急性大血管閉塞性卒中患者中omentin-1、AQP4、VILIP-1與急診血管內(nèi)治療后血管再通的關(guān)系

張海江，樊海梅，陳杰，任國勇，吳雪梅

（太原鋼鐵（集團(tuán)） 有限公司總醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，太原 030000）

急性大血管閉塞性卒中 （acute large vessel occlusion stroke，ALVOS） 為缺血性卒中常見類型，發(fā)病后如未及時診療，可誘發(fā)一系列嚴(yán)重并發(fā)癥，嚴(yán)重影響患者生命安全［1］。靜脈溶栓為缺血性卒中的主要治療方案，可有效改善時間窗內(nèi)患者的生存率，但對ALVOS的治療效果欠佳。研究［2］表明，單純靜脈溶栓后ALVOS的再通率僅約5%。血管內(nèi)治療可將治療時間窗延長至6～18 h，顯著提高患者血管再通率，但部分患者術(shù)后血管仍存在閉塞情況［3］。目前已有研究［4］證實，血清網(wǎng)膜素-1 （omentin-1）、水通道蛋白4 （aquaporin 4，AQP4）、視錐蛋白樣蛋白-1（visinin-like protein 1，VILIP-1） 水平與缺血性卒中的發(fā)生、發(fā)展有一定聯(lián)系，但鮮有關(guān)于其與血管內(nèi)治療后血管再通關(guān)系的研究。因此，本研究分析了ALVOS患者中omentin-1、AQP4、VILIP-1與急診血管內(nèi)治療后血管再通的相關(guān)性及其預(yù)測價值。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選取2020年1月至2022年11月我院收治的110例行急診血管內(nèi)治療的ALVOS患者，其中男59例，女51例；年齡46～87歲，平均 （65.73±9.82） 歲；體質(zhì)量指數(shù) （23.95±0.64） kg/m2；發(fā)病至血管內(nèi)治療時間（5.56±1.74） h。根據(jù)術(shù)后血管是否再通，分為未再通組（23例） 和再通組（87例） 。本研究經(jīng)我院倫理委員會審核批準(zhǔn) （批準(zhǔn)文號：201905）。

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2014》［5］中ALVOS相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；發(fā)病至血管內(nèi)治療時間＜16 h；家屬知曉本研究，并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并顱內(nèi)出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血者；合并凝血系統(tǒng)疾病者；頸內(nèi)動脈伴大腦中動脈閉塞者；入組前30 d接受過手術(shù)治療、嚴(yán)重系統(tǒng)性出血者；合并精神異常或檢查、治療依從性較差者。

1.2 方法

1.2.1 資料收集：采用醫(yī)院自制調(diào)查問卷收集所有患者的臨床資料，包括性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)、吸煙史、飲酒史、高血壓史、心房顫動史、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病史、糖尿病史、高脂血癥史、發(fā)病至血管內(nèi)治療時間、術(shù)前美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表 （National Institute of Health stroke scale，NIHSS） 評分、術(shù)前Alberta卒中項目早期CT評分 （Alberta Stroke Program Early CT Score，ASPECTS）、靶血管 （頸內(nèi)動脈、大腦中動脈、椎基底動脈）、TOAST分型 （大動脈粥樣硬化型、心源性等）、是否接受靜脈溶栓、血管內(nèi)治療方式 （支架取栓、抽吸取栓、直接球囊或支架）。

1.2.2 血常規(guī)檢測：入院時抽取外周靜脈血5 mL，送至檢驗科檢測白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、血小板、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、總膽固醇、血糖、血紅蛋白。

1.2.3 血清指標(biāo)檢測：采集所有患者術(shù)前和術(shù)后1個月空腹外周靜脈血5 mL，經(jīng)離心半徑8 cm、3 500 r/min離心10 min后，分離血清保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清VILIP-1、omentin-1、AQP4水平，選用HED-SY96S型酶標(biāo)儀，試劑盒購自武漢生源科技有限公司，所有操作均嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 23.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。符合正態(tài)分布的計量資料用±s表示，2組間比較采用獨立樣本t檢驗；計數(shù)資料用率表示，2組間比較采用χ2檢驗。采用LASSO回歸分析初篩術(shù)后血管再通預(yù)測因素，采用logistic回歸分析ALVOS患者血管內(nèi)治療術(shù)后血管再通相關(guān)影響因素，采用R語言對logistic回歸進(jìn)行列線圖可視化分析，獲取列線圖預(yù)測一致性指數(shù)（C-index），采用受試者操作特征 （receiver operating characteristic，ROC） 曲線評價相關(guān)影響因素對ALVOS患者血管內(nèi)治療術(shù)后血管再通的預(yù)測價值，獲取曲線下面積 （area under the curve，AUC）、95%CI等。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組臨床資料和omentin-1、AQP4、VILIP-1水平的比較

如表1所示，未再通組高血壓患者占比、術(shù)前NIHSS評分、急診血糖、AQP4和VILIP-1水平高于再通組，發(fā)病至血管內(nèi)治療時間長于再通組，術(shù)前ASPECTS、靜脈溶栓患者占比、血小板、omentin-1水平低于再通組 （均P＜ 0.05）。

表1 2組患者臨床資料以及omentin-1、AQP4、VILIP-1水平的比較Tab.1 Comparison of clinical data and omentin-1，AQP4，and VILIP-1 levels between the two groups

2.2 術(shù)后血管再通預(yù)測因素初篩

以單因素分析中P＜ 0.05的10個變量為自變量，以術(shù)后血管再通情況 （賦值：再通=0，未再通=1） 為因變量，進(jìn)行LASSO回歸分析。模型初始納入的10個影響因素的系數(shù)隨著懲罰系數(shù)λ變化被壓縮，避免了模型的過度擬合，達(dá)到最佳影響因素選擇的效果圖 （圖1）。采用交叉驗證法繪制均方誤差隨lgλ的變化圖 （圖2），尋找到可使模型性能優(yōu)良且影響因素最少的最佳懲罰系數(shù)λ，即圖中虛線對應(yīng)的λ=-4。依據(jù)此λ值，選出6個預(yù)測變量，分別為發(fā)病至血管內(nèi)治療時間、術(shù)前NIHSS評分、術(shù)前ASPECTS、omentin-1、AQP4、VILIP-1。

圖1 LASSO回歸篩選變量動態(tài)過程圖Fig.1 Dynamic process of LASSO regression screening variables

圖2 交叉驗證最佳參數(shù)λ的選擇過程圖Fig.2 Diagram of the selection process of the optimal parameter λ for cross-validation

2.3 術(shù)后血管再通因素的logistic回歸分析

以LASSO回歸篩選出的發(fā)病至血管內(nèi)治療時間、術(shù)前NIHSS評分、術(shù)前ASPECTS、omentin-1、AQP4、VILIP-1為自變量 （賦值同LASSO回歸），以術(shù)后血管再通情況 （賦值：再通=0，未再通=1） 為因變量，建立非條件logistic回歸模型。采用逐步后退法對變量進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，術(shù)前ASPECTS、omentin-1水平是術(shù)后血管再通的相關(guān)獨立保護(hù)因素，發(fā)病至血管內(nèi)治療時間、術(shù)前NIHSS評分、AQP4和VILIP-1水平是術(shù)后血管再通的相關(guān)獨立危險因素 （P＜ 0.05）。見表2。

表2 術(shù)后血管再通因素的logistic回歸分析Tab.2 Logistic regression analysis of postoperative revascularization

2.4 列線圖預(yù)測術(shù)后血管再通

運用R語言對logistic回歸進(jìn)行列線圖可視化分析，結(jié)果顯示，術(shù)前ASPECTS、omentin-1水平越高，術(shù)后血管再通可能性越大；發(fā)病至血管內(nèi)治療時間、術(shù)前NIHSS評分、AQP4和VILIP-1水平越高，術(shù)后血管再通可能性越小。各預(yù)測因素對應(yīng)的概率值見圖3；該列線圖預(yù)測術(shù)后血管再通的C-index為0.994，呈現(xiàn)出良好的區(qū)分度。

圖3 列線圖預(yù)測術(shù)后血管再通Fig.3 Nomogram predicting postoperative revascularization

2.5 列線圖的評價與驗證

列線圖的ROC曲線顯示，列線圖預(yù)測術(shù)后血管再通的AUC為0.994，預(yù)測靈敏度為98.90%，特異度為95.70%，見圖4。列線圖的校準(zhǔn)曲線顯示，列線圖的校準(zhǔn)度為0.975，列線圖模型與實際觀測結(jié)果曲線貼合度良好，有較好的一致性，見圖5。

圖4 ROC曲線評價列線圖預(yù)測效能Fig.4 Predictive performance of the nomogram evaluated by ROC curve

圖5 校準(zhǔn)曲線評價列線圖的校準(zhǔn)度Fig.5 Calibration of the nomogram evaluated by calibration curve

3 討論

ALVOS的發(fā)病機制為腦大血管發(fā)生急性閉塞，導(dǎo)致供血區(qū)腦組織受損，進(jìn)而引起缺血性腦組織損傷。血管內(nèi)治療為目前臨床治療ALVOS的主要方案，可及時恢復(fù)缺血區(qū)腦組織血流供應(yīng)，修復(fù)受損神經(jīng)元功能，具有較高的血管再通率，患者總體預(yù)后良好［6］。但有研究［7］表明，ALVOS患者血管內(nèi)治療受諸多因素影響，患者術(shù)后血管再通率存在顯著差異。因此，積極探討血管內(nèi)治療后血管再通的早期預(yù)測方案具有重大意義。

脂肪組織為機體最大的內(nèi)分泌器官，而脂肪因子可作用于血管平滑肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，影響血管壁彈性，可參與動脈粥樣硬化的形成、進(jìn)展［8］。本研究發(fā)現(xiàn)，未再通組omentin-1水平低于再通組，推測omentin-1與ALVOS患者血管內(nèi)治療后血管再通存在一定聯(lián)系。omentin-1為一種特異性表達(dá)于網(wǎng)膜脂肪組織的脂肪因子，可誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生一氧化氮合酶磷酸化，促進(jìn)血管舒張，與血小板表面胰島素受體結(jié)合后，可促使血小板內(nèi)環(huán)磷酸鳥苷表達(dá)升高，減少血小板黏附、聚集［9］。國外研究［10］發(fā)現(xiàn)，omentin-1在血管炎癥反應(yīng)中可發(fā)揮抗炎作用，當(dāng)血管內(nèi)皮受損后，omentin-1可降低平滑肌細(xì)胞中細(xì)胞間黏附分子-1、血管細(xì)胞粘附分子-1等因子的表達(dá)，抑制巨噬細(xì)胞吞噬脂質(zhì)成分轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞，從而發(fā)揮抗動脈粥樣硬化形成的作用。另有研究［11］表明，omentin-1水平與缺血性卒中患者血管內(nèi)治療后血管再通呈顯著負(fù)相關(guān) （r= -0.689），可通過抑制線粒體氧化應(yīng)激，促進(jìn)血管內(nèi)皮釋放生物活性物質(zhì)，從而調(diào)節(jié)內(nèi)皮功能，且缺血狀態(tài)下可進(jìn)行血管重塑，減少梗死面積。因此，omentin-1與血管內(nèi)治療后血管再通密切相關(guān)。

本研究還發(fā)現(xiàn)，AQP4、VILIP-1為術(shù)后血管再通的相關(guān)獨立危險因素 （OR分別為4.990和4.815），推測可通過其初步評估預(yù)測血管內(nèi)治療后血管再通情況。AQP為一種膜蛋白，主要介導(dǎo)機體水轉(zhuǎn)運，維持正常水代謝及細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境平衡，其表達(dá)異常可導(dǎo)致局部或全身水代謝紊亂。AQP4主要分布于大腦組織中，腦星形膠質(zhì)細(xì)胞、室管膜上皮細(xì)胞中均有大量AQP4表達(dá)。研究［12］表明，AQP4為腦脊液與血管間水轉(zhuǎn)運及調(diào)節(jié)的重要分子，可維持大腦水平衡，其水平升高后，可促使腦水腫發(fā)生，影響缺血性卒中患者的預(yù)后恢復(fù)。VILIP-1為一種小分子細(xì)胞質(zhì)蛋白，主要表達(dá)于神經(jīng)細(xì)胞中，可激活炎性因子，促使腦細(xì)胞凋亡，進(jìn)一步損傷腦組織功能，還可通過血管內(nèi)膜的浸潤作用影響斑塊穩(wěn)定性［13］。研究［14］發(fā)現(xiàn)，VILIP-1與鈣離子結(jié)合后發(fā)生結(jié)構(gòu)變化，誘導(dǎo)下游網(wǎng)絡(luò)中信號分子變化，可參與β-淀粉樣蛋白的沉積、tau蛋白磷酸化引起的細(xì)胞毒性過程。因此，VILIP-1高表達(dá)的神經(jīng)元細(xì)胞更易受損，導(dǎo)致生理功能缺失，不利于血管內(nèi)治療后血管再通。基于上述研究結(jié)果，本研究嘗試采用R語言對logistic回歸進(jìn)行列線圖可視化分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，omentin-1水平越高，AQP4和VILIP-1水平越低，術(shù)后血管再通可能性越大，且預(yù)測術(shù)后血管再通的C-index為0.994，AUC為0.994，具有較高預(yù)測價值。

綜上所述，ALVOS患者中omentin-1、AQP4、VILIP-1水平與急診血管內(nèi)治療后血管再通密切相關(guān)，可以為臨床早期預(yù)測血管再通提供參考，以制定相應(yīng)的干預(yù)方案，提高血管再通率。