全自動QuEChERS結合氣相色譜法測定保健食品中六六六、滴滴涕殘留

摘要：本研究旨在探索建立一種使用全自動QuEChERS技術結合氣相色譜法測定保健食品中六六六、滴滴涕殘留的新方法。通過全自動QuEChERS樣品制備系統提取樣品中的六六六、滴滴涕殘留，經ZB-1701色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）分離，再通過配置電子捕獲檢測器（ECD）的氣相色譜儀測定，外標法定量。六六六、滴滴涕各組分均在18min前出峰，分離度高，標準曲線線性良好（R2＞ 0.99），方法檢出限為0.151 ～ 0.191 μg·kg-1，定量限為0.503 ～ 0.636 μg·kg-1，加標回收率為72.8%～ 88.0%，相對標準偏差（RSD）為2.14%～11.0%。新方法高效簡便，人工成本少，靈敏度、準確度及精密度均能達到檢測要求，適用于保健食品中六六六、滴滴涕殘留量的檢測。

關鍵詞：QuEChERS；氣相色譜法；保健食品；六六六；滴滴涕

Development of an Automatic QuEChERS-Gas Chromatography Method for the Determination of HCH and DDT Residues in Dietary Supplements

FU Minhao

（ Fujian Inspection and Research Institute for Product Quality， Fuzhou， Fujian 350002， China ）

Abstract： The objective of the research was to establish a method for the determination of HCH and DDT residues in dietary supplements using automatic QuEChERS combined with gas chromatography. Samples were prepared using an automatic QuEChERS system to extracted HCH and DDT residues ， which were then separated by a ZB-1701 chromatographic column "（30 m × 0.25 mm × 0.25 μm） and determined by gas chromatography with an electron capture detector （ECD）. Quantification was performed using the external standard method. All HCH and DDT components peaked before 18 minutes， with high separation and good linearity of standard curves （R2 gt; 0.99）. The limit of detection of the method was 0.151 ～ 0.191 μg·kg-1 with the limit of quantification of 0.503 ～ 0.636 μg·kg-1. The recovery rate ranged from 72.8% to 88.0% and the relative standard deviation （RSD） was 2.14 ～ 11.0%. The method is efficient， simple and labor-saving， with sensitivity， accuracy and precision that all meet the requirements. It is a suitable method for the residual determination of HCHs and DDTs in dietary supplements.

Key Words： "QuEChERS; Gas chromatography; Dietary supplement; HCHs; DDTs

0 引言

有機氯作為一類廣譜殺蟲劑，是我國農業生產中最常見的三大類農藥之一[1]。六六六（HCH）、滴滴涕（DDT）屬于有機氯類農藥，雖然我國早已禁用，但其化學性質穩定、難以降解的特性使得它們能在土壤、水體等各類環境中穩定存在數十年[2-3]。存于環境中的六六六、滴滴涕可能被植物吸收蓄積，導致其殘留目前仍能在許多植物源性保健食品中檢出。近年來，人們對保健食品的需求逐漸增加，對其是否存在農藥殘留的風險也日益關注。GB 16740-2014《食品安全國家標準 保健食品》規定保健食品應符合相應類屬食品的食品安全國家標準規定，這其中就包括植物源性保健食品中六六六、滴滴涕的檢測[4]。

保健食品中六六六、滴滴涕殘留目前主要依據國家標準GB/T 5009.19－2008[5]的方法來檢測，樣品前處理包括使用濃硫酸磺化來凈化除雜等步驟，部分樣品需要多次凈化才能保證上機溶液的純凈度，在實際檢測中存在著耗時長、操作繁瑣、具有一定危險性等問題。QuEChERS法作為一種新型快速樣品前處理技術，具有適用范圍廣、速度快、成本低等優點，因此被廣泛應用于食品、農產品等檢測領域[6-8]。

本研究使用全自動QuEChERS樣品前處理系統代替國家標準[5]中前處理的方式，提高前處理效率、減少人工成本、增強凈化效果、提升實驗安全性，并結合氣相色譜法建立一種快速、準確性高的新檢測方法，適用于保健食品中六六六、滴滴涕的檢測。

1 儀器與方法

1.1 儀器與試劑

儀器：Agilent 7890A氣相色譜儀配ECD電子捕獲檢測器（美國Agilent公司）；ZB-1701（30 m×0.25 mm ×0.25 μm）色譜柱（美國Phenomenex公司）；BT125D十萬分之一電子分析天平（德國Sartorius公司）；超純水系統（美國Milli-pore公司）；HRH-Q60PRO全自動樣品制備系統（北京慧榮和科技有限公司）；AutoEVA-60全自動平行濃縮儀（廈門睿科有限公司）；0.45 μm有機濾膜（天津市津騰實驗設備有限公司）等。

試劑：六六六（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、滴滴涕（ ρ，ρ'-DDE、ρ，ρ' -DDD、o，ρ' -DDT、ρ，ρ' -DDT）混標（100 μg·mL-1，各組分純度均大于95%，First Standard-天津阿爾塔科技有限公司）；QuEChERS凈化管（15 mL，含

600 mg MgSO4、200 mg PSA以及400 mg GCB， 深圳逗點生物技術有限公司）；無水硫酸鎂（分析純，西隴科學股份有限公司）；醋酸鈉（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）；乙腈（分析純，山東禹王和天下新材料有限公司）；丙酮（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）。

1.2 樣品前處理

稱取5 g樣品（精確至0.01 g）于50 mL離心管中，將離心管放入全自動樣品制備系統，設置儀器實驗方案后運行。待儀器運行完畢，將10 mL玻璃試管取出，放入平行濃縮儀，40℃水浴加熱條件下氮吹至近干，隨后加入2 mL丙酮復溶，經0.45 μm有機濾膜過濾后裝入進樣小瓶待測。

全自動樣品制備系統實驗方案設計：1）加入8 mL純水，渦旋0.6 min，靜置30 min；2）加入15 mL乙腈及均質子，渦旋0.6 min；3）加入含有6 g無水硫酸鎂及1.5 g醋酸鈉的鹽包萃取，震蕩1 min，轉移至離心機4500 r·min-1離心

3 min；4）移取6 mL上清液至QuEChERS凈化管中，渦旋3 min，離心3 min；5）移取4 mL上清液于10 mL玻璃試管中。

1.3 標準溶液配制

1.3.1 標準儲備溶液

移取1.00 mL六六六、滴滴涕混標于100 mL

容量瓶中，用丙酮定容，配制成質量濃度為

1 μg·mL-1的標準儲備液，-18℃保存。

1.3.2 標準工作液

精確移取適量標準儲備液，用丙酮逐級稀釋成質量濃度為0.002、0.005、0.01、0.02、0.04、

0.08 μg·mL-1的標準溶液，現配現用。

1.4 色譜條件

色譜柱：Agilent ZB-1701色譜柱（30 m×

0.25 mm×0.25 μm）；載氣：氮氣流速1.0 mL·min-1；

升溫程序：初始溫度為100℃，保持2.0 min，以15℃·min-1升至280℃，保持1 min，最后以20℃·min-1升至300℃，保持5 min；后運行

2 min；進樣口溫度：300℃，進樣量：1.0 μL；進樣方式：不分流進樣。

2 結果與討論

2.1 色譜條件

本實驗按上述“1.4”色譜條件分別對空白試劑、標準溶液以及供試品溶液進行測試，色譜圖如圖1所示。可以看出六六六、滴滴涕8個組分均在18min前出峰，相比于國家標準[5]出峰時間更短，且組分間能較好地分離，峰型對稱，基線較平穩。

2.2 標準曲線及線性范圍

分別移取“1.3.2”中系列標準溶液各1 mL上機測定，并以色譜峰面積（y）對溶液濃度（x，μg·mL-1）進行線性回歸分析，得到各組分的回歸方程、線性范圍以及相關系數見表1。六六六、滴滴涕各組分在0.0020～0.080μg·mL-1范圍內均能呈現良好的線性關系，相關系數均大于0.99。

2.3 方法檢測限

通過3倍信噪比（S/N＝3）計算本方法檢出限，以10倍信噪比（S/N＝10）計算方法定量限，結果均見表2。本方法中六六六、滴滴涕各組分的檢出限為0.151～ 0.191 μg·kg-1，定量限為0.503～ 0.636 μg·kg-1。國家標準[5]中未規定以保健食品作為基質的檢出限，其他基質六六六、滴滴涕的檢出限范圍為0.018～0.634 μg·kg-1。以保健食品為基質的文獻[9-11]中，六六六、滴滴涕的檢出限范圍為0.19～2.14 μg·kg-1。本方法檢出限在國家標準檢出限范圍內，且低于文獻檢出限，即本方法在靈敏度方面能滿足六六六、滴滴涕的檢測要求。

表2 " "六六六、滴滴涕各組分在樣品中的檢出限及定量限

2.4 回收率及精密度

選取不含六六六、滴滴涕的靈芝孢子粉空白樣品，按低、中、高三水平進行加標回收率實驗，加標水平分別為0.004 、0.008 和0.016 mg·kg-1，每個水平重復測定6次，回收率及精密度結果見表3。國家標準[5]檢測方法中未對回收率范圍作出規定，本方法六六六、滴滴涕各組分回收率范圍為72.8%～88.0%，RSD為2.14%～11.0%。本方法回收率滿足GB/T 27404-2008[12]中被測組分含量小于0.1 mg·kg-1時，回收率范圍為60%～120%的規定，由此表明本方法在準確度及精密度方面能滿足六六六、滴滴涕的檢測要求。

2.5 樣品測定

選取市售保健食品樣品20份，樣品包括靈芝孢子粉、靈芝口服液、西洋參含片、西洋參口服液等，均購于正規網絡平臺及福建省各地市的商店。采用本研究所建立的方法對其進行六六六、滴滴涕殘留量檢測，所有樣品六六六、滴滴涕各組分均未檢出。

3 結論

本研究建立了一種應用全自動QuEChERS結合氣相色譜法測定保健食品中六六六、滴滴涕殘留的新方法。新方法樣品前處理效率高，人工成本少，線性、檢測限、回收率及精密度均能達到檢測要求，可用于保健食品中六六六、滴滴涕殘留量的檢測。

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