張 梅,郭志利,陳玉芬,王秀敏
(1.石家莊科技信息職業學院,河北石家莊 050500;2.石家莊醫學高等專科學校,河北石家莊 050500)
在飼料“全面禁抗”的時代背景下,天然中草藥提取物(如茯苓多糖、黃芪多糖等)受到行業廣泛關注(孫武等,2021)。目前畜牧業快速發展,常規飼料已無法滿足畜禽養殖的需求,因此,開發非常規飼料及其添加劑已成為目前畜禽養殖關注的重點。植物多糖不僅具有來源廣泛、純天然等優勢,且表現出優異的免疫調節性能(邢林林等,2022)。其中,茯苓多糖作為茯苓中的主要活性成分之一,在提高畜禽抗氧化性能、增強免疫力等多個方面發揮諸多作用(陳麗玲等,2020)。研究表明,在雛雞飼料中添加茯苓多糖能提高雛雞機體中NK 細胞的活性,且提升其淋巴細胞的轉化率,進一步達到免疫增強作用(余建國等,2004)。同樣的,高鵬輝等(2015)發現,將發酵法提取的茯苓多糖加入飼料中能改善斷奶仔豬的生長性能,且通過改善斷奶仔豬的免疫功能提升其對疾病的抵抗能力,從而緩解斷奶仔豬的斷奶應激。因此,茯苓多糖作為一種安全、價格低廉的免疫刺激劑,可以通過多種途徑增強機體免疫功能,在畜禽養殖中得到廣泛應用,但當前關于茯苓多糖在家兔上的研究相對較少。此外,近年來,由于動物疫病頻發,研發和投入使用畜禽預防性免疫增強劑至關重要。基于此,本文以茯苓中的主要提取物-茯苓多糖為研究對象,研究不同水平的茯苓多糖對家兔生長性能、血清免疫指標的影響,為茯苓多糖在家兔生產養殖中的應用提供參考。
1.1 試驗材料與設計 茯苓提取物- 茯苓多糖由上海源葉公司提供,茯苓多糖含量為88.21%。采用單因素隨機試驗設計,將健康、體重相近的100 只30 日齡的斷奶仔兔隨機分為4 組,每組5 個重復,每個重復5 只。對照組家兔飼喂基礎(組成及營養水平如表1 所示)。試驗I、II 和III 組分別在每千克基礎日糧中添加0.5、1.0 和2.0 g 的茯苓多糖,換算添加比例分別為0.05%、0.1% 和0.2%。預飼期7 d,正試期42 d。

表1 基礎日糧組成及營養水平
1.2 飼養管理 在正式飼養前,對兔舍進行徹底清掃、消殺和通風,一周后開始正式試驗。試驗過程中控制兔舍溫濕度和通風情況,保障家兔的正常生長。對家兔進行自由采食和飲水,定期檢查家兔的健康情況且進行及時診斷。其他清掃工作和消殺工作均按照場內規定進行。
1.3 測定指標與方法
1.3.1 生長性能測定 稱量和記錄家兔的初重和末重,計算平均日增重。此外,通過稱量家兔每天的投料量和剩余量計算家兔平均日采食量。以平均日采食量和日增重計算料重比,綜合反映家兔的生長性能。
1.3.2 免疫指標測定 飼養結束后每個重復隨機選取兩只家兔,取靜脈血10mL,分離血清后置于-20℃保存。血清IgA、IgG 和IgM 的含量通過Sysmex(日本)全自動生化分析儀進行測定。參照ELISA 試劑盒操作說明測定血清中的IL-2、IL-6、IL-10 和TNF-α 等血清免疫指標。
1.4 數據統計與分析 所有數據采用Excel 進行預處理,通過SPSS 20.0 進行單因素方差分析,采用LSD 法進行多重比較,P<0.05 表示組間差異顯著。
2.1 茯苓提取物對家兔生長性能的影響 由表2 可以,試驗組平均日增重顯著高于對照組(P<0.05),且各試驗組之間的差異不顯著(P>0.05),其中試驗I、II 和III 組的平均日增重分別較對照組顯著增加1.79、1.56 和0.77 g/d(P<0.05)。所有組別之間的平均日采食量無顯著差異(P>0.05),試驗組料重比均顯著低于對照組(P<0.05),而各試驗組之間的差異不顯著,其中試驗I、II 和III 組的料重比分別較對照組顯著降低4.42%、4.41% 和2.34%(P<0.05)。不同處理之間的腹瀉率無顯著差異(P>0.05)。

表2 日糧中添加不同比例茯苓提取物對家兔生長性能的影響
2.2 茯苓提取物對家兔血清免疫球蛋白含量的影響 由表3 可知,試驗組IgA 和IgG 含量顯著高于對照組(P<0.05)。各試驗組血清IgM 含量和對照組無顯著差異(P>0.05),但均高于對照組。

表3 日糧中添加不同比例茯苓提取物對血清免疫指標的影響 mg/L
2.3 茯苓提取物對家兔血清細胞因子含量的影響 由表4 可知,試驗組TNF-α 含量較對照組顯著降低(P<0.05),且從各試驗組間的差異看,試驗II 組的TNF-α 含量最低,試驗I 組的TNF-α 含量最高,但都顯著低于對照組(P<0.05)。試驗組IL-1β 含量和對照組無顯著差異(P>0.05)。試驗II 和III 組IL-6 含量顯著低于對照組和試驗I 組(P<0.05),試驗組IL-10 含量顯著高于對照組(P<0.05),且其中試驗II 和III 組的IL-10 含量均顯著高于試驗I組(P<0.05)。

表4 日糧中添加不同比例茯苓提取物對血清細胞因子含量的影響 mg/L
茯苓多糖是茯苓的主要活性成分,大量研究發現,茯苓多糖具有抗炎、抗免疫及氧化等生物活性(關玉婷等,2022 ;張熠璇等,2022 ;蔣逸凡等,2021)。其中,免疫調節作為中藥材多糖的主要生物活性之一得到了廣泛的關注和研究。其中,茯苓多糖在細胞、體液及黏膜免疫等方面均表現出明顯的增強或修復作用(陳凱琴等,2022 ;劉星汶等,2021)。因此,茯苓多糖作為植物多糖中的重要一員,不僅在人類臨床醫學上得到廣泛關注,而且在畜牧生產中也逐漸被廣泛應用。研究表明,添加0.06% 的白術茯苓多糖能顯著改善斷奶仔豬的生長性能,緩解腹瀉率(陳麗玲等,2020)。同時,龔澤修等(2020)研究發現,在母豬中添加100 mg/kg 的茯苓多糖能改善母豬和仔豬的血清免疫性能和抗氧化性能。本研究結果顯示,茯苓多糖能顯著提高家兔的平均日增重,且降低了家兔的料重比,在家兔中添加0.1% 茯苓多糖對家兔的生長性能改善效果最佳。
茯苓多糖能通過提高巨噬細胞的吞噬活性,調整T 細胞亞群的比值來發揮其免疫調節活性,改善機體的免疫能力。初宇軒等(2022)研究發現,添加1% 的茯苓多糖能顯著提升鸚鵡魚肝臟中非特異性免疫指標溶菌酶、AKP 活力,進一步改善鸚鵡魚的免疫能力。同樣也有研究發現,中添加0.1% 的茯苓多糖能顯著改善肉雞的生長速度,提高肉雞的免疫指數(王寬波等,2020)。其中,血清免疫球蛋白質水平是影響機體抵抗外界病毒侵襲的重要指標之一。研究發現,白術多糖能刺激小鼠產生特異性IgG 抗體,顯著提升小鼠IgG 和IgA 的含量(胡曉蕾等,2006)。此外,孫洲等(2020)發現,在中添加0.1% 茯苓多糖能顯著提高仔豬血清中的白蛋白、IgG、IgM、IgA 含量,表明其具有顯著的免疫改善效果。本試驗結果表明,家兔中添加不同比例的茯苓多糖能顯著提升IgA 和IgG 的含量,且不同程度地提升IgM 的含量,添加0.1% 茯苓多糖時,家兔血清中IgA、IgG和IgM 的含量最高,表明在此添加比例下,家兔的免疫性能改善效果最佳。
此外,TNF-α、IL-1、IL-6 等促炎細胞因子在機體發揮免疫調節過程中發揮著重要作用(董瑛等,2017)。其中IL-10 能抑制TNF-α、IL-1、IL-6 等分泌,因此,在機體中起到保護性抗炎的作用(郭媛媛等,2023)。在本試驗中,家兔中添加不同比例的茯苓多糖均能顯著降低TNF-α 和IL-6 的含量,顯著提高IL-10 的含量。這與陳麗玲等(2020)的研究結果一致,其發現在基礎日糧中添加0.06% 的白術多糖能顯著降低斷奶仔豬血清中的腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和白細胞介素-6(IL-6)含量,顯著提高了血清白細胞介素-10(IL-10)的含量,有效改善了仔豬的免疫水平。以上結果表明,中添加適宜的茯苓多糖能有效提升家兔的細胞免疫水平。
綜上所述,中添加茯苓多糖能提高家兔的平均日增重,降低其料重比,改善機體的免疫水平。在本試驗條件下,家兔中茯苓多糖的適宜添加水平為0.1%。