高危型人乳頭瘤病毒感染與泌尿生殖道支原體感染的關系分析*

陳海城,謝平霖△,方炳雄,余彩瑤,莊蓓麗

廣東省揭陽市普寧市人民醫院:1.精準醫學中心;2.檢驗科,廣東揭陽 515300

泌尿生殖道支原體(以下簡稱支原體)和高危型人乳頭瘤病毒(HR-HPV)是引起女性泌尿生殖道感染的兩種常見的性傳播疾病病原體[1]。支原體在泌尿生殖道感染中常以解脲支原體(Uu)和人型支原體(Mh)為主[2],其不僅常引起非淋菌性陰道炎,還可導致不孕不育等[3],其耐藥菌株的增加也給臨床治療增加了困難[4]。而HR-HPV感染不僅僅是宮頸癌的主要危險因素之一,還會影響女性陰道微生態的穩態[5]。為了探討HR-HPV感染與支原體感染及其耐藥率的關系,以期為臨床對HR-HPV感染、支原體感染的診療提供一定的參考,本研究對2021年5月至2022年12月來本院就診且同時進行支原體檢測、支原體藥敏試驗和HR-HPV檢測患者的檢測結果進行回顧性分析,現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2021年5月至2022年12月在本院就診且同時進行HR-HPV檢測、支原體檢測和支原體藥敏試驗的疑似泌尿生殖道感染女性患者共9 662例作為研究對象,患者平均年齡為(37.2±11.2)歲。所有患者在標本采集前1周內未全身或局部使用抗菌藥物。

1.2儀器與試劑 支原體檢測和藥敏試驗所采用的支原體鑒定、支原體藥敏試驗的試劑盒由珠海市麗拓生物科技股份有限公司生產;HR-HPV檢測則使用產自潮州凱普生物化學有限公司的磁珠法提取試劑盒、人乳頭瘤病毒核酸擴增試劑盒、人乳頭瘤病毒雜交檢測試劑盒。儀器主要有潮州凱普生物化學有限公司的全自動核酸提取儀(HBNP-4801A)、北京東勝創新生物科技有限公司的PCR擴增儀(ETC811)和潮州凱普生物化學有限公司的全自動核酸分子雜交儀(HBHM-900A)等。

1.3方法

1.3.1標本采集 嚴格按照試劑說明書的標本要求采集標本。用陰道張開器暴露宮頸,使用無菌棉拭子采集宮頸分泌物標本(即取宮頸內口1～2 cm的單層柱狀上皮細胞)用于支原體鑒定、藥敏試驗;然后再用宮頸刷在宮頸口輕輕搓動,旋轉幾周,確保取得足夠量的脫落細胞,并將其放入專用取樣管中,用于人乳頭瘤病毒檢測。標本采集后于2 h內送檢。

1.3.2檢測方法 使用培養法進行支原體的檢測,使用稀釋法進行12種抗菌藥物的藥敏試驗。12種抗菌藥物包括第1代大環內酯類藥物(紅霉素和交沙霉素)、第2代大環內酯類藥物(羅紅霉素、克拉霉素和阿奇霉素)、四環素類藥物(四環素、強力霉素和美滿霉素)和喹諾酮類藥物(氧氟沙星、司帕沙星、左氧氟沙星和諾氟沙星)。HR-HPV的檢測方法為PCR反向點雜交法,檢測的高危型分型有16、18、52、53、39、45、56、58、59、66、68、31、33、35、51,共15種。嚴格按照試劑說明書要求進行支原體檢測、支原體藥敏試驗和HR-HPV檢測。

1.3.3結果判斷標準

1.3.3.1支原體鑒定、藥敏試驗結果判讀 先判讀質控孔的試驗結果,如質控結果在控,再根據試劑盒說明書判讀支原體鑒定、藥敏試驗的結果;如果質控失控,則本次檢測無效。

1.3.3.2HR-HPV結果判讀 先判讀陰陽質控、IC質控點、空白質控點的結果,再根據試劑盒說明書判讀人乳頭瘤病毒分型檢測結果;如質控失控,則本次檢測無效,需重新采樣檢測。

1.4統計學處理 使用SPSS26.0軟件對數據進行處理,計數資料以例數和百分率表示,組間比較采用χ2檢驗,以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1支原體與HR-HPV的感染情況 在9 662例患者中,HR-HPV的陽性率為15.3%(1 482/9 662),支原體的陽性率為44.7%(4 321/9 662),二者的混合感染率為9.6%(931/9 662)。在HR-HPV與支原體的混合感染中,以HR-HPV與Uu的混合感染為主,其在HR-HPV與支原體混合感染中的占比[64.9%(604/931)]明顯高于HR-HPV+Mh感染[4.3%(40/931)]以及HR-HPV+Uu+Mh感染[30.8%(287/931)]的占比,差異均有統計學意義(χ2=755.1、216.2,P<0.05)。

此外,HR-HPV在支原體陽性患者中的陽性率[21.5%(931/4 321)]明顯高于其在支原體陰性患者中的陽性率[10.3%(551/5 341)],差異有統計學意義(χ2=231.1,P<0.05);而支原體在HR-HPV陽性患者中的陽性率[62.8%(931/1 482)]也明顯高于其在HR-HPV陰性患者中的陽性率[41.4%(3 390/8 180)],差異有統計學意義(χ2=231.1,P<0.05);其中單獨Uu感染、單獨Mh感染、Uu+Mh感染在HR-HPV患者中的陽性率也均明顯高于在HR-HPV陰性患者中的陽性率(χ2=39.5、21.5、188.6,P<0.05)。見表1。

表1 HR-HPV陽性患者與HR-HPV陰性患者的支原體感染情況比較[n(%)]

2.2HR-HPV陽性患者的支原體藥敏試驗結果 在HR-HPV陽性患者支原體感染中,12種抗菌藥物的藥敏試驗結果存在差異,且差異有統計學意義(P<0.05)。其中支原體對喹諾酮類藥物的敏感性普遍較低(敏感性≤10.0%),而對大環內酯類藥物中的交沙霉素和四環素類藥物中的強力霉素、美滿霉素最為敏感(敏感率≥96.0%)。此外支原體耐藥率高的藥物則為喹諾酮類藥物中的氧氟沙星、諾氟沙星,其耐藥率分別為85.4%、97.2%。見表2。

表2 HR-HPV陽性患者感染的支原體藥敏試驗結果(%)

2.3HR-HPV陽性與陰性患者的支原體藥敏試驗結果比較 HR-HPV與支原體混合感染時,在單獨Uu感染中,HR-HPV陽性患者對第2代大環內酯類藥物(羅紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素)和喹諾酮類藥物(氧氟沙星、諾氟沙星)的耐藥率明顯高于HR-HPV陰性患者,差異均有統計學意義(P<0.05),而對其他7種藥物(四環素、強力霉素、美滿霉素、紅霉素、交沙霉素、司帕沙星、左氧氟沙星)的耐藥率差異無統計學意義(P>0.05)。在單獨Mh感染以及Uu+Mh感染中,HR-HPV陽性患者與HR-HPV陰性患者對12種抗菌藥物的耐藥率差異均無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 HR-HPV陽性與陰性患者的支原體耐藥率比較(%)

3 討 論

HR-HPV感染和支原體感染威脅著女性泌尿生殖道系統的健康[6],雖然有報道支原體感染與HR-HPV感染存在某種程度的相互影響[7],但ZHANG等[8]的研究表明二者并不存在相關性,可見在支原體感染與HR-HPV感染之間的關系尚未明確。

在本研究中,支原體的陽性率為44.7%,低于楊書才等[9]報道的支原體檢出率(53.6%),且HR-HPV的感染率(15.3%)也低于馬俊鳳等[10]報道的HR-HPV檢出率(27.75%),這可能與不同地區人民的生活環境、生活習慣以及性觀念不同有關。在本研究HR-HPV感染的患者中支原體陽性率(21.5%)明顯高于HR-HPV陰性患者(10.3%),且在支原體感染患者中HR-HPV的陽性率(62.8%)也明顯高于支原體陰性患者(41.4%),說明HR-HPV感染與支原體感染之間某種程度上相互影響,這可能是因為HR-HPV對宮頸細胞的侵襲[11]和支原體產生的過氧化氫、超氧化物自由基對宿主細胞及陰道微生態的損害[12]等原因,導致陰道微生態的相對穩態失衡,使患者泌尿生殖系統更易受到其他微生物的感染。除此之外,二者密切相關也可能是由于HR-HPV、支原體都可通過性傳播途徑感染[13],而感染性傳播疾病的患者可能存在性活躍,比普通患者也更易接觸并感染其他的性病病原體。本研究顯示,在HR-HPV與支原體的混合感染中,以HR-HPV與Uu的混合感染為主,這與劉達彬等[14]的報道(支原體的主要感染類型為Uu)相符。

此外,本研究通過對HR-HPV感染患者的支原體藥敏試驗結果進行分析發現,HR-HPV與支原體混合感染時,支原體最為敏感的藥物是四環素類藥物(強力霉素、美滿霉素)和第1代大環內酯類藥物(交沙霉素),敏感率≥96.0%,與曾俊萍等[15]的報道大致相同,說明強力霉素、美滿霉素、交沙霉素在支原體治療中具有很好的效果;而支原體對喹諾酮類藥物的敏感性則普遍偏低,且其耐藥率高的藥物是喹諾酮類藥物中的氧氟沙星、諾氟沙星,提示喹諾酮類藥物不適合用于支原體的一線治療,其耐藥原因可能與支原體的Ⅱ型拓撲異構酶發生基因突變等原因有關[16]。

除此之外,本研究對HR-HPV陽性和陰性患者的支原體藥敏試驗結果進行比較發現,在單獨Mh感染以及Uu+Mh感染中,HR-HPV陽性患者與HR-HPV陰性患者對12種抗菌藥物的耐藥率并無明顯差異;但在單獨Uu感染中,HR-HPV患者對羅紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素、氧氟沙星、諾氟沙星的耐藥率明顯高于HR-HPV陰性患者,差異均有統計學意義(P<0.05),而對其他7種藥物(四環素、強力霉素、美滿霉素、紅霉素、交沙霉素、司帕沙星、左氧氟沙星)的耐藥率則無明顯差異。這可能是因為HR-HPV或HR-HPV的某種分泌產物影響了羅紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素、氧氟沙星、諾氟沙星等抗菌藥物對Uu的作用過程,間接導致了Uu對這5種抗菌藥物的耐藥性增強。

其中,HR-HPV感染提高了Uu對第2代大環內酯類藥物(羅紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素)的耐藥率,而對第1代大環內酯類藥物(紅霉素、交沙霉素)耐藥率無影響。目前微生物對大環內酯類抗菌藥物耐藥機制主要包括細菌產生的滅活酶對大環內酯類藥物結構的破壞以及作用靶位改變(即核糖體亞單位改變)等[17]。而第2代大環內酯類藥物是對紅霉素等第1代大環內酯環類藥物進行化學改造的衍生物[18],提示HR-HPV可能會產生某種破壞大環內酯類藥物結構的滅活物質,而這種滅活物質主要針對進行化學改造后的第2代大環內酯類藥物結構,而對未進行化學改造的第1代大環內酯類藥物結構無明顯影響。

此外,HR-HPV與支原體混合感染時,羅紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素、氧氟沙星、諾氟沙星在HR-HPV作用下在單獨Uu感染時耐藥率升高,但HR-HPV陽性、陰性患者對Uu+Mh感染時的耐藥率卻無明顯變化,這可能與Mh本身對這5種抗菌藥物的高耐藥率[19]有關。

綜上所述,HR-HPV感染與支原體感染之間存在聯系,臨床上發現支原體感染時應警惕是否同時存在HR-HPV感染,可有效預防宮頸癌;而對于支原體合并HR-HPV感染的情況,可選用強力霉素、美滿霉素、交沙霉素或根據藥敏試驗結果選用合適藥物對支原體感染進行有效治療。此外,HR-HPV感染可提高Uu對一些抗菌藥物的耐藥率,其提高耐藥性的機制尚未明確,因此對于Uu合并HR-HPV感染時,即使藥敏試驗結果顯示Uu對羅紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素、氧氟沙星、諾氟沙星敏感,也應避免應用此類抗菌藥物進行Uu感染的治療。