貴陽市新生兒篩查中心新生兒先天性腎上腺皮質增生癥篩查分析

李林潔 楊雪 劉興宇 張曉怡

(貴陽市婦幼保健院優生遺傳科,貴州 貴陽 550002)

先天性腎上腺皮質增生癥(congenital adrenalhyperplasia,CAH)為常染色體隱性遺傳代謝病,由雙等位基因缺陷引起,該缺陷編碼參與皮質醇生物合成的酶和輔助因子蛋白,CAH最常見的原因是CYP21A基因的突變或缺失引起的21-羥化酶缺乏癥(21-hydroxyulase deficiency,21-OHD),占所有病例的90%～95%[1]。國內外報道發病率1/10 000～1/20 000[1-3]。CAH中的生化缺陷會轉化為一系列臨床后果,包括腎上腺皮質功能不全、外生殖器不同程度的病理改變以及性別發育異常[4]。早期診斷能有效減輕疾病帶來的后果,因此新生兒期的早期篩查與診斷就顯得尤為重要。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選擇貴陽市新生兒疾病篩查中心2019—2020年對轄區助產機構出生的118 670例活產新生兒進行CAH篩查的臨床資料。

1.2 標本采集嚴格按照《新生兒疾病篩查采血技術規范》,充分哺乳的新生兒出生72 h后,于足跟中外側1/3處進行末梢血采集,采集濾紙片標準為S&S903型號,血斑在自然通風的條件下平置晾干,并密封保存于4℃冰箱,在5個工作日內送檢至貴陽市新篩中心。

1.3 檢測方法珀金埃爾默PerkinElmer(芬蘭)全自動熒光免疫分析儀,17-OHP測定試劑盒(時間分辨熒光法)。采用固相時間分辨熒光免疫分析方法檢測干血斑中17α-羥孕酮的濃度。實驗操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.4 質量控制每批次實驗每塊96微孔板均設標準曲線和低、高值質控,保證檢測結果的準確性和可靠性。每月做室內質控分析,每年參加國家臨檢中心室間質評活動,成績均合格。

1.5 結果判斷采用本地人群17-OHP切值,正常體重足月兒初篩血片標本兩次檢測結果均≥11 nmol/L,低體重兒(<2 500 g)初次結果≥11 nmol/L,待體重>2 500 g后召回采血,結果仍≥11 nmol/L的可疑患兒將被轉診至兒童內分泌科抽血做生化及激素檢測,必要時根據臨床癥狀進行超聲檢測和基因診斷便于確診。

1.6 統計學方法采用SPSS22.0統計學軟件進行分析。經卡方檢驗、非參數檢驗分析,P<0.05為差異有統計學意義。不同性別、出生體重、孕周之間初篩樣本17-OHP指數濃度值組間差異均顯著(P<0.05),經卡方檢驗,不同性別、出生體重、早產和足月兒之間17-OHP指標初篩陽性率組見差異顯著(P<0.05)。

2 結 果

2019—2020年12月,貴陽市新篩中心共開展CAH篩查118 670例,17-OHP篩查陽性召回并診斷為CAH的患兒6例,其中失鹽型5例,單純男性化型1例(表1)。篩查人群CAH的發生率為1∶19 778。118 670名接受了CAH篩查的新生兒,其中112 250(94.6%)例在37～41周出生,108 419(91.4%)例出生體重介于2 500～3 999 g之間,另有5 988(5.0%)例新生兒出生孕周<37周,有4 818(4.1%)例新生兒出生體重<2 500 g。根據17-OHP在新生兒末梢血的濃度99.5%、99.8%置信區間設定本地篩查切值(表3),共有273例新生兒初篩血片未通過初篩,表2不同性別、孕周、出生體重初篩陽性率組間比較顯示,孕周<37周及出生體重<2 500 g的新生兒初篩陽性率較高,分別為2.31%及1.62%,建議早產低體重新生兒糾正胎齡達37周、體重達5 000 g以上再進行采血復查,復查結果17-OHP均降至正常水平。另19例新生兒復采血片后仍未通過篩查,轉診至兒童內分泌科進行進一步診斷,最終確診6例CAH患兒,這些患兒的初篩末梢血17-OHP濃度范圍為48.2～556 nmol/L。

表1 2019—2020年貴陽市新生兒CAH篩查情況(n)

表2 不同性別、孕周、出生體重17-OHP指標濃度值及初篩陽性率組間比較

表3 17-OHP指標濃度值分布(99.5～99.8%置信區間)

3 討 論

CAH按照酶缺陷類型的不同,可分為21-OHD、11β-羥化酶缺乏癥(11β-hydroxylase deficiency,11β-OHD)、3β羥類固醇脫氫酶缺乏癥(3β-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)、17α-羥化酶缺乏癥(17α-hydroxylase deficiency,17α-OHD)等。新生兒CAH篩查以最常見的21-OHD類型為主,本病由基因突變導致酶缺陷,皮質醇激素合成不足繼而負反饋調節下丘腦—垂體—腎上腺軸,促使垂體分泌的促腎上腺皮質激素(ACTH)增加,繼而引起一系列臨床癥狀,典型特征為血清17α-OH孕酮升高。據文獻報道[5],上海地區活產新生兒21-OHD發病率為1∶16 866,山西省六地市發病率為1/21 459[6],廣東省中山市發病率為1/10 475[7],貴陽市新生兒疾病篩查中心2019—2020年118 670例活產兒篩查數據顯示, 21-OHD發病率為1∶19 778,貴陽市發病率高于山西地區,低于上海、廣東中山地區。

新生兒篩查CAH的目的是通過測定血17-OHP,早期發現和診斷先天性腎上腺皮質增生癥,有很多因素都會影響新生兒體內17-OHP濃度水平,多項研究顯示,孕周和體重是其中最重要的兩個影響因素[8-9]。早產兒和低體重兒因腎功能、腎上腺皮質發育不成熟,以及較高水平的促腎上腺皮質激素,導致17-OHP水平異常增高,而并非酶的先天性缺陷[10-12]。本研究統計結果顯示,孕周<37周的早產兒17-OHP濃度99.5%～99.8%分位數為15.5～21.2 nmol/L,體重<2 500 g的低體重兒17-OHP濃度99.5%～99.8%分位數為15～19.3 nmol/L,而貴陽市篩查樣本總體 17-OHP濃度99.5%～99.8%分位數為10.4～11.3 nmol/L,如果單一使用總體樣本計算的切值11 nmol/L,早產兒和低體重兒的假陽性就會相對增加,為了減輕家長的擔憂和召回復查的壓力,本研究對17-OHP初篩需要采血復查的早產兒和低體重兒,建議糾正胎齡達37周、體重達5 000 g以上再進行采血復查,復查結果均處于正常范圍。

通過新生兒CAH篩查,能早期發現CAH患兒并進行診療,減少危及生命并發癥的發生,預防女性患兒由于外生殖性男性化造成的性別誤判,預防并減輕生理、心理發育障礙。我市的新生兒腎上腺皮質增生癥篩查從篩查、確診、治療、隨訪形成一系列閉環流程,旨在患兒臨床癥狀出現前或發病初期進行確診,盡量減少對患兒的影響,定期分析篩查數據、總結篩查經驗,不斷提高篩查中心的服務水平,促進CAH新生兒篩查在我市的推廣,提高人口素質。

利益沖突說明/Conflict of Intetests

所有作者聲明不存在利益沖突。

倫理批準及知情同意/Ethics Approval and Patient Consent

本研究通過貴陽市婦幼保健院倫理委員會(科學倫理委員會)批準,患兒家屬均知情同意。