姜黃素納米硒的制備工藝優化、表征及其對酒精性肝損傷的保護作用

黃文浩，陳建平,2, ，陳博文，陳 岑，鐘賽意,2，劉曉菲,2，李 瑞,2，宋兵兵,2，汪 卓,2

（1.廣東海洋大學食品科技學院，廣東省水產品加工與安全重點實驗室，廣東省海洋生物制品工程實驗室，廣東省海洋食品工程技術研究中心，水產品深加工廣東普通高等學校重點實驗室，廣東省亞熱帶果蔬加工科技創新中心，廣東湛江 524088；2.大連工業大學，海洋食品精深加工關鍵技術省部共建協同創新中心，遼寧大連 116034）

酒精性肝損傷（Alcoholic liver injury，ALI）是臨床上最為常見的肝病之一，主要由長期或大量攝入酒精引起。ALI 最初表現為酒精性脂肪肝、肝炎，進而演變成肝纖維化、肝硬化和肝癌[1]。據世界衛生組織統計，每年全球約有300 萬人因酒精中毒死亡，在我國，隨著酗酒人口的比例不斷上升，ALI 的防治變得尤為重要[2-3]。近年來，具有低毒副作用的食源性天然物質因在抗酒精性肝損傷領域存在巨大潛力而備受關注[4]。

姜黃素（Curcumin，Cur）是從姜科植物根莖中提取的一種疏水性多酚類化合物，具有抗炎、抗氧化、抗癌和護肝等生物活性[5]。研究表明，Cur 可以改善由酒精、四氯化碳等化學物質誘導的肝損傷，是一種防治肝損傷的理想天然化合物[6-7]。然而，Cur 的水溶性差，進入人體后存在難吸收、高濃度下生物利用度極低等問題，嚴重限制了其在酒精性肝損傷防治領域的應用[8-9]。為提高Cur 的生物利用度，人們通過多種方法對Cur 進行改性，其中，用藥物載體對Cur 進行包裹是可行的方法之一[10]。目前，常用的藥物載體有脂質體、微球、納米粒、環糊精和乳劑等，它們都具有載體用量少、藥物荷載量高、粒徑和滲透力可控、釋放藥物速率可控、毒性低、副作用少等優點[11]。然而，脂質體作為藥物載體存在靶向效果不理想、穩定性欠佳等問題。同時，微球靶向給藥系統也存在藥物的突釋等未解決的問題。而納米技術作為近年來發展的一種新型技術，在生物學領域有著廣泛的應用。其中，硒納米粒子（粒子粒徑在1～100 nm之間）因具有體積小、比表面積大、物理化學性質獨特、對人體細胞毒性低等優點，被廣泛用作藥物載體[12]。

硒（Selenium，Se）是人體維持正常生理活動必需的微量元素，而常見的有機Se 和無機Se 的有益劑量和有害劑量的范圍很窄，當Se 攝入過量時，會對人體產生毒害作用[13-14]。隨著納米技術的出現，研究發現，將Se 納米化制備得到的納米硒（Selenium nanoparticles，SeNPs）具有低毒性和高生物活性[15-16]。然而，SeNPs 存在表面能高、不穩定、在水溶液中容易聚集等問題導致其生物活性低[17]，限制了它的臨床應用。設想如果采用Cur 作為穩定劑制備姜黃素納米硒（SeNPs@Cur），這樣既能結合Cur 和SeNPs 的優點，又能克服兩者本身存在的不足[18]。故本研究通過化學還原法合成SeNPs@Cur，運用單因素實驗和響應面試驗對SeNPs@Cur 的制備條件進行優化，并對其進行結構表征和抗酒精性肝損傷的作用研究，為Cur 在防治酒精性肝損傷臨床藥物的應用開發提供新的技術手段和數據支持。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

亞硒酸鈉（Na2SeO3，＞98%）美國Sigma 公司；姜黃素（Cur，＞95%）、抗壞血酸（VC，＞99%）中國上海源葉生物科技有限公司；胎牛血清、PBS、DMEM高糖培養基、0.25%胰蛋白酶溶液、雙抗溶液 美國Gibco 公司；LO2 細胞 美國 ATCC 公司。

AUW120 電子天平 日本島津公司；HL-6 數顯恒溫水浴鍋 常州奧華儀器有限公司；Zetasizer Nano ZSE 馬爾文納米粒度電位儀 上海馬爾文帕納科公司；N-4000 旋轉蒸發儀 東京理化器械株式會社；FD8508 真空冷凍干燥機 韓國Ilshin 公司；TU-1901 雙光束紫外可見分光光度計 北京譜析通用儀器有限責任公司；Agilent 7500Cx 電感耦合等離子體質譜 美國Agilent 公司；MIRA LMS 掃描電子顯微鏡 捷克TESCAN 公司；Oxford 能譜儀 英國牛津儀器集團；NicoletiS-5 型傅里葉變換紅外光譜儀、Varioskan Flash 全自動酶標儀 美國Thermo公司；JIDI-21D 高速離心機 廣州吉迪儀器有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 SeNPs 的制備 稱取79.26 mg VC和7.78 mg Na2SeO3分別溶解于22.5 mL 蒸餾水中，在Na2SeO3溶液中加入0.25 mL 無水乙醇后與VC溶液混合，將混合液置于34 ℃度恒溫水浴鍋中加熱并攪拌反應1.98 h，反應后的混合液用0.5 kDa 的透析袋透析48 h，得到SeNPs 溶液。

1.2.2 SeNPs@Cur 的制備

1.2.2.1 單因素實驗 參考Chen 等[19]方法，對SeNPs@Cur 的制備工藝參數略作修改。VC和Na2SeO3分別溶解于22.5 mL 蒸餾水中，在Na2SeO3溶液中加入0.25 mL Cur 無水乙醇溶液后與VC溶液混合，將混合液置于恒溫水浴鍋中加熱并攪拌反應，反應后的混合液用0.5 kDa 的透析袋透析48 h，得到SeNPs@Cur 溶液。固定VC:Na2SeO3摩爾比為10:1，反應時間為2 h，反應溫度為35 ℃，采用馬爾文納米粒度電位儀考察不同Cur 濃度（2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mg/mL）對SeNPs@Cur 粒徑的影響；固定Cur 濃度為6.0 mg/mL，反應時間為2 h，反應溫度為35 ℃，采用馬爾文納米粒度電位儀考察不同VC:Na2SeO3摩爾比（4:1、6:1、8:1、10:1、12:1）對SeNPs@Cur 粒徑的影響；固定Cur 濃度為6.0 mg/mL，VC:Na2SeO3摩爾比為10:1，反應溫度為35 ℃，采用馬爾文納米粒度電位儀考察不同反應時間（1、2、3、4 和5 h）對SeNPs@Cur 粒徑的影響；固定Cur 濃度為6.0 mg/mL，VC:Na2SeO3摩爾比為10:1，反應時間為2 h，采用馬爾文納米粒度電位儀考察不同反應溫度（25、30、35、40、45 ℃）對SeNPs@Cur粒徑的影響。

1.2.2.2 響應面優化試驗 在單因素實驗的基礎上，以Cur 濃度（A）、VC:Na2SeO3摩爾比（B）、反應時間（C）和反應溫度（D）四個因素為變量，SeNPs@Cur 粒徑（Y）為因變量設計響應面試驗，試驗設計的因素與水平見表1。使用Design-Expert 13 軟件分析多因素的交互作用，確定SeNPs@Cur 的最佳制備工藝參數。根據最佳工藝參數制備SeNPs@Cur 溶液，經透析、旋蒸、真空冷凍干燥后得SeNPs@Cur。

1.2.3 SeNPs@Cur 載藥率的測定 稱取5.0 mg Cur溶于50.0 mL 無水乙醇，經超聲充分溶解后，將Cur溶液稀釋至1、2、4、6、8、10 μg/mL，在425 nm 處測定其吸光度值，得到Cur 標準曲線y=0.1569x-0.0083，R2=0.9998。

稱取5.0 mg SeNPs@Cur 樣品溶于50.0 mL 無水乙醇，經超聲充分溶解后，在425 nm 處測定其吸光度值，根據Cur 標準曲線得到樣品中的Cur 含量，按公式（1）計算載藥率。

1.2.4 SeNPs@Cur 的結構表征

1.2.4.1 電感耦合等離子體質譜（Inductively coupled plasma mass spectrometry，ICP-MS）取SeNPs@Cur粉末100.0 mg 置于消解液中（6.0 mL 硝酸+0.5 mL雙氧水）進行微波消解，隨后使用ICP-MS 測定樣品中的Se 含量。儀器工作參數為：入射功率1550 W，載氣流量1.0 L/min，輔助氣流量1.0 L/min，氦氣流量4.0 L/min，進樣深度10.0 mm，進樣速率1.0 L/min。

1.2.4.2 掃描電子顯微鏡（Scanning electron microscope，SEM）取微量SeNPs@Cur 粉末樣品均勻粘貼于導電膠上，使用濺射鍍膜儀對其進行噴金處理，工作電流為10 mA，噴涂時間為45 s，隨后用掃描電子顯微鏡在不同放大倍數下對SeNPs@Cur 樣品形貌進行拍攝，拍攝加速電壓為3 kV。

1.2.4.3 傅里葉變換紅外光譜儀（Fourier transform infrared spectrometer，FT-IR）取約2.0 mg SeNPs@Cur 粉末樣品與200 mg 干燥的溴化鉀（KBr）粉末混合后研磨均勻，將混合粉末進行壓片處理，壓制成半透明薄片，掃描其紅外吸收光譜，掃描波數范圍為4000～400 cm-1。

1.2.4.4 能譜儀（Energy dispersive spectrometer，EDS）

在上述實驗方法1.2.4.2 的樣品條件下，使用能譜儀對樣品進行能譜mapping 元素分析，拍攝時加速電壓為15 kV。

1.2.5 SeNPs@Cur 對乙醇損傷LO2 細胞的保護作用

1.2.5.1 細胞培養 LO2 細胞復蘇后，在37 ℃、5%CO2的培養箱中，培養于含10%胎牛血清和1%雙抗溶液的DEME 高糖培養基，待細胞密度＞70%時進行傳代，取對數生長期的細胞用于后續實驗。

1.2.5.2 乙醇誘導LO2 細胞損傷模型的建立 將細胞懸液稀釋至8×104個細胞/mL，在96 孔板中，對照組和實驗組加入細胞懸液，空白組加入含10%胎牛血清和1%雙抗溶液的DEME 高糖培養基，每孔100 μL。培養24 h 后去除培養液，實驗組加入乙醇濃度為200～1400 mmol/L 的DEME 高糖培養基，空白組和對照組加入DEME 高糖培養基，每孔200 μL。分別培養3 h 和6 h 后，各孔加入20 μL 5 mg/mL MTT 溶液孵育4 h，去除上清液，各孔加入150 μL DMSO 溶液反應10 min。采用酶標儀檢測各孔在570 nm 處的吸光值，根據公式（2）計算細胞活力。

式中：A0表示空白組OD 值；A1表示對照組OD 值；A2表示實驗組OD 值。

1.2.5.3 SeNPs@Cur 對乙醇誘導LO2 細胞損傷的影響 將細胞懸液稀釋至8×104個細胞/mL，在96孔板中，對照組和實驗組加入細胞懸液，空白組加入含10%胎牛血清和1%雙抗溶液的DEME 高糖培養基，每孔100 μL。培養24 h 后去除培養液，實驗組加入SeNPs@Cur 濃度為125～500 μg/mL 的DEME高糖培養基，空白組和對照組加入DEME 高糖培養基，每孔100 μL。培養12 h 后去除上清液，實驗組加入乙醇濃度為800 mmol/L 的DEME 高糖培養基，空白組和對照組加入DEME 高糖培養基，每孔200 μL。培養6 h 后，各孔加入20 μL 5 mg/mL MTT溶液孵育4 h，然后去除上清液，各孔加入150 μL DMSO 溶液反應10 min。采用酶標儀檢測各孔在570 nm 處的吸光值，根據公式（2）計算細胞活力。

1.3 數據處理

運用SPSS 26.0 軟件對數據結果進行統計學分析，Design-Expert 13.0 進行響應面模型建立及分析，Origin 2021 進行圖片繪制。實驗設置3 個重復，實驗數據均以平均值±標準差（D）表示。

2 結果與分析

2.1 Cur 濃度、VC:Na2SeO3 摩爾比、反應時間和反應溫度對SeNPs@Cur 粒徑的影響

據報道，Cur 的加入可以使SeNPs 具有更高的穩定性[20]。為確定Cur 的最佳濃度，考察不同Cur濃度對粒徑的影響，結果如圖1A 所示。SeNPs@Cur 粒徑大小隨Cur 濃度的增加呈先下降后上升的趨勢，在Cur 濃度為6.0 mg/mL 時粒徑達到最小值為（101.18±1.71）nm。結果表明，適量的Cur 可抑制SeNPs 的聚集，使SeNPs@Cur 粒徑減小。這可能是Cur 中的酚羥基可以吸附并包裹SeNPs，阻止了SeNPs 的聚集，從而使得粒徑減小。而過量的Cur則易導致Cur 分子之間聚集使得游離的酚羥基減少，導致吸附和包裹SeNPs 的能力減弱，從而使得SeNPs@Cur 粒徑增大。因此，選擇6.0 mg/mL 作為Cur 的最佳濃度。

過量的VC可以使Na2SeO3完全反應，有助于SeNPs 的合成[19]。為確定最佳VC:Na2SeO3摩爾比，考察不同VC:Na2SeO3摩爾比對粒徑的影響，結果如圖1B 所示。當VC:Na2SeO3摩爾比為4:1 時，所制得SeNPs@Cur 的粒徑為（121.93±3.86）nm，提高兩者摩爾比到10:1 時，SeNPs@Cur 的粒徑最小，為（106.38±0.83）nm，這主要是因為過量的VC可以改善晶核的生長從而穩定SeNPs@Cur[21]，然而，繼續增大VC:Na2SeO3摩爾比會導致粒徑變大，這可能是VC濃度進一步增大會使得反應體系不穩定，從而導致納米顆粒增大。因此，選擇10:1 作為VC:Na2SeO3的最佳摩爾比。

反應時間是影響Na2SeO3還原成SeNPs 的一個重要參數[22]。過短的反應時間會導致VC和Na2SeO3之間反應不完全，反之，長時間反應會導致SeNPs 的聚集進而使粒徑增大。為確定最佳反應時間，考察不同反應時間對粒徑的影響，結果如圖1C 所示。當反應時間為2 h 時，所制得SeNPs@Cur 粒徑為（103.65±1.74）nm，達到最小值。當反應時間超過2 h，所制得SeNPs@Cur 粒徑顯著增大（P＜0.05）。因此，選擇2 h 作為最佳反應時間。

升高反應溫度會加劇分子的熱運動，使SeNPs粒子更容易分散[23]。為確定最佳反應溫度，考察不同反應溫度對粒徑的影響，結果如圖1D 所示。在25～35 ℃內，隨著反應溫度增加，SeNPs@Cur 粒徑呈減小趨勢，當反應溫度為35 ℃時，所制得SeNPs@Cur 粒徑顯著性減小為（103.92±3.70）nm（P＜0.05）。然而，當溫度進一步提高時，SeNPs@Cur 粒徑顯著增大（P＜0.05）。這可能是由于高溫容易導致納米顆粒劇烈運動，從而增加碰撞的機會和強度導致納米粒子不斷的聚集，最終使得粒徑增大[24]。因此，選擇35 ℃作為最佳反應溫度。

2.2 響應面優化SeNPs@Cur 的制備工藝

以Cur 濃度（A）、VC:Na2SeO3摩爾比（B）、反應時間（C）和反應溫度（D）為變量，SeNPs@Cur 粒徑（Y）為因變量，進行響應面優化試驗設計，方差分析結果見表2。使用Design-Expert 13 軟件分析4 個因素對SeNPs@Cur 粒徑的影響，得SeNPs@Cur 粒徑（Y）的二次回歸方程：Y=101.35+1.07A-4.29B-0.2C+1.84D-3.92AB-4.64AC+0.63AD+0.06BC-1.99BD-4.42CD+11.31A2+9.65B2+14.28C2+4.14D2。

表2 二次回歸模型的方差分析Table 2 ANOVA for quadratic model

由表2 中的二次回歸模型方差分析結果可知，模型極顯著（P＜0.01），失擬項不顯著（P=0.7855＞0.05），決定系數R2=0.9759，說明模型擬合效果好，可信度高，該模型可用于對SeNPs@Cur 粒徑的預測。回歸模型中一次項B 和D，交互項AB、AC 和CD，二次項A2、B2、C2和D2極顯著（P＜0.01），一次項A 顯著（P＜0.05）。

由表2 可知，Cur 濃度與VC:Na2SeO3摩爾比、Cur 濃度與反應時間、反應時間與反應溫度之間存在顯著的交互效應（P＜0.05），其余的交互項不顯著。圖2 是根據回歸方程生成的響應面立體圖，其反映了Cur 濃度、VC:Na2SeO3摩爾比、反應時間和反應溫度四者之間的相互作用。由圖可知，各因素間的曲線較陡峭，等高線呈橢圓形，說明因素間的交互作用對SeNPs@Cur 粒徑影響較大[25]，SeNPs@Cur 粒徑在各因素設置水平范圍內隨著因素的增大呈先減小后增大的趨勢。

圖2 Cur 濃度與VC:Na2SeO3 摩爾比（A）、Cur 濃度與反應時間（B）、反應時間與反應溫度（C）的交互作用對SeNPs@Cur 粒徑影響的響應面圖Fig.2 Response surface plots of the interactions of Cur dosage and molar ratio of VC to Na2SeO3 (A),Cur dosage and reaction time (B),reaction time and reaction temperature (C) on SeNPs@Cur particle size

使用Design-Expert 13 軟件對模型最小值進行求解，得到SeNPs@Cur 最優制備條件為：Cur 濃度5.92 mg/mL、VC:Na2SeO3摩爾比10.39:1、反應時間1.98 h、反應溫度34.00 ℃，模型預測該條件下所制得的SeNPs@Cur 粒徑為100.72 nm。為驗證模型預測結果，實際設置Cur 濃度5.92 mg/mL、VC:Na2SeO3=10.39:1、反應時間1.98 h、反應溫度34.00 ℃進行SeNPs@Cur 粒徑的驗證實驗，在此條件下制得的SeNPs@Cur 粒徑為（100.79±3.46）nm，接近理論預測值，說明模型可靠，因此使用該條件制備SeNPs@Cur 進行后續實驗。對SeNPs@Cur 進行載藥率和Se 含量的測定，結果顯示，SeNPs@Cur 的載藥率為12.80%±0.80%；ICP-MS 測得樣品中Se 含量為23.32%±0.07%，與Jiao 等[26]得到的結果接近。

2.3 SeNPs@Cur 的表征

2.3.1 SEM 考察SeNPs@Cur 的形貌 采用SEM觀察SeNPs、Cur 和SeNPs@Cur 的表面形貌，結果如圖3 所示。SeNPs 呈現為不規則顆粒聚集物，表明SeNPs 易聚集，分散性較差[19]（圖3A）。Cur 則呈長條狀，分布雜亂（圖3B）。而SeNPs@Cur 呈分散球形（圖3C），這與Yu 等[27]制備的SeNPs@Cur 形態類似，表明SeNPs 經Cur 修飾后能夠有效抑制其聚集，從而提高SeNPs 的分散性。

圖3 SeNPs（A）、Cur（B）和SeNPs@Cur（C）的SEM 圖（2000×）Fig.3 SEM images of SeNPs (A),Cur (B) and SeNPs@Cur (C) (2000×)

2.3.2 SeNPs@Cur 的紅外光譜分析結果 為了確定SeNPs 與Cur 之間的結合方式，運用傅里葉變換紅外光譜對SeNPs@Cur 進行分析，結果如圖4 所示。SeNPs 的紅外光譜圖幾乎沒有吸收峰，這與陳雪花等[28]得到的結果一致。在3505、1599、1508、1458、1281 cm-1分別對應苯環上的羥基伸縮振動，苯環上碳碳雙鍵伸縮振動，羰基伸縮振動，碳氫鍵在結構平面內的彎曲振動，芳香環的羰基伸縮振動，均為Cur 的特征吸收峰[27,29]。而SeNPs@Cur 與Cur的峰形極其相似，無新的吸收峰產生，且羥基吸收峰的強度變弱，波數從3505 cm-1紅移到3412 cm-1，這可能是由于Cur 中的酚羥基與SeNPs 表面的Se 原子之間的發生了類似氫鍵的相互作用（O-H···Se）所致。綜上所述，Cur 主要通過酚羥基吸附結合在SeNPs 表面。

圖4 Cur、SeNPs 和SeNPs@Cur 的紅外光譜圖Fig.4 FTIR spectra of Cur,SeNPs and SeNPs@Cur

2.3.3 SeNPs@Cur 的表面元素分析 采用EDS 對SeNPs@Cur 進行表面元素分析，結果如圖5 和表3 所示。由圖5 可知，SeNPs 和SeNPs@Cur 中均檢測出C、O 和Se 三種元素，但對應的峰強度不同。由表3 可知，SeNPs 的Se、C、O 含量分別為88.02%、10.81%、1.14%，元素含量占比中大部分是Se[30]。而在SeNPs@Cur 中，C、O 含量分別從SeNPs的10.81%和1.14%提高到48.51%和5.41%，增加的C 和O 主要是來源于Cur，可推斷SeNPs 成功負載了Cur。

圖5 SeNPs（A）和SeNPs@Cur（B）的SEM-EDS 元素分析Fig.5 SEM-EDS element analysis of SeNPs (A) and SeNPs@Cur (B)

表3 SeNPs 和SeNPs@Cur 的表面元素組成Table 3 Surface element composition of SeNPs and SeNPs@Cur

2.4 SeNPs@Cur 對乙醇損傷LO2 細胞的保護作用

由圖6A 可知，LO2 細胞經不同濃度的乙醇處理不同時間后，細胞活力隨著乙醇濃度的增加呈下降趨勢，且乙醇作用6 h 的細胞活力低于3 h。在乙醇濃度為800 mmol/L，對LO2 細胞作用6 h 時，細胞活力下降至51.39%±6.02%，達到中度損傷。故后續實驗選擇800 mmol/L 乙醇對LO2 細胞作用6 h 作為乙醇誘導LO2 細胞損傷模型。

圖6 不同濃度乙醇對LO2 細胞活力（A）、SeNPs@Cur 對乙醇損傷LO2 細胞活力（B）和細胞形態（C）的影響Fig.6 Effects of different concentrations of ethanol on the cell viabilities of LO2 cells (A) and SeNPs@Cur on the cell viabilities (B)and cell morphology (C) of LO2 cells damaged by ethanol

由圖6B 可知，模型組LO2 細胞經800 mmol/L乙醇作用6 h 后，細胞活力從空白組的100%±3.05%顯著下降至58.06%±0.43%（P＜0.05），表明乙醇處理導致細胞出現了損傷。當細胞經125、250、500 μg/mL 的SeNPs@Cur 進行干預后，細胞活力得到了顯著性提升，分別從模型組的58.06%±0.43%提高至71.43%±1.39%、77.33%±3.54%、85.41%±4.61%，表明SeNPs@Cur 能夠顯著改善乙醇誘導的肝細胞損傷，且呈現出濃度依賴性。而且，在不同濃度下，SeNPs@Cur 處理后的細胞活力均高于Cur 處理組和SeNPs 處理組，表明SeNPs@Cur 對乙醇誘導的肝細胞損傷的保護作用強于單獨處理的Cur 和SeNPs，這可能是由于Cur 經SeNPs 負載后大大提高了Cur 的生物利用度，同時SeNPs 經Cur 修飾后避免了SeNPs 的聚集，從而提高了SeNPs@Cur 的護肝活性。為了驗證上述結果，進一步觀察了不同樣品處理對細胞形態的影響，結果如圖6C 所示。由圖6C 可知，相比于空白對照組，用乙醇處理細胞后，細胞數量明顯減少，且細胞形態呈圓形。而用500 μg/mL SeNPs@Cur 處理后，能夠顯著提高細胞數量，且細胞形態呈不規則的多邊形，與空白對照組的細胞形態相似，這說明SeNPs@Cur 能夠改善乙醇誘導的肝細胞損傷，這一結果與細胞活力的實驗結果（圖6B）相一致。

3 結論

本研究通過單因素實驗及響應面試驗對SeNPs@Cur 的制備條件進行了優化，并對其進行了結構表征和抗酒精性肝損傷的作用研究。結果表明，SeNPs 的最佳制備工藝參數為Cur 濃度5.92 mg/mL、Vc:Na2SeO3摩爾比10.39:1、反應時間1.98 h 和反應溫度34.00 ℃，在此條件下制備的SeNPs@Cur 粒徑為（100.79±3.46）nm，接近模型的理論預測值。進一步對其進行結構鑒定發現，Cur 通過酚羥基吸附結合在SeNPs 表面形成均一球形的納米粒子，從而使得SeNPs 分散性得到提高。抗酒精性肝損傷研究發現，相比單獨的Cur 和SeNPs，SeNPs@Cur 對乙醇損傷LO2 細胞表現出更強的保護作用，說明Cur 經SeNPs 負載后能夠增強Cur 對乙醇誘導LO2 細胞損傷的保護作用。綜上所述，采用SeNPs 負載Cur是一種提高Cur 生物利用度的有效途徑，為SeNPs@Cur 在酒精性肝病的防治領域提供了數據參考和理論支持。