中華絨螯蟹不同家系幼蟹生長性能及性早熟比較試驗

高志寶，張婷，李旭光，鄧燕飛，周軍*

（1.江蘇海洋大學海洋科學與水產學院，江蘇 連云港 222005；2.江蘇省淡水水產研究所，農業農村部淡水蝦蟹遺傳育種與養殖重點實驗室，江蘇 南京 210017）

中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis），又名河蟹，隸屬于節肢動物門，軟甲綱，十足目，弓蟹科，絨螯蟹屬，廣泛分布于我國東南沿海以及長江、甌江、遼河等內陸水域，是我國重要的經濟養殖蟹類，2022 年全國河蟹養殖面積53 萬hm2，產量80 萬t[1]。河蟹養殖周期主要包括苗種繁育、幼蟹培育和成蟹養殖3 個階段，其中幼蟹質量直接決定著成蟹的養殖產量與效益。幼蟹培育階段，1 齡幼蟹性腺如提前發育達到性成熟，會導致性早熟。性早熟1 齡蟹生長速度快，個體大，性腺發育早，與正常幼蟹搶食餌料，但體質量增長緩慢甚至停滯，絕大多數在翌年死亡，無法用于后續成蟹的養殖，給養殖生產帶來巨大的損失[2]。因此，控制降低1 齡蟹性早熟比例，是幼蟹培育階段的關鍵。

河蟹性早熟，受到內源種質遺傳和外源因素雙重調控[3]。目前對于河蟹性早熟的研究，主要集中在溫度、鹽度、溶解氧等環境因素，以及餌料、養殖密度、地理群體等養殖條件對性早熟的影響方面，而有關內源遺傳對1 齡蟹性早熟的影響研究，尚存在較大爭議[4]。在同一養殖條件下培育蟹種，部分幼蟹個體仍然會性早熟，暗示性早熟的發生與內源遺傳有關。現開展中華絨螯蟹不同家系幼蟹生長性能及性早熟的比較試驗，分析影響中華絨螯蟹生長性能與性早熟的關鍵因素，為河蟹遺傳選育提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 時間與地點

2022 年5—12 月。試驗地點位于江蘇省鎮江揚中市江蘇省淡水水產研究所基地。

1.2 材料

選取8 個150 m2長方形池塘。池塘為平底，每池用10 kg 漂白粉消毒，清除野雜魚、水生昆蟲等。在進排水口設立孔徑0.18 mm 網柵，過濾魚卵等敵害生物。所有網箱均放置在水體聯通的池塘圍隔中，保證養殖水環境條件均一。4 月中旬應開始種植水草，以水花生為主，伊樂藻為輔，其中采用毛竹和線繩設置水花生帶，帶寬80～100 cm，沿池塘四周種植伊樂藻，養殖前期水草覆蓋率為40%，中后期為70%。河蟹親本選自江蘇省淡水水產研究所揚中基地的成蟹養殖池塘。雌、雄親本均于2021 年11 月，運至江蘇省淡水水產研究所鹽城射陽中華絨螯蟹繁育基地，進行人工繁殖，定向構建8 個全同胞家系，分別為ES1—ES8，每對家系親本（雌雄1∶1）分別在100 L 的網箱中單獨交配和育苗。

1.3 試驗方法

1.3.1 幼蟹培育

將培育出來的大眼幼體，運送至江蘇省淡水水產研究所揚中基地進行蟹種培育試驗，按1 個家系投放0.5 kg 大眼幼體，1 個家系1 個池塘進行定向蟹種培育。幼蟹培育全程采用相同配合飼料投喂，飼料日投喂量約為池內蟹體質量的5%，投喂配合飼料粒徑，隨著蟹種的生長逐步加大，每天投喂1，次，全池潑灑。根據天氣和攝食情況，適時調整飼料投喂量。每天早晚巡塘，觀察幼蟹的攝食、活動、蛻殼等情況，檢查池埂是否滲漏、攔隔設施是否嚴密、防止幼蟹逃逸等。嚴防野雜魚苗進入培育池，及時清除進入培育池中的青蛙、黃鱔等；及時撈除池中飄浮的臟污，清除池埂雜草，做好塘口檔案記錄。

1.3.2 生長性能與性早熟測定

在90、120 和150 日齡，分別采集每個家系30 只個體（雌雄各15 只），剔除斷肢個體，采用電子游標卡尺測量幼蟹殼長和殼寬（精確到0.01 mm），采用電子天平稱量幼蟹體質量（精確到0.1 g）。10 月份以后，采用地籠集中捕撈規格蟹種和性早熟個體。性早熟判別主要依據外部副性特征，其中雄蟹主要依據交接器是否突出和硬化、大螯絨毛覆蓋面積和長度；雌蟹主要依據腹臍形狀、腹臍絨毛長度和殼的顏色。結合性腺解剖，雌蟹卵巢發育到II～III期，雄蟹精巢發育到III 期，篩選確定性早熟個體。后期將池內水花生分段集中，先用網箱集中捕撈，再用地籠沖水誘捕，最后清塘捕撈，統計每個家系的幼蟹產量和性早熟蟹比例。

1.4 數據分析

采用Graphpad Prism 8.3 軟件對試驗數據進行統計分析。統計幼蟹不同生長階段殼長、殼寬和體質量數據，結果用（平均值±標準誤）表示。對數據進行方差齊性檢驗，采用單因素方差Tukey 法，進行多重比較分析，P＜0.05 為差異顯著，P＜0.01 為差異極顯著。

2 試驗結果

河蟹不同家系幼蟹生長階段的殼長、殼寬和體質量隨機抽樣測試結果見表1。河蟹不同家系正常與性早熟蟹種體質量比較見圖1。河蟹不同家系正常與性早熟蟹種數量比較見圖2。

圖1 河蟹不同家系正常與性早熟蟹種體質量比較

圖2 河蟹不同家系正常與性早熟蟹種數量比較

表1 河蟹不同家系間幼蟹生長階段的殼長、殼寬和體質量隨機抽樣測試結果①

3 討論

3.1 河蟹不同家系的生長性能

本試驗結果表明，河蟹不同家系間的生長性狀存在差異，這與文獻[5]關于長江水系河蟹家系蟹種階段生長性能的研究結果相似。為辨識內源與外源因素對河蟹生長的影響，本試驗整個蟹種培育階段，不同家系間養殖水溫、pH 值、氨氮等指標相同，養殖密度相同、蟹種規格均一。因此確定河蟹不同家系間的生長性狀差異，主要由內源遺傳因素導致。

家系選育是目前遺傳育種常用的方法之一，通過建立家系，比較不同家系生長性狀，可獲得性狀穩定的家系[6]。鄭巖等[7]在對1 齡性早熟河蟹關于早熟性狀遺傳能力方向的研究時發現，早熟蟹回捕率與扣蟹規格呈極顯著正相關，與扣蟹回捕率、總回捕率呈極顯著負相關。王海寧等[8]報道了1 齡早熟河蟹家系后代的體質量和甲殼寬，均顯著低于2 齡成熟家系，選育河蟹家系的生長性能和免疫抗病生理指標優于未選育群體。

3.2 河蟹不同家系的性早熟差異

相同養殖環境條件下的不同家系河蟹性成熟比例存在差異，表明種質遺傳因素貢獻度較大。本試驗中，河蟹不同家系性早熟數量比例為3.12%～9.61%，這與許鄭超等[9]研究的性早熟數量比例為2.22%～7.19%相近。河蟹性成熟包括生理性成熟、功能性成熟和形態性成熟，首先是性腺發育進入生理性成熟，然后螯肢絨毛、腹節、步足剛毛、體色第二性征的形態性成熟，最后是交接器骨質化、降河洄游交配的功能性成熟[10]。影響甲殼類性腺發育進程的因素，主要包括光照、溫度、營養和遺傳等。Li等[11]研究表明，弱光照強度和間歇饑餓，不僅可以有效降低幼蟹的性早熟率，還可以激發幼蟹的補償生長潛能。杜海燕等[12]比較分析了積溫、餌料和遺傳3 個因素對性早熟的影響，結果表明，河蟹不同家系的組間變異明顯大于組內變異，種質遺傳因素對幼蟹性早熟的影響最大。本試驗中，養殖環境相同，養殖密度與餌料投喂相似，不同家系河蟹性早熟比例差異的最大變量，主要來自不同家系的種質遺傳背景。文獻[13]通過組織化學和分子生物學等方法，篩選發現性早熟個體能量代謝通路中關鍵基因的突變，提高了能量攝入和轉化效率，加速了性腺發育。而本試驗中，部分家系性早熟比例較高，是否與能量代謝通路有關，還有待于進一步研究。