哈茨木霉對鹽脅迫下波斯菊的促生效應

摘要：為了解哈茨木霉（Trichoderma harzianum）對鹽脅迫下波斯菊（Cosmos bipinnata Cav.）的促生效應，采用盆栽播種的方式培育波斯菊種子和幼苗，測定并分析哈茨木霉不同施用方式下種子萌發的相關指標，確定哈茨木霉的最佳施用方式，然后用哈茨木霉最佳施用方式處理鹽脅迫下波斯菊幼苗并測定其各項生理指標，分析哈茨木霉對鹽脅迫下波斯菊的促生效應。結果表明，與CK相比，哈茨木霉噴施處理能極顯著提高波斯菊種子的發芽率和芽長，發芽率提高16.67百分點，芽長增加3.70 cm。鹽脅迫條件下，噴施哈茨木霉菌劑后波斯菊幼苗的葉綠素總含量提高了232.11%，電導率下降了24.76百分點，傷害度減少35.49百分點，CAT活性降低了25.86%，POD活性增加了58.13%，可溶性蛋白含量減少3.25%。由此可見，哈茨木霉能夠促進波斯菊種子萌發和幼苗生長，還能緩解鹽脅迫對波斯菊幼苗的毒害作用，提高波斯菊的耐鹽能力，對鹽脅迫下波斯菊生長發育具有較好的促生效應。

關鍵詞：哈茨木霉；鹽脅迫；耐鹽性；波斯菊；種子；幼苗

中圖分類號：S682.1+10.1" 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2024）24-0166-07

收稿日期：2023-12-20

基金項目：國家自然科學基金地區基金（編號：32160665）；云南省科技廳面上項目（編號：202101AT070779）。

作者簡介：楊海艷（1979—），女，云南昆明人，博士，副教授，主要研究方向為植物逆境生理和植物病原真菌病害。E-mail：haiyanyang@cxtc.edu.cn。

通信作者：謝美華，博士，副教授，主要研究方向為真菌控制植物線蟲病害。E-mail：xiemeihua@cxtc.edu.cn。

隨著全球氣候變暖、降水量減少及不當灌溉情況的發生，干旱和半干旱地區的土壤鹽漬化越來越嚴重。經粗略統計，世界土地鹽漬化面積為 9.6億hm2，我國土地鹽漬化面積為9 913萬hm2^［1］。為了提高栽培植物的生產力、減少經濟損失，土壤鹽漬化成為了一個亟待解決的世界性問題。

關于土地鹽漬化的研究，早期大多集中在水利灌溉工程措施（包括溝-渠相結合的灌溉措施、排水防治土壤鹽漬化和灌溉淋鹽等）、農業技術措施（包括平整土地、深翻土地、壓沙、精耕細作、深翻曬壟、合理灌溉、增施肥料、種植綠肥等）、物理改良措施、化學改良措施、生物改良措施、綜合改良措施和建立健全水鹽動態監測體系^［2-3］。目前土地鹽漬化的研究已經從調節外界環境條件轉向研究植物自身的耐鹽能力，以及通過提高植物的耐鹽性來解決土地鹽漬化問題。研究表明，植物自身的調節機制可以響應鹽脅迫，植物細胞會合成可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸等物質來調節細胞之間的滲透壓，還能通過改變自身過氧化氫酶活性、過氧化物酶活性以及丙二醛含量等途徑來緩解外界脅迫^［4］。研究表明，施加給植物一個外來因子，提高植物的耐鹽能力，能有效緩解植株的鹽害作用，如施加適宜濃度的外源鈣給鹽脅迫下的單葉薔薇，促進了薔薇種子萌發和幼苗生長，有效緩解了鹽脅迫對薔薇的影響^［5］。外源硅、NO、SA等都能提高植物的耐鹽性，而植物促生菌也能對鹽脅迫下的水稻、西瓜、燕麥、玉米等植物起促生作用^［6-12］。

波斯菊（Cosmos bipinnata Cav.）屬菊科秋英屬，是一種觀賞強、生長周期短且具有藥用價值的植物，在我國栽培甚廣，被種植于道路、邊坡、小區、公園等城市園林綠化^［13］。然而，因為自然與人為破壞等多種因素，土地鹽漬化面積正在不斷增加，嚴重影響了波斯菊的生長。研究表明，波斯菊幼苗對鹽脅迫較為敏感，低濃度會抑制種子萌發，影響幼苗株高、根長，高濃度則可使波斯菊出現停止生長的趨勢^［14］。這種情況制約了波斯菊的種植范圍與面積，所以合理開發和改造利用土壤鹽漬化土地，以及提高波斯菊的耐鹽能力是當前需要解決的問題。

木霉（Trichoderma spp.）屬于半知菌門絲孢目木霉屬，是一類分布廣泛的土壤習居菌，在田野甚至于工地石塊上也能找到木霉菌^［15］。而除個別為弱病原菌外，大多數木霉對植物病菌均具有拮抗作用^［16］，對多種土傳病害具有很好的防治效果，已經有多種木霉菌被廣泛應用于多種植物真菌病害的防治并作為可推廣應用的生物菌劑^［16-17］。其中國內外最常見的生物制劑主要有哈茨木霉、多孢木霉、綠色木霉^［18］。經研究發現，哈茨木霉（Trichoderma harzianum）具有多種生物作用，如拮抗作用、促生作用、誘導抗性作用等^［19］。哈茨木霉在田間施用可以有效促進植物種子萌發和植株根系生長，且通過根系土壤中的營養物質及根系分泌物進行快速生長并在植物根系中快速定殖^［20］。前人關于T28哈茨木霉的研究發現，哈茨木霉對NaCl有較好的耐鹽性；可以增加椒樣薄荷（Mentha×piperita）、蔬菜種子和幼苗、大麥（Hordeum vulgare L.）、黃瓜（Cucumis sativus L.）的耐鹽性^［21-25］。哈茨木霉能否提高波斯菊的耐鹽性還有待研究。

本試驗選用白色矮稈波斯菊為研究材料，通過測定不同處理后波斯菊光合特性和抗逆性相關指標，初步探究哈茨木霉對鹽脅迫下波斯菊的促生效應，為進一步探究哈茨木霉在波斯菊中的生產應用提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

以矮稈白色波斯菊（Cosmos bipinnata Cav.）為試材，種子購買于沭陽花之茵種業有限公司。

試驗用哈茨木霉菌劑為有效孢子數達到5×109 CFU/g的可濕性粉劑，購買于山東木魚石生物科技有限公司。試驗于2022年在楚雄師范學院完成。

1.2 試驗方法

1.2.1 哈茨木霉施用方式確定

分別用噴施、浸種、包衣、拌土4種處理方式對經過24 h催芽處理的波斯菊種子進行試驗，以清水處理波斯菊作為對照組，各處理重復3次，每次每盆撒播30粒波斯菊種子。播種7 d后測定種子的發芽率、發芽勢，30 d后測量波斯菊幼苗的芽長和根長來確定哈茨木霉的最佳施用方式。

1.2.2 哈茨木霉對鹽脅迫下波斯菊的影響

用0.67 mol/L NaCl溶液（半致死濃度）模擬鹽脅迫環境^［26］。將哈茨木霉菌劑與無菌水按照說明書上的比例（1 g ∶300 mL）配制成哈茨木霉菌劑孢子混合液。其中一組用0.67 mol/L NaCl溶液對波斯菊進行噴施處理，另外一組用NaCl溶液加哈茨木霉菌劑孢子混合液進行噴施，以清水和哈茨木霉噴施作為對照，每23 d噴施1次，每個處理重復3次。

1.3 相關生理指標的測定

用分光光度法測定波斯菊中葉綠素含量及過氧化物酶（POD）活性；采用TCA法測定MDA含量；采用紫外吸收法測定過氧化氫酶（CAT）活性；采用考馬斯亮藍法測定可溶性蛋白含量；用電導率儀測定電導率，并計算出相對電導率以及傷害度^［27］。

傷害度=（E-ECK）/（1-ECK）×100%。

式中：E為處理組的相對電導率；ECK為對照的相對電導率。

1.4 數據處理

用SPSS 26.0進行方差分析。

2 結果與分析

2.1 哈茨木霉不同施用方式對波斯菊種子萌發及幼苗生長的影響

2.1.1 對波斯菊種子萌發的影響

由圖1可知，哈茨木霉的不同施用方式對波斯菊種子萌發的影響不同。與CK相比，哈茨木霉菌劑處理后對波斯菊種子發芽率有促進作用。其中，波斯菊種子用哈茨木霉菌劑噴施后，發芽率提高了16.67百分點，差異極顯著；用哈茨木霉浸種和拌土處理波斯菊種子，發芽率分別提高了8.89、3.33百分點，但差異并不顯著；用哈茨木霉菌劑包衣處理的波斯菊種子發芽率沒有提高，即哈茨木霉包衣對波斯菊種子萌發沒有促進作用。以上方法中，哈茨木霉菌劑噴施處理對波斯菊發芽率促進作用最明顯。

由圖2可知，與CK相比，用哈茨木霉菌劑噴施處理波斯菊種子時，發芽勢提高了13.33百分點；用哈茨木霉菌劑浸種和拌土處理時，發芽勢均提高了6.66百分點；用哈茨木霉包衣處理時，波斯菊種子發芽勢提高了4.44百分點。雖然每個處理相較于CK都提高了發芽勢，但是差異均不顯著。哈茨木霉不同施用方式對波斯菊種子發芽勢影響不大。

2.1.2 對波斯菊幼苗生長的影響

由表1可知，與CK相比，哈茨木霉菌劑施用方式不同對波斯菊幼苗生長影響程度不同。其中，哈茨木霉菌劑噴施處理對波斯菊的芽長有極顯著的促進作用，對根長的促進作用不顯著；哈茨木霉菌劑浸種處理對波斯菊芽長和根長均有顯著的促進作用；哈茨木霉菌劑包衣處理的波斯菊幼苗芽長較CK長了1.47 cm，促進作用不顯著，且抑制了根長；而哈茨木霉菌劑拌土處理對波斯菊的芽長和根長影響都不顯著。

同時，通過圖3可以看出，用哈茨木霉處理后的波斯菊幼苗莖比CK更粗，促進作用分別是哈茨木霉浸種gt;哈茨木霉噴施gt;哈茨木霉包衣gt;哈茨木霉拌土gt;CK，而通過哈茨木霉處理后波斯菊根部同樣長出很多須根，須根數量關系分別是哈茨木霉浸種gt;哈茨木霉噴施gt;哈茨木霉拌土gt;哈茨木霉包衣gt;CK。圖中可以明顯看出，生長情況最好的是經過哈茨木霉菌劑浸種和哈茨木霉菌劑噴施的幼苗。

結合圖1至圖3和表1可知，施用哈茨木霉菌劑能促進波斯菊種子萌發和幼苗生長。其中哈茨木霉菌劑噴施處理對波斯菊促生效應最大，其次是哈茨木霉菌劑浸種處理，而哈茨木霉菌劑拌土處理和包衣處理促生效應相差不大。所以，選用哈茨木霉噴施處理波斯菊種子進行鹽脅迫條件下的生長試驗。

2.2 哈茨木霉對鹽脅迫下波斯菊幼苗生理特性的影響

2.2.1 對波斯菊幼苗葉綠素含量的影響

由表2可知，NaCl溶液處理下的波斯菊與CK相比，葉綠素含量極顯著下降，其中葉綠素a含量下降了85.58%，葉綠素b含量下降了84.39%，葉綠素總含量下降了85.24%；施加了哈茨木霉菌劑的波斯菊的葉綠素含量極顯著增加，其中葉綠素a含量增加了33.43%，葉綠素b含量增加了38.73%，葉綠素總含量增加了34.92%。在鹽脅迫下施加了哈茨木霉菌劑的波斯菊相比CK的葉綠素含量極顯著下降，其中葉綠素a含量下降了50.45%，葉綠素b含量下降了52.32%，葉綠素總含量下降了50.99%；但是在鹽脅迫下施加哈茨木霉菌劑的波斯菊相比鹽脅迫下波斯菊的葉綠素含量極顯著增加，其中葉綠素a含量增加了243.63%，葉綠素b含量增加了205.51%，葉綠素總含量增加了232.11%。由此可見，施用哈茨木霉菌劑能有效緩解鹽脅迫條件下波斯菊葉綠素含量的下降。

2.2.2 對波斯菊幼苗丙二醛（MDA）含量的影響

由圖4可知，與CK相比，鹽脅迫下波斯菊的MDA含量增加了12.43%，有極顯著差異；施用哈茨木霉菌劑的波斯菊MDA含量減少了9.17%，有顯著差異；而在鹽脅迫下施加了哈茨木霉菌劑的波斯菊MDA含量減少了12.56%，兩者之間也有顯著差異。而相較于單獨的鹽脅迫處理，在鹽脅迫條件下施用哈茨木霉菌劑，波斯菊的MDA含量減少了22.23%，有極顯著差異。由此可見，哈茨木霉菌劑能有效緩解鹽脅迫條件下波斯菊MDA含量的增加。

2.2.3 對波斯菊幼苗相對電導率的影響

由圖5可知，鹽脅迫下波斯菊的相對電導率為74.81%，與CK相比，鹽脅迫對植株的傷害度為63.90%，與對照組有極顯著差異；施用哈茨木霉菌劑的波斯菊相對電導率為31.68%，對植株的傷害度為2.08%，與對照組基本相同；鹽脅迫下的波斯菊施用了哈茨木霉菌劑后，相對電導率為50.05%，對植株的傷害度為28.41%，較鹽脅迫組下降了35.49百分點，二者有極顯著差異。由上可知，哈茨木霉菌劑的施用降低了鹽脅迫對波斯菊的傷害度和植株的相對電導率。

2.2.4 對波斯菊幼苗過氧化氫酶（CAT）活性的影響

由圖6可知，不同處理對波斯菊幼苗的CAT活性影響較大，其中鹽脅迫下的波斯菊幼苗CAT活性與CK相比增加了42.09%，有極顯著差異；施加了哈茨木霉菌劑的波斯菊幼苗CAT活性較CK增加了11.25%，有極顯著差異；而對鹽脅迫下的波斯菊施加了哈茨木霉菌劑后，波斯菊的CAT活性較CK增加了5.34%，差異不顯著，而與鹽脅迫單獨處理的波斯菊相比，活性則極顯著降低了25.86%。由此可見，哈茨木霉菌劑的施加極大緩解了鹽脅迫下波斯菊CAT活性的上升。

2.2.5 對波斯菊幼苗過氧化物酶（POD）活性的影響

由圖7可知，與CK相比，鹽脅迫下波斯菊幼苗的POD活性極顯著下降，降低了61.98%；施加了哈茨木霉菌劑的波斯菊幼苗POD活性極顯著升高，較對照組增加了5.75%；而對鹽脅迫下的波斯菊幼苗施加哈茨木霉菌劑，處理后的POD活性與鹽脅迫下的波斯菊相比極顯著增加，增加了58.13%。由此可得，哈茨木霉菌劑的施用能減輕波斯菊的鹽脅迫作用。

2.2.6 對波斯菊幼苗可溶性蛋白含量的影響

由圖8可知，鹽脅迫下波斯菊幼苗的可溶性蛋白含量較CK顯著增加了4.08%；施加了哈茨木霉菌劑的波斯菊幼苗的可溶性蛋白含量較CK顯著增加了3.85%；而對鹽脅迫下波斯菊幼苗施加哈茨木霉菌劑后，波斯菊的可溶性蛋白含量顯著降低3.25%，與CK含量基本相同。由此可得，施加哈茨木霉菌劑有助于緩解鹽脅迫下波斯菊幼苗的可溶性蛋白含量增加。

通過對表2及圖4至圖8的分析可以得出，哈茨木霉菌劑的施用對鹽脅迫下波斯菊幼苗的光合特性、抗逆性的各項生理指標均有顯著影響，能促進波斯菊幼苗在鹽脅迫的環境下更好地生長發育。

3 討論

3.1 哈茨木霉對波斯菊的影響

木霉被認為是最有希望的生物防治因子，而哈茨木霉是木霉屬中應用最廣泛的菌株，對植物種子活力、發芽率、根系活力、株高等都有較顯著的促生效應^［28］。哈茨木霉不同的處理方式對波斯菊種子萌發和幼苗生長的影響不同。本研究表明，與CK相比，哈茨木霉菌劑噴施、浸種、包衣、拌土處理對波斯菊種子的發芽率、發芽勢、芽長等有不同程度的影響，其中哈茨木霉菌劑噴施處理大大提高了波斯菊種子的發芽率和發芽勢，使波斯菊種子的發芽率達到了85.56%，發芽勢達到了40.00%，這與木霉菌促進了黃瓜的發芽率和發芽勢結果^［29］相似。此外，不同哈茨木霉菌劑的施用方式對波斯菊幼苗生長發育效果也存在差異，其中哈茨木霉噴施和浸種處理對波斯菊幼苗根長、芽長有促生效應，均能使幼苗株高明顯增加，莖更粗，浸種處理明顯增加根長，2種處理方式均能增加波斯菊的須根數，這與謝琳淼等對哈茨木霉促進紫羊茅和草地早熟禾芽長和根長的研究結果^［30］相同，也與周曉馥等研究發現黃瓜幼苗施加哈茨木霉后，植株的總根長、總根表面積、根尖數、分支數、總根體積、交叉數等根系各項指標均高于對照組的結果^［31］一致。綜合分析發現，哈茨木霉噴施處理對波斯菊的生長發育具有較大的促生效應，施用哈茨木霉菌劑后，與對照組（CK）相比，波斯菊的葉綠素含量、CAT活性、POD活性、可溶性蛋白含量都有提高，MDA含量明顯下降，相對電導率影響不大。此結果與劉暢等用哈茨木霉對玉米苗期生理指標測定的結果^［32］基本一致。綜合考慮，對波斯菊而言，采用噴施這種處理方式，效果更好。

3.2 哈茨木霉對鹽脅迫下波斯菊幼苗光合特性和可溶性蛋白質含量的影響

鹽脅迫能較大程度地抑制植物的光合作用，破壞植株的葉綠體結構，使植物的葉綠素含量不斷減少^［33］。本研究中，鹽脅迫能極顯著地降低波斯菊幼苗的葉綠素含量，抑制了波斯菊的光合作用，對鹽脅迫下的波斯菊幼苗施加哈茨木霉菌劑后，植株的葉綠素含量有了顯著的升高，這與李哲等對鹽脅迫下椒樣薄荷耐鹽生理特性研究中葉綠素含量升高的試驗結果^［34］相符。經研究發現，木霉能在本氏煙草根系定殖，通過誘導抗生作用促進植物葉綠素合成^［35］。也有試驗表明，哈茨木霉能促進植物對氮、磷等營養物質的吸收，而氮、磷的吸收有利于植株對葉綠體的合成，進一步來提高植物的光合作用^［36］。由此可以推測出，本試驗中哈茨木霉可能通過改善波斯菊根系土壤環境，提高了植株對氮、磷等礦物質的吸收，促進了波斯菊合成葉綠素，從而緩解鹽脅迫對波斯菊的毒害作用。

鹽脅迫下，植物體內可溶性蛋白不斷增加，其增加和積累能有效地保護植株的生物膜，提高植物細胞的保水能力，是植物體內重要的滲透調節物質和營養物質^［37］。許多研究表明，鹽脅迫能引起植物細胞中Na+大量富集、K+缺乏，導致離子失衡，破壞植株滲透壓，然后影響植物正常的生長發育^［38］。鹽脅迫下波斯菊幼苗的可溶性蛋白含量顯著增加，與NaCl脅迫下叢枝菌根真菌對紫花苜蓿蛋白質含量變化結果^［39］一致：試驗中葉片的鹽濃度增加，細胞中Na+含量隨之增加，K+含量減少，而真菌的加入使紫花苜蓿葉片的Na+含量下降，K+含量升高到正常水平，細胞內滲透壓恢復正常，可溶性蛋白含量也隨之恢復初始水平。也有研究發現，植株被AM 真菌侵染后，植物根系中的可溶性糖含量顯著提升，通過改變根組織中的滲透平衡來減少植物對Na+和 Cl-的吸收，以此來增強植物的抗鹽能力^［40］。由于哈茨木霉具有競爭作用，能通過分泌大量有利于自身生長的酶來迅速定殖在植株根系，占領周圍營養物質和土壤來抑制病原菌的生長^［28］。同時向杰等通過對哈茨木霉轉錄、代謝聯合分析得出，在離子轉運調節方面，哈茨木霉篩選得到1個上調表達Na+/K+-ATPase相關基因和8個上調表達的ABC轉運蛋白，以此來維持胞內鹽離子的平衡，調節自身滲透壓^［41］。在本研究中，對鹽脅迫下的波斯菊施用哈茨木霉菌劑后，可溶性蛋白含量顯著降低，基本下降到與CK含量相同。這可能是由于哈茨木霉施用后，快速定殖在植物根系上，占領土壤了周圍，減緩Na+和Cl-大量進入植物細胞，進而維護了波斯菊細胞內外滲透壓平衡，使植株可溶性蛋白含量保持在原始數值，增強了波斯菊對鹽脅迫的耐受能力。

3.3 哈茨木霉對鹽脅迫下波斯菊幼苗葉片質膜透性的影響

鹽脅迫對植物細胞膜造成傷害，使細胞膜透性增加，導致電解質外滲，而外滲的電解質能使溶液的電導率發生變化，可以用溶液變化情況來反映細胞膜受損程度^［42］。鹽脅迫會影響植物細胞內自由基的產生和消除，增加自由基的積累，引發膜脂過氧化作用，產生大量丙二醛（MDA），進而造成生物膜的破壞^［43］。本研究結果顯示，NaCl溶液處理的波斯菊幼苗相對電導率和MDA含量均有極顯著增加，而對NaCl溶液處理的波斯菊施加哈茨木霉菌劑后，相對電導率和MDA含量都有了極顯著下降。經研究發現，哈茨木霉T22可以提高植物在鹽脅迫下的種子萌發，通過減少滲透壓脅迫或老化的幼苗中脂質過氧化物含量來緩解氧化性損傷^［44］，對鹽脅迫下的植株起到了較好的促生效應。同時趙忠娟等用哈茨木霉對蔬菜種子和幼苗耐鹽性的探究也表明哈茨木霉能減輕蔬菜的膜質損傷，以此來降低幼苗相對電導率和MDA含量^［23］。本試驗中，施用哈茨木霉后，波斯菊幼苗的相對電導率和MDA含量雖沒有降低到與CK相同，但較NaCl處理組極顯著降低，極大緩解了鹽脅迫下兩者的增加，保護了波斯菊的質膜透性，提高了波斯菊對鹽的耐受能力。

3.4 哈茨木霉對鹽脅迫下波斯菊幼苗抗氧化活性的影響

鹽脅迫下植物會產生氧自由基（ROS），使植株體核酸功能發生改變、引起基因突變等反應，影響植株正常生長^［45］。而植物體內抗氧化酶能起到清除ROS的目的，使ROS維持在一個相對穩定的狀態^［46］。有研究發現，解鹽促生菌可以誘導并加強植物產生的抗氧化酶活性^［47］。本研究中，與CK相比，鹽脅迫下波斯菊幼苗的CAT活性極顯著增加，POD活性極顯著下降。與NaCl處理組相比，對鹽脅迫下的波斯菊幼苗施加了哈茨木霉菌劑后，波斯菊的CAT活性大幅度降低，POD活性大幅度升高，這說明施用哈茨木霉菌劑加強了波斯菊體內的抗氧化酶活性，清除了鹽脅迫下產生的ROS，使波斯菊體內環境保持在一個相對穩定的氧化還原狀態，緩解了鹽脅迫對波斯菊的毒害作用，即哈茨木霉菌劑提高了波斯菊的耐鹽能力。本試驗的結果與趙忠娟等對椒樣薄荷結果處理后CAT活性和POD活性變化結果^［23］大致相同，表明哈茨木霉能對鹽脅迫下的波斯菊起到促生效應。

4 結論

本試驗先對波斯菊種子分別進行了噴施、浸種、包衣和拌土處理，并以清水作為對照，分析了哈茨木霉不同施用方式對波斯菊種子萌發和幼苗生長的影響，通過對波斯菊種子的發芽率、發芽勢、芽長和根長的測定，探討哈茨木霉不同施用方式對波斯菊種子的促生效應，確定哈茨木霉菌劑對波斯菊的最佳施用方式。經研究發現，哈茨木霉的浸種、噴施、包衣和拌土都能在一定程度上影響種子萌發相關指標，其中哈茨木霉噴施處理明顯提高了種子的發芽率、芽長和莖粗，促進須根生長，對波斯菊種子起到了較好的促生效應。

通過測定不同處理下波斯菊幼苗的光合指標、可溶性蛋白、相對電導率、MDA含量、POD活性和CAT活性來探究哈茨木霉對鹽脅迫下波斯菊種子的促生效應。經研究發現，鹽脅迫下波斯菊的葉綠素總含量和POD活性較CK分別極顯著降低了85.24%、61.98%，相對電導率極顯著升高，為74.81%，MDA含量和CAT活性分別極顯著增加了12.43%、42.09%，可溶性蛋白含量顯著增加了4.08%；而對鹽脅迫下的波斯菊幼苗施用哈茨木霉菌劑后，哈茨木霉快速定殖在植物根系上，占領波斯菊周圍土壤和營養物質，進而改善波斯菊根系土壤環境，提高植株對氮磷等礦物質的吸收，減緩Na+和Cl-大量進入植物細胞，進而維護了波斯菊細胞內外滲透壓平衡，保護了波斯菊的質膜透性。氮、磷的吸收有助于波斯菊提高葉綠素含量。而哈茨木霉維護波斯菊細胞的滲透壓平衡，能有效保護細胞生物膜，使其可溶性蛋白含量恢復原始數值。此外，哈茨木霉減輕了波斯菊的膜質損傷，加強了波斯菊體內的抗氧化酶活性，清除了鹽脅迫下產生的ROS，使波斯菊體內環境保持在相對穩定的氧化還原狀態。與NaCl處理組相比，施用了哈茨木霉的波斯菊幼苗的相對電導率下降了35.49百分點，CAT活性降低了25.86%，MDA含量減少了22.23%，POD活性提高了58.13%，葉綠素總含量增加了232.11%。由此可見，哈茨木霉對鹽脅迫下的波斯菊有較好的促生效應，能提高波斯菊的耐鹽能力，緩解鹽脅迫對波斯菊的毒害作用。

參考文獻：

［1］毛 戀，蘆建國，江海燕. 植物響應鹽堿脅迫的機制［J］. 分子植物育種，2020，18（10）：3441-3448.

［2］韓 明. 河西地區土地鹽漬化現狀分析及改善措施［D］. 蘭州：蘭州大學，2017.

［3］閔首軍，崔松山，陳沁利. 土壤鹽漬化及其治理措施研究綜述［J］. 中國農業信息，2016（5）：108，110.

［4］李俊偉，劉景輝，趙寶平，等. 燕麥苗期耐鹽性評價及鑒定指標篩選［J/OL］. 吉林農業大學學報，2024：1-8（2022-05-05）［2023-12-20］. https：//doi.org/10.13327/j.jjlau.2021.1623.

［5］閆 振，李 進，阿麗努爾·阿卜來提，等. 外源鈣對鹽脅迫下單葉薔薇種子萌發和幼苗生長的影響［J］. 草地學報，2022，30 （5）：1185-1193.

［6］緱天韻. 外源硅提高黃瓜耐鹽性的生理機理探討［D］. 楊凌：西北農林科技大學，2020.

［7］楊 璞，高彩紅. 外源NO對鹽脅迫條件下植物傷害的緩解效應［J］. 安徽農業科學，2020，48（12）：46-48.

［8］趙 丹，紀 鵬，何曉蕾，等. SA對鹽脅迫下草本植物種子萌發及幼苗生理特性影響的研究進展［J］. 黑龍江八一農墾大學學報，2020，32（3）：7-12.

［9］辛樹權，王 貴，高 揚. 植物生長促生菌對鹽脅迫下水稻種子萌發及幼苗生長的影響［J］. 湖北農業科學，2012，51（3）：490-492，496.

［10］陳 昆，張正亮，高 磊. 堿蓬內生菌對鹽脅迫西瓜幼苗形態建成及生理特性的影響［J］. 江蘇農業科學，2022，50（9）：116-122.

［11］張銀翠，姚 拓，趙桂琴，等. 耐鹽促生菌篩選鑒定及對鹽脅迫燕麥生長的影響［J］. 草地學報，2021，29（12）：2645-2652.

［12］袁 海，何鵬飛，吳毅歆，等. 鹽脅迫下益生菌對玉米的促生效應研究［J］. 玉米科學，2019，27（1）：69-74.

［13］姜云天，閆中雪，袁 浩，等. Na2CO3脅迫對波斯菊種子萌發的影響［J］. 現代園藝，2014（21）：12-13.

［14］杜 艷，裴 蕾，高志英，等. 鹽脅迫對2種基因型波斯菊種子萌發和幼苗生長的影響［J］. 江蘇農業科學，2018，46（3）：128-131.

［15］蘇勝榮. 木霉菌生防機制及分類的研究進展［J］. 黃山學院學報，2007，9（3）：97-102.

［16］Howell C R. Mechanisms employed by Trichoderma species in the biological control of plant diseases：the history and evolution of current concepts［J］. Plant Disease，2003，87（1）：4-10.

［17］郭潤芳，劉曉光，高克祥，等. 拮抗木霉菌在生物防治中的應用與研究進展［J］. 中國生物防治，2002，18（4）：180-184.

［18］辛雅芬，商金杰，高克祥. 拮抗木霉菌的生防機制研究進展［J］. 東北林業大學學報，2005，33（4）：88-91.

［19］黃 竹，姚艷平. 8株木霉菌揮發性代謝產物對玉米種子的促生作用研究［J］. 種子科技，2019，37（4）：143-145.

［20］劉 峰，阮盈盈. 哈茨木霉菌劑對玉米苗期生長和土壤肥力的影響［J］. 浙江農業科學，2021，62（8）：1507-1510.

［21］尹大川，鄧 勛，鄭 宇，等. 鹽堿脅迫對哈茨木霉T28的生長及營養代謝的影響［J］. 北京林業大學學報，2014，36（5）：109-116.

［22］趙忠娟，楊 凱，扈進冬，等. 鹽脅迫條件下哈茨木霉ST02對椒樣薄荷生長及根區土壤理化性質的影響［J］. 生物技術通報，2022，38（7）：224-235.

［23］趙忠娟，扈進冬，吳曉青，等. 哈茨木霉LTR-2對蔬菜種子和幼苗耐鹽性的影響及其作用機制［J］. 山東科學，2015，28（5）：27-34.

［24］Gupta S，Smith P M C，Boughton B A，et al. Inoculation of barley with Trichoderma harzianum T-22 modifies lipids and metabolites to improve salt tolerance［J］. Journal of Experimental Botany，2021，72（20）：7229-7246.

［25］李舒依，李方樂，王穎杰，等. NaCl脅迫下哈茨木霉對黃瓜種子萌發的影響［J］. 科學技術與工程，2016，16（9）：164-166.

［26］徐小玉，張鳳銀，曾慶微. NaCl和Na2SO4鹽脅迫對波斯菊種子萌發的影響［J］. 東北農業大學學報，2014，45（4）：55-59.

［27］鄭秋玲. 溫度脅迫對葡萄生長的影響及葉面肥噴布效應［D］. 泰安：山東農業大學，2010：22.

［28］呂 黎，許麗媛，羅志威，等. 哈茨木霉生物防治研究進展［J］. 湖南農業科學，2013（17）：92-95.

［29］趙詩杰，梁 松，邱新月，等. 康氏木霉對小麥和黃瓜種子發芽的影響［J］. 山西農業科學，2022，50（7）：1043-1049.

［30］謝琳淼，常春麗，姚志紅，等. 哈茨木霉對紫羊茅和草地早熟禾的促生及抗性誘導作用［J］. 草業科學，2018，35（9）：2079-2086.

［31］周曉馥，張欣玥，蔡汶妤，等. 哈茨木霉對黃瓜幼苗促生作用的影響［J］. 吉林師范大學學報（自然科學版），2020，41（3）：93-99.

［32］劉 暢，張欣玥，蔡汶妤，等. 綠色木霉與哈茨木霉對黃瓜幼苗促生作用機理的研究［J］. 江蘇農業科學，2020，48（16）：156-160.

［33］朱新廣，張其德. NaCl對光合作用影響的研究進展［J］. 植物學通報，1999，16（4）：332.

［34］李 哲，郭 凱，吳曉青，等. 哈茨木霉LTR-2對椒樣薄荷耐鹽生理特性的影響［J］. 山東科學，2014，27（4）：17-24，41.

［35］李一晗，莊文化，曾 玥，等. 接種木霉對本氏煙草生長及營養吸收的影響［J］. 安徽農學通報，2022，28（7）：36-39.

［36］Yue H T，Mo W P，Li C，et al. The salt stress relief and growth promotion effect of Rs-5 on cotton［J］. Plant and Soil，2007，297（1/2）：139-145.

［37］劉燕敏，陳宇聰，呂 睿，等. 甜瓜幼苗對逆境脅迫的生理響應及抗逆性分析［J］. 農業災害研究，2021，11（8）：132-133.

［38］楊冬爽. 基于代謝組學的野大豆（Glycine soja）耐鹽機理研究［D］. 長春：東北師范大學，2017：3-6.

［39］張永志，高文俊，郭艷妮，等. 叢枝菌根真菌對NaCl脅迫下紫花苜蓿的生理指標及光合參數的影響［J］. 草原與草坪，2018，38（4）：26-34.

［40］Feng G，Zhang F，Li X，et al. Improved tolerance of maize plants to salt stress by arbuscular mycorrhiza is related to higher accumulation of soluble sugars in roots［J］. Mycorrhiza，2002，12（4）：185-190.

［41］向 杰，陳敬師，夏鑫鑫，等. 基于轉錄-代謝聯合分析哈茨木霉ACCC32527 對NaCl脅迫的分子調節［J］. 中國農業科學，2019，52（12）：2079-2091.

［42］McKay H M，Mason W L. Physiological indicators of tolerance to cold storage in Sitka spruce and Douglas-fir seedlings［J］. Canadian Journal of Forest Research，1991，21（6）：890-901.

［43］孫國榮，關 旸，閻秀峰.鹽脅迫對星星草幼苗保護酶系統的影響［J］. 草地學報，2001，9（1）：34-38.

［44］Mastouri F，Bjrkman T，Harman G E. Seed treatment with Trichoderma harzianum alleviates biotic，abiotic，and physiological stresses in germinating seeds and seedlings［J］. Phytopathology，2010，100（11）：1213-1221.

［45］Choudhury S，Panda P，Sahoo L，et al. Reactive oxygen species signaling in plants under abiotic stress［J］. Plant Signaling amp; Behavior，2013，8（4）：e23681.

［46］Ahmad P，Jaleel C A，Salem M A，et al. Roles of enzymatic and nonenzymatic antioxidants in plants during abiotic stress［J］. Critical Reviews in Biotechnology，2010，30（3）：161-175.

［47］Mittler R.Oxidative stress，antioxidants and stress tolerance［J］. Trends in Plant Science，2002，7（9）：405-410.