宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)假陰性結(jié)果調(diào)查及相關(guān)因素分析

【摘要】目的 分析宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢查中假陰性結(jié)果的發(fā)生情況及其相關(guān)因素，為臨床提供參考。方法 回顧性分析2020年7月至2023年4月80例于黔西市人民醫(yī)院行宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢查患者的臨床資料。患者經(jīng)組織病理學(xué)檢查確診為陰道上皮內(nèi)瘤變2級(jí)及以上病變（VAIN2+）或?qū)m頸上皮內(nèi)瘤變2級(jí)及以上病變（CIN2+），且宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢查提示無上皮內(nèi)病變或惡性病變（NILM）即為假陰性，復(fù)閱細(xì)胞學(xué)假陰性涂片，判讀為陰性時(shí)則視為復(fù)閱陰性（細(xì)胞學(xué)假陰性組），否則為細(xì)胞學(xué)異常[包括低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）、非典型鱗狀上皮細(xì)胞不除外高度鱗狀上皮內(nèi)病變（ASC-H）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）及意義不明的不典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASC-US）]（細(xì)胞學(xué)異常組）。分析影響宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)假陰性結(jié)果的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。結(jié)果 80例患者中，宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)診斷假陰性14例，假陰性率為17.50%；通過復(fù)閱細(xì)胞學(xué)假陰性涂片，發(fā)現(xiàn)10例（71.43%）判讀為細(xì)胞學(xué)假陰性，4例（28.57%）判讀為細(xì)胞學(xué)異常；80例患者中70例細(xì)胞學(xué)異常。細(xì)胞學(xué)假陰性組患者年齡≤30歲、頸管內(nèi)或息肉上病變、HSIL及原位腺癌、無化生或腺細(xì)胞、宮頸重度炎癥、宮頸管至病灶距離≥1.00 cm及出血涂片占比均高于細(xì)胞學(xué)異常組（均Plt;0.05）；兩組患者宮頸重度糜爛、宮頸異物及宮頸形態(tài)凹凸比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Pgt;0.05）。多因素Logistic回歸分析顯示，年齡≤30歲、頸管內(nèi)或息肉上病變、HSIL及原位腺癌、無化生或腺細(xì)胞、宮頸管至病灶距離≥1.00 cm及出血涂片是影響宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)假陰性結(jié)果的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（均Plt;0.05）。結(jié)論 宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢查存在一定的假陰性率，不僅與年齡、病變位點(diǎn)及病變程度有關(guān)，還與無化生或腺細(xì)胞、宮頸管至病灶距離及出血涂片有關(guān)，臨床需重視。

【關(guān)鍵詞】宮頸上皮內(nèi)瘤變；陰道上皮內(nèi)瘤變；液基細(xì)胞學(xué)；假陰性結(jié)果

【中圖分類號(hào)】R737.3 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2096-2665.2024.03.0105.04

DOI：10.3969/j.issn.2096-2665.2024.03.034

流行病學(xué)調(diào)查顯示，近年來我國宮頸癌的發(fā)病率呈逐年上升趨勢[1]。自宮頸癌前病變進(jìn)展至宮頸癌需5～10年，故早期診斷癌前病變、及早開展對(duì)癥治療對(duì)改善患者預(yù)后尤為重要。巴氏涂片法雖為有效的篩查手段，但取材時(shí)細(xì)胞流失嚴(yán)重，且受涂片細(xì)胞過厚、黏液過多及炎癥細(xì)胞干擾等因素影響，其檢測宮頸癌或中度及以上宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）的敏感度有待提高[2]。近年來，隨著液基制片技術(shù)的不斷發(fā)展，宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢測被廣泛應(yīng)用于臨床，但其敏感度較低，特異度也受閱片者主觀影響，有一定概率出現(xiàn)假陰性結(jié)果[3]。組織病理學(xué)檢查在宮頸病變?cè)\斷中的效果較好，同時(shí)在宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢查質(zhì)量判斷中也發(fā)揮著重要作用。目前，對(duì)于組織病理學(xué)確診為陰道上皮內(nèi)瘤變（vaginal intraepithelial neoplasia，VAIN）2級(jí)及以上病變（VAIN2+）、CIN2級(jí)及以上病變（CIN2+）的患者，臨床往往需采取進(jìn)一步的治療策略，但組織病理學(xué)檢查存在漏診情況，導(dǎo)致其結(jié)果可能與細(xì)胞學(xué)篩查結(jié)果不一致[4]，故需結(jié)合兩者制訂下一步處理方案，而關(guān)于此類患者接受宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢查時(shí)假陰性結(jié)果發(fā)生情況及其相關(guān)影響因素鮮有報(bào)道。基于此，本研究探究宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢查中假陰性結(jié)果發(fā)生情況及其相關(guān)影響因素。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2020年7月至2023年4月80例于黔西市人民醫(yī)院行宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢查患者的臨床資料。患者年齡25～68歲，平均年齡（45.83±8.72）歲；BMI 18.80～26.50 kg/m2，平均BMI（22.52±1.84）kg/m2。本研究經(jīng)黔西市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均經(jīng)組織病理學(xué)診斷為VAIN2+或CIN2+的患者[5]；②首次接受宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢查；③年齡≥25歲，檢查前3 d未接受陰道沖洗、用藥，未進(jìn)行性生活；④臨床病理資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并免疫或血液系統(tǒng)疾病者；②合并先天性陰道畸形者；③合并嚴(yán)重感染或內(nèi)科疾病者；④有盆腔放療史、子宮切除史或?qū)m頸手術(shù)史者；⑤檢查前3個(gè)月內(nèi)使用過激素類藥物者；⑥處于妊娠期或月經(jīng)期者；⑦合并精神疾病患者。

1.2 研究方法 ①收集患者的臨床資料。包括年齡、病變位點(diǎn)、病變程度、有無化生或腺細(xì)胞、是否有宮頸重度糜爛、是否有宮頸重度炎癥、是否有宮頸異物、是否有宮頸形態(tài)凹凸、宮頸管至病灶距離（lt;1 cm，≥1 cm）及是否為出血涂片。②檢查方法：全部患者均行宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢查，應(yīng)用制片染色一體機(jī)（廣州市達(dá)誠醫(yī)療技術(shù)有限公司，粵穗械備20170733號(hào)，型號(hào)：DC-4212），根據(jù)操作規(guī)范程序完成制片，液基薄片制備后行固定、染色等處理。診斷參考宮頸/陰道細(xì)胞學(xué)“The Bethesda System”（TBS）報(bào)告系統(tǒng)[6]，宮頸液基細(xì)胞和微生物處理、保存試劑由廣州市達(dá)誠醫(yī)療技術(shù)有限公司執(zhí)行（粵穗械備20150311號(hào)，規(guī)格：100人份/箱）。由兩名高年資細(xì)胞學(xué)醫(yī)師采用雙盲法復(fù)閱細(xì)胞學(xué)假陰性涂片，結(jié)果呈陰性時(shí)即為復(fù)閱陰性，否則為細(xì)胞學(xué)異常[包括低度鱗狀上皮內(nèi)病變（low-grade squamous intraepithelial lesion，LSIL）、非典型鱗狀上皮細(xì)胞不除外高度鱗狀上皮內(nèi)病變（atypical squamous cells： cannot exclude high-grade squamous intraepithelial lesion，ASC-H）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）、意義不明的不典型鱗狀上皮細(xì)胞（atypical squamous cells of undetermined significance，ASC-US）]。組織病理學(xué)標(biāo)本源于陰道標(biāo)本（陰道穹隆、陰道殘端、陰道壁）及高頻電刀宮頸環(huán)切術(shù)、宮頸活檢、息肉摘除術(shù)、子宮全切術(shù)、宮頸管搔刮術(shù)取材等。標(biāo)本經(jīng)3.70%中性甲醛液固定、石蠟包埋、蘇木精-伊紅染色處理后于光鏡下觀察，參考相關(guān)文獻(xiàn)[7]行免疫細(xì)胞化學(xué)p16/Ki-67雙染色法檢測，按照世界衛(wèi)生組織制訂的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[8]予以診斷。

1.3 觀察指標(biāo) ①分析宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢查中假陰性結(jié)果的發(fā)生情況。假陰性例數(shù)與活檢例數(shù)的百分比即為宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)假陰性率。②影響宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)假陰性結(jié)果的單因素分析。③分析影響宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)假陰性結(jié)果的多因素Logistic回歸分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)數(shù)資料以[例（%）]表示，組間比較采用χ2或校正χ2檢驗(yàn)，等級(jí)資料比較采用秩和檢驗(yàn)；危險(xiǎn)因素分析采用多因素Logistic回歸分析。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)假陰性結(jié)果分析 80例患者中，組織病理學(xué)診斷宮頸/陰道惡性腫瘤12例（15.00%），宮頸/陰道癌前病變68例（85.00%）；宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)診斷假陰性14例，假陰性率為17.50%。14例宮頸 / 陰道液基細(xì)胞學(xué)診斷假陰性中，陰道惡性腫瘤1例（7.14%），VAIN2 2例（14.29%），VAIN3 2例（14.29%），宮頸惡性腫瘤1例（7.14%），宮頸原位腺癌1例（7.14%），CIN2 4例（28.57%），CIN3 3例（21.43%）。通過復(fù)閱細(xì)胞學(xué)假陰性涂片，發(fā)現(xiàn)10例（71.43%）判讀為細(xì)胞學(xué)假陰性（細(xì)胞學(xué)假陰性組），4例（28.57%）判讀為細(xì)胞學(xué)異常；80例患者中共計(jì)70例細(xì)胞學(xué)異常（細(xì)胞學(xué)異常組）。4例復(fù)閱判讀為細(xì)胞學(xué)異常病例中，HSIL、ASC-H、LSIL、ASC-US各1例（25.00%）；中表層鱗狀細(xì)胞異常2例（50.00%），外底層鱗狀細(xì)胞異常1例（25.00%）；異常細(xì)胞全部散在分布2例（50.00%）；核增大淺染2例（50.00%）；背景存在炎癥病變或伴角化性改變2例（50.00%）。

2.2 影響宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)假陰性結(jié)果的單因素分析 細(xì)胞學(xué)假陰性組患者年齡≤30歲、頸管內(nèi)或息肉上病變、HSIL及原位腺癌、無化生或腺細(xì)胞、宮頸重度炎癥、宮頸管至病灶距離≥1.00 cm及出血涂片占比均高于細(xì)胞學(xué)異常組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05）；兩組患者宮頸重度糜爛、宮頸異物及宮頸形態(tài)凹凸比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Pgt;0.05），見表1。

2.3 影響宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)假陰性結(jié)果的多因素Logistic回歸分析 將宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)假陰性結(jié)果作為因變量（細(xì)胞學(xué)假陰性=1，細(xì)胞學(xué)異常=0），將年齡（≤30歲=3，31～60歲=2，≥61歲=1）、病變位點(diǎn)（頸管內(nèi)或息肉上=4，陰道斷蒂或陰道壁=3，宮頸單點(diǎn)病變=2，宮頸多點(diǎn)病變=1）、病變程度（HSIL及原位腺癌=2，惡性腫瘤=1）、無化生或腺細(xì)胞（是=1，否=0）、宮頸重度炎癥（是=1，否=0）、宮頸管至病灶距離（≥1.00 cm=1，lt;1.00 cm=0）、出血涂片（是=1，否=0）作為自變量，進(jìn)行Logistic回歸分析。結(jié)果顯示，年齡≤30歲、頸管內(nèi)或息肉上病變、HSIL及原位腺癌、無化生或腺細(xì)胞、宮頸管至病灶距離≥1.00 cm及出血涂片是影響宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)假陰性結(jié)果的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（Plt;0.05），見表2。

3 討論

液基細(xì)胞學(xué)檢查是臨床上廣泛使用的宮頸病變篩查手段，能夠直接反映宮頸細(xì)胞狀態(tài)，顯示已發(fā)生病變或形態(tài)改變的細(xì)胞，目前已被證實(shí)在宮頸癌及癌前病變篩查中具有一定的診斷效能，但受取材、制片及閱片醫(yī)師主觀性等因素影響，其診斷結(jié)果仍存在一定的假陰情況[9]。本研究中，通過復(fù)閱涂片發(fā)現(xiàn)10例判讀為細(xì)胞學(xué)假陰性，復(fù)閱細(xì)胞學(xué)假陰性率為12.50%，這與上述報(bào)道結(jié)論相接近。盡管近年來已有報(bào)道探討宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢查用于宮頸癌的診斷價(jià)值[10]，但對(duì)于組織病理學(xué)確診的VAIN2+或CIN2+病變者，宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢查中假陰性結(jié)果發(fā)生情況及其相關(guān)影響因素的研究較少。

本研究多因素Logistic分析結(jié)果顯示，年齡≤30歲、頸管內(nèi)或息肉上病變、HSIL及原位腺癌是影響宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)假陰性結(jié)果的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，與既往報(bào)道相符[11]。分析原因，通常于轉(zhuǎn)化區(qū)可見宮頸癌及癌前病變，但年齡≤30歲者常于宮頸口外環(huán)處可見宮頸上皮轉(zhuǎn)化區(qū)，接受宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢查時(shí)利用取樣刷旋轉(zhuǎn)取材（以宮頸管口為軸心），主要在宮頸管口內(nèi)環(huán)處獲取細(xì)胞，偏離轉(zhuǎn)化區(qū)，因此容易造成假陰性診斷結(jié)果[12]。當(dāng)病變位于頸管內(nèi)或息肉上時(shí)，取材面受到限制，很難確保各面上的細(xì)胞成分可被均勻刷取，容易出現(xiàn)假陰性。惡性腫瘤細(xì)胞通常呈侵襲性生長，病變范圍較廣，可見糟碎異樣組織或增生物，因此細(xì)胞取樣刷獲取異常細(xì)胞的可能性較大；而HSIL及原位腺癌病變范圍往往受限于局灶區(qū)域，肉眼難以判斷組織，影響取材質(zhì)量，因此容易產(chǎn)生假陰性結(jié)果[13]。

本研究多因素Logistic分析結(jié)果顯示，無化生或腺細(xì)胞、宮頸管至病灶距離≥1.00 cm及出血涂片是影響宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)假陰性結(jié)果的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，這與孫培勇[14]研究的結(jié)論相似。推測原因，無化生或腺細(xì)胞提示取材時(shí)未獲取轉(zhuǎn)化區(qū)域病變細(xì)胞，取材部位的代表性與全面性受到影響，因此容易出現(xiàn)假陰性。部分患者屬于宮頸癌陰道上皮處病變，宮頸管距離病灶較遠(yuǎn)，而細(xì)胞取樣刷直徑較小，取材時(shí)若未將細(xì)胞取樣刷充分散開，可能無法準(zhǔn)確獲取病灶部位細(xì)胞，最終出現(xiàn)假陰性結(jié)果。存在出血涂片表示取材可能引起細(xì)胞破損或出血情況，導(dǎo)致血細(xì)胞數(shù)量劇增，促使原本的鱗狀上皮細(xì)胞被覆蓋，致使細(xì)胞結(jié)構(gòu)較為模糊、辨認(rèn)難度增大，最終引發(fā)假陰性結(jié)果。

綜上所述，宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)檢查存在一定的假陰性結(jié)果，其受年齡、頸管內(nèi)或息肉上病變、HSIL及原位腺癌、宮頸管至病灶距離、無化生或腺細(xì)胞及出血涂片等因素影響，臨床應(yīng)及早采取相關(guān)預(yù)防措施以降低細(xì)胞學(xué)假陰性率，提高該項(xiàng)檢查的應(yīng)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

張韶凱，趙方輝，喬友林.中國宮頸癌防治研究20年歷程與成就[J].中華流行病學(xué)雜志， 2020， 41（6）： 809-812.

張韶凱，羅喜平，李志芳，等.人乳頭瘤病毒分型檢測在宮頸癌前病變和宮頸癌篩查中的應(yīng)用價(jià)值[J].中華腫瘤雜志， 2020， 42（3）： 252-256.

王寶金，馬倩，趙欣欣，等.初善儀和子宮頸液基細(xì)胞學(xué)及人乳頭瘤病毒檢測在子宮頸疾病篩查中的應(yīng)用價(jià)值研究[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志， 2019， 35（11）： 856-859.

石杏先，余立群，高國蘭. 318例高級(jí)別宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌患者的TCT和hrHPV檢測分析[J].中國腫瘤臨床， 2019， 46（2）： 73-76.

李玉林.病理學(xué)[M]. 8版.北京：人民衛(wèi)生出版社， 2013： 315-324.

潘秦鏡. TBS子宮頸細(xì)胞學(xué)報(bào)告系統(tǒng)回顧及新版解讀[J].中國婦產(chǎn)科臨床雜志， 2017， 18（1）： 95-96.

吳憂，趙健，胡君，等.免疫細(xì)胞化學(xué)p16/Ki-67雙染色法檢測對(duì)于細(xì)胞學(xué)診斷為ASCUS、LSIL和ASC-H患者分流的意義[J].中華婦產(chǎn)科雜志， 2017， 52（11）： 734-739.

方三高，王巍偉，薛德彬，等.解讀WHO（2014）女性生殖器官（陰道）腫瘤分類[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志， 2016， 32（9）： 961-966.

楊磊，劉德佩，王芳芳.高危型人乳頭瘤病毒分型和液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查在宮頸癌前病變和宮頸癌篩查中的應(yīng)用價(jià)值[J].臨床與病理雜志， 2023， 43（6）： 1150-1156.

韓一栩，曾新.液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測在宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值分析[J].中國性科學(xué)， 2015， 24（8）： 21-24.

馬德勇，董穎，馮慧，等.宮頸/陰道液基細(xì)胞學(xué)假陰性診斷的影響因素分析[J].中華病理學(xué)雜志， 2020， 49（8）： 806-811.

陸亞玲，張金玲，許錟，等.液基薄層細(xì)胞學(xué)、高危型人乳頭瘤病毒檢查在宮頸癌及癌前病變篩查中的價(jià)值[J].中華疾病控制雜志， 2021， 25（10）： 1210-1213.

劉愛玲.宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變及鱗癌的液基薄層細(xì)胞學(xué)對(duì)照分析[J/CD].實(shí)用婦科內(nèi)分泌電子雜志， 2020， 7（11）： 103， 106.

孫培勇.宮頸癌前病變患者在新柏氏液基細(xì)胞學(xué)檢測診斷中出現(xiàn)假陰性的相關(guān)因素分析[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥， 2022， 29（23）： 145-148， 152.