國家評價性抽驗氟馬西尼注射液質量分析

吳秋云，陳民輝

（江蘇省食品藥品監督檢驗研究院，江蘇 南京 210019）

1 重點項目的法定檢驗結果

共抽驗樣品173 批，涉及全國全部13 家生產企業中的11 家（分別記為A -K），以及全國全部29 個批準文號中的20 個。其中，規格為2 mL∶0.2 mg 的23 批，為5 mL∶0.5 mg 的121 批，為10 mL∶1.0 mg 的29 批。共涉及31個省、自治區、直轄市（未納入臺灣省數據。且同一企業也可能涉及不同省級行政區），按抽樣地點性質分為經營單位、生產單位、使用單位，分別有114批、33批、26批。

氟馬西尼注射液法定檢驗項目共10項，包括性狀、鑒別、pH、雜質、細菌內毒素、裝量、可見異物、不溶性微粒、無菌、含量測定。按2020 年版《中國藥典（二部）》［5］及企業內部標準進行檢驗，所有項目均達標檢驗結果才為合格。結果顯示，173 批樣品檢驗結果均為合格（100.00%）。重點項目的法定檢驗結果如下。

pH：綜合各個法定質量標準，pH 應為3.5～4.2。結果各生產企業樣品的pH均為3.8～4.2（見圖1）。

圖1 各生產企業樣品pH測定結果箱線圖Fig.1 Box plot of pH determination for samples from various manufacturing enterprises

雜質：法定質量標準中均采用高效液相色譜（HPLC）法進行測定。173 批樣品單個最大雜質含量低于0.30%，雜質總量低于0.40%。詳見圖2。

圖2 各生產企業樣品中單個最大雜質和總雜質測定結果箱線圖a.The biggest single impurity b.Total impuritiesFig.2 Box plot of the biggest single impurity and total impurities determination in samples from various manufacturing enterprises

含量測定：樣品含量測定結果頻數分布圖基本呈正態分布，平均含量為100.28%。詳見圖3。

圖3 樣品含量測定結果頻數分布圖Fig.3 Frequency distribution of content determination of flumazenil in samples

2 探索性研究

2.1 雜質A

雜質可分為工藝雜質（合成起始原料、生產中間體、副產物等）和降解（制劑工藝中的降解和自然放置過程中的降解）雜質。在酸、堿條件下，氟馬西尼中的主要降解雜質為雜質A，在強氧化條件下產生微量的雜質B。多數氟馬西尼注射液現行標準中未對雜質A 進行單獨控制。按2020 年版《中國藥典（二部）》［5］方法制備的供試品溶液在室溫條件下放置超過3 h 即可產生雜質A。采用HPLC 法測定173 批樣品中雜質A 的含量，結果見圖4。可見，各企業產品中雜質A 的含量均不超過0.3%，低于對單個雜質的控制限度（1.0%）［5］。

圖4 各生產企業樣品雜質A測定結果箱線圖Fig.4 Box plot of content determination of impurity A in samples from various manufacturing enterprises

2.2 滲透壓

注射液產生刺激性和疼痛性主要是由于不適當的pH與滲透壓，且滲透壓過低會導致溶血。氟馬西尼注射液藥品說明書中標示的用法為靜脈注射或靜脈滴注，其滲透壓與用藥安全相關，現行質量標準中均未規定滲透壓項。按2020 年版《中國藥典（四部）》通則中滲透壓摩爾濃度測定法的要求［6］，對本次抽樣的11 家生產企業的150批樣品進行測定，結果見圖5。等滲的范圍一般為260～320 mOsmol/ kg，企業C 所有樣品的滲透壓均為38 mOsmol/kg，遠低于人體血漿滲透壓。根據其提供的處方工藝發現，該樣品中未添加氯化鈉調節等滲。其余10家生產企業樣品的滲透壓均在等滲范圍內。

圖5 各生產企業產品滲透壓箱線圖Fig.5 Box plot of osmotic pressure in samples from various manufacturing enterprises

2.3 依地酸鹽

依地酸鹽是常用的穩定劑，與微量的金屬離子形成螯合物后，可阻止金屬離子對藥物自身氧化的催化作用，從而提高藥物在制備、存儲和臨床配制過程中的穩定性。但大量攝入依地酸二鈉會引起低血鈣或骨鈣流失。氟馬西尼注射液現行標準中均未對依地酸鹽進行單獨控制。采用HPLC 法測定11 家生產企業的30 批樣品中依地酸鹽的含量，結果見表1。可見，所有樣品均加入了依地酸鹽，但含量相差較大，建議加以控制。

表1 各生產企業依地酸鹽含量測定結果（mg/mL，n=2）Tab.1 Results of content determination of edetate in samples from various manufacturing enterprises（mg / mL，n = 2）

2.4 微量元素

參考文獻［7］，分別測定11 家生產企業的86 批樣品中鉛、鎘、砷、銻、鉻、鋅、鎂、銅8 種微量元素的含量。結果86 批樣品中，砷、銻、鉛、鎘4 種有害元素的含量均低于0.1 mg/L，未見明顯遷移；不同生產企業樣品中鉻和銅含量均低于0.02 mg/L；不同生產企業樣品中鎂、鋅、鉛含量差異較大（分別為0.002～0.067 mg/ L、0.000 1～0.177 mg/ L、0.000 2～0.044 mg/ L），提示不同的生產工藝對產品中元素的含量影響較大。

2.5 加速試驗

選擇11家生產企業及相對濕度同一生產企業不同規格樣品（共30 批）在溫度為40 ℃、相對濕度為100%的條件下放置1，3，5 個月，考察性狀，pH，有關物質、氟馬西尼含量變化，評價不同處方工藝產品的穩定性。結果各生產企業樣品性狀均未改變，pH變化不大（0.08～0.24）。雜質A的含量與總雜質含量呈同步上升趨勢，放置5個月后，雜質A 的含量約為放置1個月后的2倍，推測與高溫引起氟馬西尼降解有關。

氟馬西尼含量在加速試驗后均有不同程度下降，1 個月、3 個月、5 個月后最多下降分別為2.3%，2.5%，3.8%，推測與氟馬西尼降解為雜質A 有關。同一生產企業不同規格樣品未見明顯差異。

2.6 長期試驗

收集6 家生產企業的24 批近效期樣品，測定其雜質的含量。結果顯示，樣品雜質主要為雜質A，其他最大單個雜質含量均低于0.2%，雜質A 和總雜質含量均不超過1.0%，遠低于限度要求［5］。故在接近藥品實際貯存條件下，各生產企業樣品在有效期內質量穩定。

2.7 基于多指標數學建模的藥物質量控制分析

參考文獻［8 - 10］，采用化學計量學方法，結合法定檢驗結果對11 家生產企業的173 批樣品進行多變量考察。采用ChemPattern 軟件的多元統計分析技術-主成分分析法，以樣品檢查的重點項目pH、氟馬西尼含量為主要成分1（PC1）、雜質含量為PC2建立共有模式，并分析樣本間的相關性（見圖6）。各生產企業樣品重點項目的綜合檢驗結果呈較明顯的相對聚集和離散。聚集的緊密程度體現出該生產企業樣品處方、生產工藝控制的相對穩定性。可見，生產企業F，J，K的樣品呈較明顯的相對聚集，提示其產品的處方工藝控制較穩定；生產企業A，B，C的樣品則較分散，提示其產品批間差異較大。

圖6 氟馬西尼注射液重點項目得分載荷圖Fig.6 Scoring plot of key items of Flumazenil Injection

3 發現的問題

3.1 質量標準

2020 年版《中國藥典（二部）》有關物質項下未提及扣除空白輔料峰，但在實測過程中出現較大的空白輔料峰，且各生產企業輔料峰有差異；標準規定中僅控制了單個雜質和總雜質的限度。雜質A是氟馬西尼注射液中的主要風險雜質，但多數生產企業未對其進行單獨控制。氟馬西尼注射液多用于靜脈注射，各現行標準中均未對滲透壓進行控制。生產企業C的樣品處方中未添加氯化鈉調節滲透壓導致產品滲透壓過低；其他生產企業的樣品中均添加了依地酸鹽作為穩定劑，但依地酸鹽添加量不同。建議進一步完善標準，對有關物質中的雜質A 進行單獨控制，對空白輔料峰進行扣除，并對該品種的滲透壓和添加的依地酸鹽進行控制。

3.2 包裝材料與違規違法生產

本次抽驗樣品的內包裝均為玻璃安瓿。除部分生產企業未標明具體材質外，其余均標明材質為低硼硅玻璃，易引發質量安全問題，如灌裝偏酸或偏堿的藥物后易產生脫片，玻璃瓶裝的大輸液在輸注過程中易引起污染，安瓿小瓶在掰開過程中玻璃碎屑可能會落入藥物中等［11］。本次抽樣發現，不同生產企業樣品折斷安瓿所需的力度不同，且折斷面不平整，易造成玻璃碎片濺入藥液的問題。建議生產企業進一步考察包裝材質，消除安全隱患。根據檢驗和企業調研結果，抽驗樣品均在效期內檢驗合格。未發現偷工減料、擅自改變生產工藝、非法添加其他物質及違規投料、低限投料、非法添加替代物質等問題。

3.3 藥品說明書存在的問題

1）參比制劑藥品說明書中顯示該品種臨床使用方法為靜脈注射或靜脈滴注。但生產企業J未標明靜脈輸注，且在適應證、用法用量、不良反應、注意事項、藥物相互作用、藥物過量、藥物代謝動力學方面描述不全面。2）部分生產企業藥品說明書中輔料描述不完整。生產企業A 和B均采用氫氧化鈉溶液調pH，生產企業C采用pH 3.8磷酸鹽緩沖液調pH，均未在藥品說明書中標注。3）藥品說明書中包裝材料均為安瓿，但部分生產企業未標明具體材質。建議生產企業進一步完善藥品說明書。