chuàng)面愈合時間（d）12.43±2.18 18.69±2.08 13.029＜0.001創(chuàng)面組織VEGF表達(dá)水平（pg/mg）干預(yù)前50.39±8.09 50.18±7.26 0.982 0.042干預(yù)后240.29±19.39 163.49±20.06 11.279＜0.001

2.3 兩組患者不良事件發(fā)生情況比較

兩組患者在治療期間，密切關(guān)注患者的每日狀態(tài)，記錄傷口愈合情況，未發(fā)現(xiàn)患者有不良事件發(fā)生。

3 討論

慢性創(chuàng)面的發(fā)生與多種因素有關(guān)，對于大多數(shù)壓力性損傷來說，都與缺血-再灌注期的損傷有關(guān)，在這類患者的病程中，常常可以發(fā)現(xiàn)缺血情況的反復(fù)，從而最終導(dǎo)致組織出現(xiàn)潰瘍[7-8]。此外，創(chuàng)面的分泌物利于細(xì)菌繁殖，當(dāng)清創(chuàng)不徹底時易滋生細(xì)菌，增大了發(fā)生繼發(fā)感染的可能[9]。創(chuàng)面修復(fù)通常經(jīng)歷4個階段：止血/凝固期、炎癥期、增殖期、成熟/重塑期，在這一過程中需要多種細(xì)胞、細(xì)胞因子、生長因子相互協(xié)調(diào)[10]，任何階段異常都不利于創(chuàng)面的愈合。其中生長因子能夠調(diào)節(jié)炎癥因子，促進(jìn)肉芽組織與血管的形成。生長因子不足，例如VEGF、血小板衍生因子和轉(zhuǎn)化生長因子β等的水平降低，都會延遲創(chuàng)面的愈合[11-14]，臨床上達(dá)到解剖和功能上的恢復(fù)仍是需要解決的一大難題。

本研究結(jié)果顯示，干預(yù)后，觀察組總有效率為93.33%，顯著高于對照組的83.33%（P＜0.05），顯示同種異體間充質(zhì)干細(xì)胞的使用效果較傳統(tǒng)的治療方案效果好。這與陳若曦等[15]研究結(jié)果一致，其研究提示，患者經(jīng)過同種異體間充質(zhì)干細(xì)胞治療后總有效率為為100%，明顯高于對照組的92%（P＜0.05）。同時，本研究觀察組創(chuàng)面愈合時間短于對照組，VEGF表達(dá)水平高于對照組（P＜0.001）。治療期間，密切關(guān)注兩組患者的每日狀態(tài)，記錄傷口愈合情況，未發(fā)現(xiàn)有不良事件發(fā)生。這與夏鵬等[16]相似研究結(jié)果一致。

這是因?yàn)?，間充質(zhì)干細(xì)胞是干細(xì)胞的重要成員，廣泛存在于骨髓、羊水、脂肪、臍帶中[12]，在不同的誘導(dǎo)條件下，間充質(zhì)干細(xì)胞能夠分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞與脂肪細(xì)胞等，分化能力強(qiáng)，對組織再生修復(fù)具有良好的生理學(xué)基礎(chǔ)[13]。Keshtkar S等[14]研究人員首次將自體間充質(zhì)干細(xì)胞注射到慢性創(chuàng)面周圍，發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細(xì)胞能夠加速創(chuàng)面愈合的進(jìn)程。相比于全身給藥，局部細(xì)胞移植細(xì)胞損耗率更低，植入率相對較高，能直接到達(dá)創(chuàng)面，縮短起效時間且安全性更好，已逐漸被接受。間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)創(chuàng)面的主要機(jī)制包括：旁分泌特性；調(diào)節(jié)免疫功能，減輕炎癥，促進(jìn)血管再生，增加瘢痕形成；遷移與歸巢和分化為表皮或內(nèi)皮細(xì)胞，提高傷口愈合率。VEGF是一種高度特異性的促血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子，具有廣泛調(diào)節(jié)血管再生、促進(jìn)損傷創(chuàng)面愈合的作用。其中的生長因子VEGF是通過VEGF受體起作用，能誘導(dǎo)新生血管形成，特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞促進(jìn)其增殖分裂，并促進(jìn)創(chuàng)面愈合。

綜上所述，對進(jìn)行慢性創(chuàng)面修復(fù)的患者實(shí)施間充質(zhì)干細(xì)胞治療干預(yù)，能夠有效提高患者臨床治療有效率，縮短修復(fù)時間，患者治療的安全性得到保障。