新生兒無乳鏈球菌的耐藥性分析

摘要：目的 分析某綜合醫(yī)院新生兒無乳鏈球菌（Streptococcus agalactiae）檢出及其耐藥情況，為臨床醫(yī)生治療新生兒無乳鏈球菌抗感染提供依據(jù)。方法 選取2017年1月—2022年12月醫(yī)院新生兒科無乳鏈球菌分離株。所有菌株經(jīng)BD PhoenixTM-100型全自動(dòng)微生物分析儀或紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥物敏感實(shí)驗(yàn)。結(jié)果 2017年—2022年，新生兒科累計(jì)住院人數(shù)總數(shù)為16 772人，共檢出無乳鏈球菌243株。來源于胃液分泌物標(biāo)本186株，占76.54%，其次為血液標(biāo)本51株，占20.99%；無乳鏈球菌感染女性新生兒人數(shù)略高于男性；無乳鏈球菌的藥敏試驗(yàn)顯示菌株對氨芐西林、頭孢吡肟、利奈唑胺、美羅培南、青霉素和萬古霉素尚未耐藥。紅霉素六年耐藥率均大于57.1%；四環(huán)素六年耐藥率均大于64.7%，總耐藥率在73.8%；左氧氟沙星六年耐藥率在25.5%～42.9%，總耐藥率在31.4%。結(jié)論 為臨床兒科醫(yī)生進(jìn)行有效的抗感染預(yù)防和治療提供重要的依據(jù)，同時(shí)有助于降低新生兒不良反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)。

關(guān)鍵詞：新生兒；無乳鏈球菌；感染率；耐藥；孕婦；耐藥監(jiān)測

中圖分類號(hào)：R978" " " " "文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A" " " " "文章編號(hào)：1001-8751（2024）05-0331-05

Analysis of Drug Resistance of Streptococcus agalactiae in Neonates

Su Ning ，" Yuan Lu

（Suzhou Municipal Hospital Medical Laboratory，" "Suzhou" "215000）

Abstract： Objective To analyze the detection of Streptococcus agalactiae （Group B Streptococcus） and its drug resistance in neonates within a general hospital. This analysis aims to provide clinicians with valuable insights for treating neonatal Streptococcus agalactiae infections effectively. Methods Between January 2017 and December 2022， isolates of Streptococcus agalactiae were obtained from the hospital's neonatal unit. All strains underwent drug susceptibility testing using the BD PhoenixTM-100 fully automated microbiology analyzer or the paper diffusion method. Results Over the period of 2017 to 2022， the neonatal unit recorded a total of 16，772 hospitalizations， among which 243 strains of Streptococcus agalactiae were identified. Gastric fluid secretion specimens accounted for 76.54% （186 strains）， followed by blood specimens at" 20.99% （51 strains）. The number of Streptococcus agalactiae infections was slightly higher in female neonates compared to males. Drug susceptibility testing revealed that strains showed no resistance to ampicillin， cefepime， linezolid， meropenem， penicillin， and vancomycin. However， erythromycin had a resistance rate of more than 57.1% over the six-year period; tetracycline had a resistance rate of more than 64.7% over the same period， totaling 73.8%; and levofloxacin had a six-year resistance rate ranging from 25.5% to 42.9%， with an overall resistance rate of 31.4%. Conclusion This work provides a critical basis for the prevention and management of Streptococcus agalactiae infections in neonates. It aims to assist pediatric clinicians in minimizing the risk of adverse outcomes in neonatal care.

Key words： newborns;" "Streptococcus agalactiae;" "infection rate;" "drug resistance;" "pregnant women;" "resistance monitoring

無乳鏈球菌又稱B族鏈球菌（Group B Streptococcus，

GBS）是一種革蘭陽性球菌，存在于20%的健康女性體內(nèi)，是胃腸道和生殖道正常菌群的一部分。根據(jù)疾病控制與預(yù)防中心（CDC）指南[1]，建議在胎齡35～37周時(shí)進(jìn)行GBS篩查，大多數(shù)GBS感染可以通過普遍篩查和分娩時(shí)抗菌藥物預(yù)防（IAP）。雖然抗生素預(yù)防顯著降低了GBS感染的發(fā)生率，但死亡率仍然很高。GBS可通過垂直傳播引起新生兒敗血癥、腦膜炎和肺炎。GBS是新生兒感染和死亡的主要原因[2]。了解本地區(qū)的新生兒標(biāo)本GBS分布情況及藥物敏感狀況，既利于臨床兒科醫(yī)生進(jìn)行經(jīng)驗(yàn)性抗感染用藥治療，又能有效降低新生兒的死亡率、減少住院天數(shù)和醫(yī)療費(fèi)用。本研究分析了南京醫(yī)科大學(xué)附屬蘇州醫(yī)院2017年—2022年新生兒GBS檢出情況及其耐藥特點(diǎn)，為臨床兒科醫(yī)生進(jìn)行有效的抗感染預(yù)防和治療提供重要的依據(jù)，同時(shí)有助于降低新生兒不良結(jié)局發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。

1 材料及方法

1.1 菌株來源

選取2017年1月—2022年12月南京醫(yī)科大學(xué)附屬蘇州醫(yī)院新生兒科標(biāo)本分離菌株。其中咽拭子用壓舌板壓舌，用無菌拭子從咽喉、扁桃體和發(fā)炎區(qū)采樣后立即送微生物實(shí)驗(yàn)室；血培養(yǎng)在抗菌藥物治療前，發(fā)熱初期或高峰時(shí)抽血，同時(shí)在不同部位采集2套，采血量為1～2 mL；腦脊液標(biāo)本是由臨床醫(yī)師以無菌要求做腰椎穿刺，抽取腦脊液2～3 mL，盛于無菌容器中送檢必須于采集后立即送檢；眼分泌物留取采樣前先用無菌鹽水潤濕拭子，再取結(jié)膜囊中膿性分泌物送檢；胃液標(biāo)本在出生1 h內(nèi)至開奶前期行胃液抽取送檢培養(yǎng)檢查。剔除同一患者同一標(biāo)本類型重復(fù)分離株。

1.2 儀器與試劑

BD PhoenixTM-100型全自動(dòng)微生物分析儀（美國）及配套試劑或梅里埃公司的Vitek2 Compact全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)（法國）及配套試劑、Bruker公司輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜儀（德國）、貝索革蘭染色液（中國）、Oxoid公司的藥敏紙片（英國）及安圖哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基、巧克力培養(yǎng)基、M-H培養(yǎng)基（中國）。

1.3 標(biāo)本處理、涂片和分離培養(yǎng)程序

咽拭子及血培養(yǎng)報(bào)陽標(biāo)本接種哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基+麥康凱培養(yǎng)基+巧克力培養(yǎng)基，腦脊液、胃液及胸水接種哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基+麥康凱培養(yǎng)基置于5%CO2環(huán)境中35 ℃培養(yǎng)18～48 h，觀察是否有可疑致病菌生長。

1.4 菌株鑒定程序

所有菌株經(jīng)布魯克（Bruker）輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜儀進(jìn)行鑒定。

1.5 藥敏實(shí)驗(yàn)

藥敏實(shí)驗(yàn)采用BD PhoenixTM-100型全自動(dòng)微生物分析儀或紙片擴(kuò)散法，藥敏判斷標(biāo)準(zhǔn)是按照當(dāng)年的美國實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)發(fā)布的文件，質(zhì)控菌株為肺炎鏈球菌ATCC49619。

1.6 質(zhì)量控制資料

大腸埃希菌ATCC25922和肺炎鏈球菌ATCC49619為質(zhì)控菌株，質(zhì)控菌株藥敏結(jié)果均在控，研究菌株結(jié)果方可納入數(shù)據(jù)分析。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用Whonet 5.6軟件及SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。所得數(shù)據(jù)以例數(shù)或株數(shù)（n）和構(gòu)成比（%）表示。

2 結(jié)果

2.1 GBS檢出情況

2017年1月1日—2022年12月30日，在剔除同一患者同一標(biāo)本類型檢出相同菌株后，新生兒科共檢出GBS 243株。主要來源于胃液分泌物標(biāo)本186株，占76.54%，其次為血液標(biāo)本和腦脊液標(biāo)本，分別占20.99%和1.23%。其中有16例患兒同時(shí)在血液和胃液中檢出GBS，有3例患兒同時(shí)在腦脊液和血液中檢出GBS。結(jié)果見表1。

2.2 GBS陽性新生兒基本情況

2017年1月1日—2022年12月30日在剔除同一患者檢出相同菌株后，新生兒科檢出GBS人數(shù)共有224人，其中新生兒重癥監(jiān)護(hù)病房80例，占35.71%；新生兒普通病房144例，占64.29%。GBS感染患兒其中男105例，占46.88%；女119例，占53.12%。結(jié)果見表2。

2.3 GBS耐藥分析

243株GBS菌株耐藥率，對紅霉素和四環(huán)素呈現(xiàn)較高的耐藥率，分別為77.8%和73.7%，對克林霉素為59.4%，其中紅霉素的半數(shù)抑菌濃度（MIC50）和90%抑菌濃度（MIC90）均8 μg/mL；四環(huán)素的MIC50 和MIC90均≥16 μg/mL。所有菌株對萬古霉素、青霉素、頭孢吡肟、頭孢噻肟、美羅培南和利奈唑胺均敏感，其中左氧氟沙星的MIC50為0.5 μg/mL，MIC90為8 μg/mL，對氯霉素敏感率在91.3%以上。結(jié)果見表3。

2.4 不同年度GBS菌株耐藥率變遷

2017年—2022年分離出的GBS對氨芐西林、頭孢吡肟、利奈唑胺、美羅培南、青霉素G和萬古霉素均未發(fā)現(xiàn)耐藥菌株；氯霉素的耐藥率均較低；紅霉素六年耐藥率均大于57.1%；四環(huán)素六年耐藥率均大于64.7%，總耐藥率在73.8%；左氧氟沙星六年耐藥率在25.5%～42.9%，總耐藥率在31.4%。結(jié)果見表4。

3 討論

GBS感染引起的疾病在中國尚還沒有得到很好的認(rèn)識(shí)。本次研究不僅可以為臨床醫(yī)生和公眾提高對GBS感染的認(rèn)識(shí)，提供一些治療的參考；而且有助于控制GBS感染，從而減少死亡。使臨床醫(yī)生能夠及時(shí)和正確地診斷GBS疾病[3]。產(chǎn)婦下消化道和泌尿生殖道攜帶GBS是新生兒GBS敗血癥的主要危險(xiǎn)因素。在部分其他國家的定植率10%～30%之間[4-5]，而我國的定植率12%～33.7%之間[6-7]。因目前在中國孕婦產(chǎn)前檢查是否攜帶GBS并沒有標(biāo)準(zhǔn)的篩查政策，孕婦GBS定植的實(shí)際情況也不清楚。提示如果對孕婦母體進(jìn)行GBS篩查和分娩時(shí)抗生素預(yù)防，其實(shí)一些新生兒因GBS感染導(dǎo)致死亡是可以避免的。

據(jù)中國細(xì)菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)（CHINET）2021年數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示生殖道標(biāo)本量占所有微生物標(biāo)本量的1.0％[8]。本院生殖道送檢率為37.13%，生殖道培養(yǎng)陽性率為12%，由于本院婦產(chǎn)科就診人數(shù)較多，故本院生殖道送檢率會(huì)比全國要高，但是新生兒GBS感染率，也在呈現(xiàn)上升趨勢，故對于本院孕婦GBS篩查，針對GBS預(yù)防性使用抗生素的情況：（1）既往有新生兒GBS病史；（2）在妊娠≥36周內(nèi)發(fā)現(xiàn)GBS培養(yǎng)結(jié)果陽性；（3）在妊娠期間出現(xiàn)GBS菌尿。此次妊娠GBS篩查結(jié)果未知，但若有以下至少1項(xiàng)高危因素：早產(chǎn)不能避免、未足月產(chǎn)時(shí)發(fā)熱≥38 ℃、胎膜早破或胎膜破裂≥18 h。對于有指征的孕婦，在進(jìn)入產(chǎn)程或胎膜早破后盡早靜脈注射抗生素[9]。孕婦定植GBS會(huì)導(dǎo)致上行感染胎膜，引發(fā)宮內(nèi)感染與早產(chǎn)，使新生兒死亡風(fēng)險(xiǎn)極大增加。

在全球范圍內(nèi)，監(jiān)測數(shù)據(jù)顯示，GBS菌株對青霉素/氨芐西林均具有相同的敏感性。本研究獲得的GBS抗生素敏感性模式與Khan等[10]報(bào)道的一致。青霉素是預(yù)防和治療GBS疾病的一線推薦藥物[3]。本研究中的243株GBS分離株對青霉素均敏感，這說明青霉素仍然是預(yù)防的首選藥物。同時(shí)可推薦紅霉素作為替代品，尤其適用于青霉素過敏的新生兒。雖然在中國還沒有發(fā)現(xiàn)青霉素非易感的GBS菌株[11-12]，但與之前類似研究發(fā)現(xiàn)，GBS菌株對紅霉素、克林霉素和四環(huán)素具有較高的耐藥性[13-14]。歐洲國家對紅霉素的耐藥率各不相同，意大利耐藥率為43.7%，瑞士耐藥率為30.0%[15]，瑞典耐藥率為14.5%[16]。而本研究紅霉素耐藥率在77.8%，明顯高于歐洲國家[17]。本研究發(fā)現(xiàn)四環(huán)素藥物耐藥率有穩(wěn)定趨勢，估計(jì)是因?yàn)樗沫h(huán)素的不良副作用，導(dǎo)致有意避免使用該藥物，故耐藥率呈現(xiàn)穩(wěn)定趨勢。抗生素的廣泛使用有效減少了產(chǎn)婦和新生兒的感染率，降低了嚴(yán)重疾病的發(fā)生和死亡率，但同時(shí)也帶來了細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)和耐藥菌株傳播的風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí)，高比例的GBS對紅霉素、克林霉素、四環(huán)素和喹諾酮類藥物耐藥，這對GBS感染的管理提出了挑戰(zhàn)。

綜上所述，我院新生兒GBS感染率在增加，臨床應(yīng)重視孕婦GBS的篩查和分娩時(shí)預(yù)防性抗生素的使用。加強(qiáng)高危新生兒的監(jiān)護(hù)工作，以降低GBS感染風(fēng)險(xiǎn)。臨床實(shí)驗(yàn)室需不斷優(yōu)化管理流程，確保檢驗(yàn)的精確度和實(shí)驗(yàn)室的安全標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)提高服務(wù)效率，為臨床醫(yī)師提供迅速且準(zhǔn)確的檢測報(bào)告，以此作為合理運(yùn)用抗菌藥物的重要參考。

參 考 文 獻(xiàn)

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