不同類型綠肥混播對土壤真菌群落結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)的影響

摘要：" 為明確不同類型綠肥混播對青海地區(qū)土壤真菌群落結(jié)構(gòu)的影響及其主要驅(qū)動因子，本研究設(shè)置箭筈豌豆和毛苕子混播（HV）、箭筈豌豆和青稞混播（HB）、箭筈豌豆和油菜混播（RS）和箭筈豌豆單播對照（CK）的比較試驗(yàn)，利用宏基因組測序技術(shù)，分析了不同類型綠肥混播對土壤基礎(chǔ)理化性質(zhì)、有機(jī)碳組分、真菌群落多樣性及組成的影響。結(jié)果表明，與箭筈豌豆單播對照（CK）相比，箭筈豌豆和毛苕子混播處理土壤有機(jī)碳含量提高10.84%，箭筈豌豆和油菜混播處理土壤微生物量碳含量增加19.97%。箭筈豌豆和油菜混播處理的土壤真菌群落的豐富度（Chaol指數(shù)）和多樣性（Simpson指數(shù)）比CK分別提高36.42%和11.59%。不同綠肥混播處理還能增加土壤真菌群落組成的豐富度，門水平下箭筈豌豆和青稞混播處理毛霉菌門和擔(dān)子菌門真菌的相對豐度分別提高7.24%和113.09%，箭筈豌豆和油菜混播處理壺菌門真菌的相對豐度提高583.79%。土壤全碳含量和微生物量碳含量與土壤真菌群落結(jié)構(gòu)顯著相關(guān)，是影響土壤真菌群落結(jié)構(gòu)和多樣性的主要驅(qū)動因子。本研究結(jié)果表明綠肥混播比綠肥單播能更好地優(yōu)化土壤環(huán)境和真菌群落結(jié)構(gòu)。

關(guān)鍵詞：" 綠肥；混播；土壤真菌群落；土壤理化性質(zhì)

中圖分類號：" S551""" 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：" A""" 文章編號：" 1000-4440（2024）12-2273-10

收稿日期：2024-06-27

基金項(xiàng)目：國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（2021YFD1700200）；國家綠肥產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目（CARS-22）

作者簡介：王林林（1999-），男，安徽亳州人，碩士研究生，主要從事土壤培肥和溫室氣體減排方面的研究。（E-mail）wll18356770029@163.com

通訊作者：韓" 梅，（E-mail）hanmei20061234@sina.com

王林林，徐" 珂，李正鵬，等. 不同類型綠肥混播對土壤真菌群落結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)的影響［J］. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2024，40（12）：2273-2282.

doi：10.3969/j.issn.1000-4440.2024.12.010

Effects of mixed sowing of different types of green manure on soil fungal community structure and physicochemical properties

WANG Linlin1，" XU Ke2，" LI Zhengpeng1，" YAN Qingbiao1，" HU Falong3，" SHANG Yanjun1，" HAN Mei1

（1.Academy of Agriculture and Forestry Sciences， Qinghai University， Xining 810016， China;2.College of Agriculture and Animal Husbandry， Qinghai University， Xining 810016， China;3.Agronomy College， Gansu Agricultural University， Lanzhou 730070， China）

Abstract：" In order to clarify the effects of mixed sowing of different types of green manure on soil fungal community structure and its main driving factors in Qinghai area， a comparative experiment of mixed sowing of common vetch and hairy vetch （HV）， mixed sowing of common vetch and highland barley （HB）， mixed sowing of common vetch and rape （RS） and single sowing control of common vetch （CK） was set up in this study. The effects of mixed sowing of different types of green manure on soil basic physical and chemical properties， organic carbon components， fungal community diversity and composition were analyzed by metagenomic sequencing technology. The results showed that compared with CK， the soil organic carbon content increased by 10.84% under HV treatment， and the soil microbial biomass carbon content increased by 19.97% under RS treatment. The richness （Chaol index） and diversity （Simpson index） of soil fungal communities in RS treatment were 36.42% and 11.59% higher than those in CK， respectively. The mixed sowing of different types of green manure could also increase the richness of soil fungal community composition. At the phylum level， the relative abundance of Mucoromycota and Basidiomycota in HB treatment increased by 7.24% and 113.09%， respectively. The relative abundance of Chytridiomycota in RS treatment increased by 583.79%. Soil total carbon content and microbial biomass carbon content were significantly correlated with soil fungal community structure， which were the main driving factors affecting soil fungal community structure and diversity. The results of this study showed that green manure mixed sowing could better optimize soil environment and fungal community structure than green manure monoculture.

Key words：" green manure;mixed sowing;soil fungal community;soil physicochemical properties

小麥作為中國重要的糧食作物，其播種面積和產(chǎn)量均約占糧食種植面積和總產(chǎn)量的22%左右。西北地區(qū)的春小麥生產(chǎn)是中國小麥生產(chǎn)的重要組成部分。但該地區(qū)隸屬為高寒干旱氣候區(qū)，春小麥?zhǔn)斋@后農(nóng)田會出現(xiàn)2～3個月空閑期，這造成了大量的光熱資源浪費(fèi)。利用空閑期種植綠肥是提升當(dāng)?shù)匦←溕a(chǎn)能力、改良土壤的重要措施。

綠肥作為一種傳統(tǒng)的農(nóng)用有機(jī)肥，經(jīng)過翻壓還田后能夠提高土壤養(yǎng)分利用效率和總孔隙度、降低土壤容重等，使土壤擁有更好的通透性。韓梅等研究認(rèn)為，青海地區(qū)麥后復(fù)種綠肥可替代下茬小麥30%的氮肥施用量，在改善土壤質(zhì)量、增加土壤微生物活性、提高土壤養(yǎng)分利用效率的同時，還能保證小麥穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)。綠肥根系分泌的有機(jī)酸等代謝物不僅可以調(diào)控土壤相關(guān)酶活性，增加土壤氮素利用率，提高磷和鉀的有效性，還能給土壤中的微生物轉(zhuǎn)化提供底物和能量，改變土壤微生物群落結(jié)構(gòu)，增加放線菌門和厚壁菌門細(xì)菌的相對豐度。趙竟茹等研究認(rèn)為，豆科綠肥連年翻壓還田不僅能夠促進(jìn)糞殼菌目、雙擔(dān)菌屬、擔(dān)子菌門和腐質(zhì)霉屬等真菌在土壤中富集，形成獨(dú)特的土壤微生物群落結(jié)構(gòu)，還能加速土壤碳水化合物的分解和降低土壤病原菌數(shù)量。微生物在作物生長和土壤生態(tài)健康等方面中起著關(guān)鍵作用，研究綠肥種植下土壤微生物群落結(jié)構(gòu)及功能的變化對提高耕地生產(chǎn)潛力具有重要作用。

目前，針對綠肥還田對土壤理化性質(zhì)、養(yǎng)分含量、作物產(chǎn)量以及土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)等方面的影響已有較多研究，而綠肥還田及綠肥混播對土壤真菌群落結(jié)構(gòu)變化的研究相對較少。相比于細(xì)菌和古菌，真菌擁有的營養(yǎng)菌絲體能和植物根尖互惠共生，且土壤真菌群落多樣性和結(jié)構(gòu)對栽培措施更敏銳，更易受土壤環(huán)境因子變化的影響。為此，本研究通過麥后不同類型綠肥混播定位試驗(yàn)，分析不同類型綠肥混播對土壤真菌群落結(jié)構(gòu)的影響，明確不同類型綠肥混播下真菌群落結(jié)構(gòu)變化情況及其驅(qū)動因子，為中國西北地區(qū)春小麥產(chǎn)區(qū)的耕地改良和生產(chǎn)能力提升提供依據(jù)。

1" 材料與方法

1.1" 試驗(yàn)材料及研究區(qū)概況

研究中所用的小麥（Triticum aestivum L.）品種為青春38號，綠肥品種為西牧333號箭筈豌豆（Vicia sativa L.）、土庫曼毛苕（Vicia villosa Roth L.）、昆侖15號青稞（Hordeum vulgare L.）、青雜9號油菜（Brassica napus L.）。

試驗(yàn)于2021-2024年在青海大學(xué)農(nóng)林科學(xué)院不同綠肥混作節(jié)肥減排與養(yǎng)分流失控制技術(shù)試驗(yàn)基地進(jìn)行。該試驗(yàn)基地位于西寧市城北區(qū)莫家泉灣，年平均降水量409.6 mm，年平均氣溫3.4 ℃，全年平均氣溫日較差為10.5 ℃，屬高原大陸性半干旱氣候地區(qū)。試驗(yàn)地土壤類型為栗鈣土，0～30 cm土壤pH 8.39，全氮含量1.01 g/kg，有效磷含量12.64 mg/kg，速效鉀含量116.67 mg/kg，有機(jī)質(zhì)含量17.37 g/kg。

1.2" 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

從2021年至2024年，試驗(yàn)地3-8月初種植春小麥。種植方式為人工條播，行距15 cm，播種量為300 kg/hm2。小麥種植時統(tǒng)一施126 kg/hm2（當(dāng)?shù)爻Ｒ?guī)施氮量的70%）的尿素和112 kg/hm2的過磷酸鈣，其中，尿素的基追比為4∶１，過磷酸鈣全部作為基肥施用。小麥?zhǔn)斋@后旋耕復(fù)種綠肥，設(shè)置箭筈豌豆和毛苕子混播（HV）、箭筈豌豆和青稞混播（HB）、箭筈豌豆和油菜混播（RS）3個綠肥混播處理和箭筈豌豆單播對照（CK）小區(qū)定位試驗(yàn)。各處理綠肥播種量如表１。每小區(qū)面積15 m2（5 m×3 m），每處理3次重復(fù)。綠肥種植期間各處理均不施肥。綠肥進(jìn)入盛花期（10月下旬）后進(jìn)行翻壓。在春小麥的苗期、孕穗期及綠肥的翻壓期采用漫灌方式進(jìn)行灌水，每次灌水量為700 m3/hm2。本文采用2023年的試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

1.3" 樣品采集

于2023年綠肥翻壓前7 d（10月19日）取各小區(qū)土壤刨面原狀土，測定0～30 cm土壤含水量和容重，然后再沿小區(qū)對角線采用直徑2.5 cm的土鉆等距離采集耕層0～30 cm土樣，每個小區(qū)采集5個土壤樣品并混合為1個樣品，將采集的土壤樣品置于帶有液氮的保溫箱中，然后立即轉(zhuǎn)移到實(shí)驗(yàn)室。采集的土壤樣品去除雜質(zhì)和綠肥根系殘?bào)w后分為兩部分，一部分裝入自封袋用于測定土壤化學(xué)性質(zhì)；另一部分裝入50 mL離心管中，用冰盒保存，并委托上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司進(jìn)行宏基因組測定。

1.4" 測定項(xiàng)目與方法

土壤含水量（SWC）和容重（BD）分別采用烘干稱重法和環(huán)刀法測定；土壤全碳（TC）含量和全氮（TN）含量采用Flashsmart元素分析儀（美國Thermo Fisher公司產(chǎn)品）測定；土壤酸堿度（pH）采用PHS-3C pH計(jì)（上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司產(chǎn)品）測定；土壤有機(jī)碳含量（SOC）采用重鉻酸鉀容量法測定；土壤微生物量碳（MBC）含量采用氯仿熏蒸直接浸提法測定；土壤易氧化有機(jī)碳（ROC）含量采用高錳酸鉀氧化法測定；土壤可溶性有機(jī)碳含量（DOC）測定采用水浸提法測定。

采用FastPure 土壤DNA分離試劑盒（上海美吉逾華生物醫(yī)藥科技有限公司產(chǎn)品）提取土壤真菌DNA。用1%瓊脂糖凝膠電泳來檢測土壤真菌DNA的含量和純度后，用Covaris M220超聲破碎儀（美國Covaris公司產(chǎn)品）將DNA片段化，篩選約300 bp的片段，再利用NovaSeq 6000測序平臺（美國Illumina公司產(chǎn)品）進(jìn)行宏基因組測序。

1.5" 數(shù)據(jù)處理

測序獲得的數(shù)據(jù)在上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司提供的云平臺（https：//cloud.majorbio.com/）上進(jìn)行處理和分析。使用DIAMOND軟件將非冗余基因集與非冗余數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對，獲得物種注釋數(shù)量統(tǒng)計(jì)結(jié)果，再基于Mothur軟件對土壤真菌群落進(jìn)行Alpha多樣性Chao1指數(shù)、Simpson指數(shù)、Shannoneve指數(shù)的計(jì)算，得到真菌群落的豐富度、多樣性及均勻度。基于Bray-Curtis距離算法和R軟件（v3.3.1）進(jìn)行主坐標(biāo)分析（PCoA），得到真菌群落的Beta多樣性。通過 LEfSe 判別分析效應(yīng)值（LDA）大小，設(shè)定LDA＞4，判斷不同組之間差異顯著的生物標(biāo)志物。最后，再利用R軟件進(jìn)行土壤真菌與環(huán)境因子的冗余分析（Redundancy analysis， RDA），同時用曼特爾檢驗(yàn)（Mantel-test）對土壤真菌群落結(jié)構(gòu)和Alpha多樣性的驅(qū)動因子進(jìn)行分析。

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Origin 2022軟件繪圖，用SPSS 26.0軟件進(jìn)行單因素處理間的差異顯著性分析（Plt;0.05）。

2" 結(jié)果與分析

2.1" 不同類型綠肥混播對土壤基礎(chǔ)理化性質(zhì)的影響

不同類型綠肥混播對土壤基礎(chǔ)理化性質(zhì)的的影響如表2所示。從表中可以看出，與箭筈豌豆單播對照（CK）相比，箭筈豌豆和毛苕子混播（HV）、箭筈豌豆和青稞混播（HB）、箭筈豌豆和油菜混播（RS）處理的土壤含水量和全氮含量無顯著差異。HB和RS處理的土壤容重分別比CK降低4.76%和6.12%，HV處理的土壤容重與CK無顯著差異。不同處理土壤均呈堿性，3個混播處理土壤pH值與CK均無顯著差異，而HB處理土壤pH值比HV處理降低2.28%。HV、HB處理土壤全碳含量與CK無顯著差異，而RS處理土壤全碳含量比CK、HV處理和HB處理分別提高14.80%、13.23%、11.48%。因此，箭筈豌豆和青稞混播以及箭筈豌豆和油菜混播較箭筈豌豆單播能有效降低土壤容重，箭筈豌豆和油菜混播能顯著提高土壤全碳含量。

2.2" 不同類型綠肥混播對土壤有機(jī)碳組分的影響

不同類型綠肥混播對土壤有機(jī)碳組分有較大影響。與箭筈豌豆單播對照（CK）相比，混播處理土壤有機(jī)碳含量和微生物量碳含量均有增加的趨勢，其中，HV處理土壤有機(jī)碳含量比CK提高10.84%，RS處理土壤微生物量碳（MBC）含量比CK提高19.97%。3個綠肥混播處理土壤易氧化有機(jī)碳含量和可溶性有機(jī)碳含量與CK均無顯著差異（圖１）。因此，箭筈豌豆和毛苕子混播能有效提高土壤有機(jī)碳含量，箭筈豌豆和油菜混播有利于增加土壤微生物量碳含量。

2.3" 不同類型綠肥混播對土壤真菌Alpha多樣性的影響

4個處理土壤中真菌共包括7個門，34個綱，80個目，164個科，228個屬，312個種。各處理土壤真菌群落多樣性如表3所示。從表中可以看出，RS處理土壤真菌群落Chao1指數(shù)和Simpson指數(shù)分別比CK提高36.42%和11.59%，而HV和HB處理土壤真菌群落Chao1指數(shù)、Simpson指數(shù)和Shannoneve指數(shù)與CK均無顯著差異。不同類型綠肥混播對土壤真菌群落生物多樣性有一定影響。RS處理Chao1指數(shù)顯著高于HV和HB處理，且RS處理的Simpson指數(shù)和Shannoneve指數(shù)顯著高于HB處理。總體而言，箭筈豌豆和油菜混播（RS）處理更有利于土壤真菌群落豐富度的提高。

2.4" 不同類型綠肥混播對土壤真菌群落Beta多樣性的影響

不同處理真菌群落Beta多樣性如圖2所示。從圖中可以看出，主坐標(biāo)第一主成分（PC1）和第二主成分（PC2）的貢獻(xiàn)率分別為78.25%和12.88%，兩者總的貢獻(xiàn)率為91.13%。不同處理在坐標(biāo)軸上的投影距離顯示，CK和HV處理的樣本的分布距離較近，相似度高，總體表現(xiàn)為聚集效應(yīng)，RS處理的樣本與其他處理的樣本距離較遠(yuǎn)，表現(xiàn)為分離效應(yīng)。即箭筈豌豆和油菜混播（RS）處理的真菌群落結(jié)構(gòu)與其他處理存在較大差異（圖2）。

2.5" 不同類型綠肥混播對土壤真菌群落組成的影響

門水平上不同處理土壤真菌群落的組成如圖3所示。從圖3可知，4個處理土壤真菌相對豐度較高的5個門分別為子囊菌門（Ascomycota，25.81%～48.26%）、毛霉菌門（Mucoromycota，23.02%～35.58%）、擔(dān)子菌門（Basidiomycota，11.61%～24.74%）、壺菌門（Chytridiomycota，2.64%～25.84%）、油壺菌門（Olpidiomycota，1.43%～5.95%），累計(jì)相對豐度約占真菌總豐度的98%。與箭筈豌豆單播對照（CK）相比，HV、HB和RS 3個混播處理土壤子囊菌門真菌的相對豐度分別下降8.97%、28.68%和46.53%，HB處理毛霉菌門和擔(dān)子菌門真菌的相對豐度分別提高7.24%和113.09%，RS處理壺菌門真菌的相對豐度顯著提高583.79%。總體來說，不同類型綠肥混播模式均能有效降低土壤子囊菌門真菌的相對豐度，提高擔(dān)子菌門真菌的相對豐度。

屬水平上不同處理土壤真菌群落的組成如圖4所示。4個處理平均相對豐度前10的真菌菌屬分別為根酶屬（Rhizopus，9.12%～18.57%）、油脂酵母屬（Lipomyces，5.43%～13.34%）、曲霉屬（Aspergillus，4.28%～8.34%）、柄銹菌屬（Puccinia，0.19%～14.90%）、油壺菌屬（Olpidium，1.43%～5.95%）、刺囊側(cè)孔壺菌屬（Blyttiomyces，0.11%～5.42%）、鮑爾壺菌屬（Powellomyces，0～5.07%）、小壺菌屬（Spizellomyces，0.04%～5.19%）、根孢囊霉屬（Rhizophagus，1.08%～4.30%）、集壺菌屬（Synchytrium，0～4.59%）。箭筈豌豆單播對照中未發(fā)現(xiàn)鮑爾壺菌屬和集壺菌屬真菌，而HV、HB和RS處理土壤鮑爾壺菌屬和集壺菌屬真菌的相對豐度則分別為1.25%和0.11%、0.41%和0.05%、5.07%和4.59%。

2.6" 不同類型綠肥混播對土壤真菌差異性物種的影響

通過LEfSe分析，不同類型綠肥混播處理間差異顯著的物種或群落如圖5所示。以LDA＞4和P＜0.05為標(biāo)準(zhǔn)，不同處理間存在顯著差異的真菌類群主要有34個，包括1個門，5個綱，9個目，9個科和10個屬。HB處理富集毛霉菌門（Mucoromycota），球囊霉目（Glomerales），球囊霉科（Glomeraceae）的菌群；RS處理富集小壺菌目（Spizellomycetales），未知壺菌綱（f_unclassified_Chytridiomycetes），刺囊側(cè)孔壺菌屬（Blyttiomyces）的菌群；CK富集毛霉目（Mucorales）、毛霉菌綱（Mucoromycetes）、根霉科（Rhizopodaceae）的菌群。

2.7" 不同類型綠肥混播下土壤真菌群落與土壤理化性質(zhì)相關(guān)性分析

土壤真菌群落結(jié)構(gòu)與土壤理化性質(zhì)指標(biāo)的冗余分析（RDA）結(jié)果如圖6所示。從圖6中可以看出，第一主成分軸（RDA1）和第二主成分軸（RDA2）解釋率為分別66.65%和9.51%，總解釋率達(dá)76.16%。其中，土壤微生物量碳含量（MBC）對真菌群落的影響較大（R2=0.5174，P=0.017），其與子囊菌門、毛霉菌門、擔(dān)子菌門、壺菌門、油壺菌門真菌的相對豐度均呈正相關(guān)性，土壤有機(jī)質(zhì)碳含量（SOC）對真菌群落的影響較小（R2=0.0159，P=0.893），其他土壤理化性質(zhì)指標(biāo)對真菌群落的影響大小由高到低依次為TC（R2=0.3632，P=0.148）、BD（R2=0.2963，P=0.203）、DOC（R2=0.1948，P=0.350）、TN（R2=0.2038，P=0.379）、SWC（R2=0.2005，P=0.393）、ROC（R2=0.2060，P=0.403）、pH（R2=0.110，P=0.511）。

土壤真菌Alpha多樣性指數(shù)和真菌群落結(jié)構(gòu)與土壤理化性質(zhì)指標(biāo)的Mantel-test分析結(jié)果如圖7所示。從圖7中可以看出，土壤真菌Alpha多樣性指數(shù)和真菌群落結(jié)構(gòu)均與MBC呈顯著相關(guān)，土壤TC僅與Alpha多樣性呈顯著相關(guān)。從土壤理化性質(zhì)指標(biāo)之間的相關(guān)性來看，SOC與ROC呈極顯著正相關(guān)，BD與DOC呈極顯著負(fù)相關(guān)。上述結(jié)果表明，綠肥混播通過改變土壤TC和MBC影響土壤真菌群落結(jié)構(gòu)。

3" 討論

3.1" 不同類型綠肥混播對土壤基礎(chǔ)理化性質(zhì)的影響

土壤基礎(chǔ)理化性質(zhì)是耕地地力高低的重要指標(biāo)，能間接影響到土壤演替方向。綠肥混播模式能夠利用不同作物生長過程中根系深度層差異錯位吸收土壤養(yǎng)分，降低混播作物對土壤養(yǎng)分的競爭，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)不同作物的協(xié)同生長。王琳等研究認(rèn)為，綠肥混播能有效改善土壤質(zhì)量狀況。本研究發(fā)現(xiàn)，與箭筈豌豆單播對照（CK）相比，箭筈豌豆和青稞混播及箭筈豌豆和油菜混播處理土壤容重下降，箭筈豌豆和油菜混播處理土壤全碳含量增加，而同為豆科的箭筈豌豆和毛苕子混播處理土壤有機(jī)碳含量顯著高于CK。

土壤微生物量碳含量、可溶性有機(jī)碳含量和易氧化有機(jī)碳含量是土壤活性有機(jī)碳的重要指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)，箭筈豌豆和油菜混播處理土壤微生物量碳含量顯著高于CK，而3種綠肥混播處理土壤易氧化有機(jī)碳含量和可溶性有機(jī)碳含量均與CK無顯著差異。與同為豆科的箭筈豌豆和毛苕子混播處理相比，箭筈豌豆和青稞或油菜混播可以充分利用不同作物的生長特征，更利于土壤養(yǎng)分的多樣性和平衡，這與朱夢圓等的研究結(jié)果一致。

3.2" 不同類型綠肥混播對土壤真菌群落的影響

作物生長和土壤微生物的群落結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，種植綠肥能改變甚至重塑土壤微生物群落結(jié)構(gòu)。本研究發(fā)現(xiàn)，箭筈豌豆和油菜混播處理的Chao1指數(shù)和Simpson指數(shù)顯著高于箭筈豌豆單播對照（CK），而箭筈豌豆和毛苕子混播處理與箭筈豌豆和青稞混播處理的Chao1指數(shù)、Simpson指數(shù)及Shannoneve指數(shù)與CK無顯著差異。箭筈豌豆和毛苕子混播處理的樣本主成分顯示與CK距離較近，而箭筈豌豆和油菜混播處理的樣本主成分顯示與CK距離較遠(yuǎn)。

豆科作物根系能夠通過分泌大量的黃酮以及酚酸類物質(zhì)增加土壤中真菌的種群密度。發(fā)芽速度較快的豆科作物會產(chǎn)生腐解液對生長較慢的其他種子萌發(fā)產(chǎn)生一定的抑制作用，且影響混播模式下的菌群多樣性。本研究發(fā)現(xiàn)，不同類型綠肥混播能顯著降低土壤中子囊菌門真菌的相對豐度，增加擔(dān)子菌門真菌的相對豐度，這有利于難降解有機(jī)物的分解，增加土壤中土壤養(yǎng)分周轉(zhuǎn)；另外不同綠肥混播還能有效減少根霉菌屬和曲霉菌屬致病性真菌，提高作物的抗病能力，這有利于作物的生長。

3.3" 不同類型綠肥混播下土壤真菌群落與土壤理化性質(zhì)的關(guān)系

土壤為真菌生長發(fā)育提供生存環(huán)境的同時，作物根系的代謝物也影響真菌群落結(jié)構(gòu)特征。土壤環(huán)境變化對其真菌群落結(jié)構(gòu)及多樣性有較大影響。龍超等研究結(jié)果表明，土壤真菌群落結(jié)構(gòu)與土壤有機(jī)碳含量、微生物量碳含量和含水量等相關(guān)。劉春增等研究發(fā)現(xiàn)紫云英還田后土壤真菌群落結(jié)構(gòu)的主要控制因子為土壤容重、有機(jī)碳含量、全氮含量、全磷含量和全鉀含量。本研究發(fā)現(xiàn)，不同類型綠肥混播處理土壤全碳含量、微生物量碳含量與真菌群落結(jié)構(gòu)有顯著相關(guān)性，是導(dǎo)致真菌群落結(jié)構(gòu)變化的主要環(huán)境因素。箭筈豌豆和油菜混播處理可以提高土壤微生物量碳含量，增加土壤可利用態(tài)養(yǎng)分，進(jìn)而增強(qiáng)真菌的代謝活性以及生長能力。Ｘue等同樣發(fā)現(xiàn)土壤微生物量碳是土壤微生物群落變化的主要驅(qū)動因素。Ｒｕｉ等研究認(rèn)為不同綠肥配施下土壤孔隙度增加，土壤容重降低，有利于真菌群落結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定和功能發(fā)揮。本試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，無論是綠肥單播還是不同類型綠肥混播，土壤pH變化較小，其對真菌的生長與繁殖影響較小。

4" 結(jié)論

與箭筈豌豆單播對照（CK）相比，箭筈豌豆和毛苕子混播處理土壤有機(jī)碳含量提高10.84%，而箭筈豌豆和油菜混播處理土壤微生物量碳含量增加19.97%。箭筈豌豆和油菜混播處理的Chao1指數(shù)和Simpson指數(shù)分別比CK提高36.42%和11.59%，其主坐標(biāo)分析的主成分得分情況，PCoA中第一主成分和第二主成分的貢獻(xiàn)率分別為78.25%和12.88%，處理間表現(xiàn)出明顯的分離效應(yīng)。不同綠肥混播處理對真菌群落結(jié)構(gòu)亦有較大影響，門水平上箭筈豌豆和青稞混播處理的毛霉菌門和擔(dān)子菌門真菌的相對豐度分別比CK提高7.24%和113.09%，箭筈豌豆和油菜混播處理的壺菌門真菌相對豐度比CK提高583.79%；屬水平上箭筈豌豆和油菜混播處理的土壤鮑爾壺菌屬和集壺菌屬真菌的相對豐度分別比CK增加5.07%和4.59%。不同類型綠肥混播處理土壤微生物量碳含量與真菌群落結(jié)構(gòu)表現(xiàn)出較強(qiáng)的相關(guān)性，是改變真菌群落結(jié)構(gòu)和多樣性的主要驅(qū)動因子。本研究結(jié)果為青海地區(qū)綠肥改良土壤提供了依據(jù)。

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（責(zé)任編輯：石春林）