HPLC-ELSD法測定硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊中慶大霉素C組分及有關物質含量

摘要：目的 為硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊中慶大霉素C組分及有關物質建立質控方法。方法 采用HPLC-ELSD方法，色譜柱：GRACEApollo C18柱（250 mm×4.6 mm， 5 μm）；流動相：0.2 mol/L三氟乙酸溶液-甲醇（96：4， V/V），流速0.6 mL/min；柱溫30 ℃；進樣量20 μL；Waters低溫分流型蒸發光散射檢測器，載氣流量40 psi，漂移管溫度55 ℃。結果 所建方法通過方法學驗證，慶大霉素C組分與各雜質間分離完全，慶大霉素、西索米星和小諾霉素分別在0.5～6 mg/mL、25～100 μg/mL和25～100 μg/mL的濃度范圍內，各濃度的對數值與對應色譜峰面積的對數值呈現出良好的線性。采用所建方法對市售16家生產企業43批次硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊樣品進行測定，獲得該制劑產品中各組分及有關物質的數據。結論 所建方法是在中國藥典方法基礎上優化并驗證適用于硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊C組分及有關物質的含量測定，方法簡便準確，專屬性強，穩定性好。由獲得的實驗數據可知，該復方制劑中C組分及有關物質的含量在各廠家間或同廠家不同批次間差異顯著，可能存在影響用藥安全的潛在隱患，建議在該劑型質量標準中增加相關質控項。

關鍵詞：慶大霉素C組分；有關物質；HPLC-ELSD法；復方制劑；硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊

中圖分類號：R92 文獻標志碼：A

HPLC-ELSD analysis of the components of gentamicin C and related substances in gentamicin sulfate and bismuth carbonate capsules

Cheng Hua1， Tang Rong1， Liu Liying1， and Chang Yan2

（1 Qinghai Provincial Institute of Drug Inspection and Testing/ Key Laboratory of Quality Control of Traditional Chinese Medicine （Tibetan Medicine）， State Drug Administration /Qinghai Provincial Key Laboratory of Modernization of Tibetan Medicine. Xining 810016;

2 National Institutes for Food and Drug Control， Beijing 102629）

Abstract" " Objective" " This study aimed to establish a quality control method for the contents of gentamicin C components and related substances in gentamycin sulfate and bismuth carbonate capsules. Methods" " HPLC-ELSD method was used. The column was GRACEApollo C18 （250 mm×4.6 mm， 5 μm）， the mobile phase was 0.2 mol/L trifluoroacetic acid solution： methanol （96：4， V/V）， the flow rate was 0.6 mL/min， the column temperature was 30 ℃， the injection volume was 20 μL， the Waters low-temperature diverging evaporative light scattering detector was used， carrier gas flow was 40 psi， and the drift tube temperature was 55 ℃. Results" The method was validated and performed well on the separation of gentamicin C components and other related substances. Good linearities were observed between the logarithmic values of each concentration and the corresponding chromatographic peak area for gentamicin， sisomicin and micronomicin with concentration ranges of 0.5～6 mg/mL， 25～100 μg/mL and 25～100 μg/mL， respectively. Samples of 43 batches of gentamicin sulfate and bismuth carbonate capsules from 16 companies on the market were tested using the method that had already been set up. This gave information about the ingredients and other substances in the preparation product. Conclusion" " The method was developed and optimized on the basis of Chinese Pharmacopeia with the strengths of convenience， specificity and robustness. It is validated for the determination of the content and related substances of gentamicin C components in gentamycin sulfate and bismuth carbonate capsules. The results showed significant differences in the content and related substances in the capsules from different manufacturers and batches， which indicated substantial risks for medication safety. Therefore， it was suggested that the method be considered in the quality control of such capsules.

Key words Gentamicin C components; Related substances; HPLC-ELSD; Compound preparation;" Gentamicin sulfate and bismuth carbonate capsules

硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊為復方制劑，臨床上主要用于慢性潰瘍性腸炎、痢疾和急性腸炎的治療，其前身為腸炎靈（以利福平、次硝酸鉍為主要原料）[1]，2002年處方變更為硫酸慶大霉素及堿式碳酸鉍，命名慶大霉素碳酸鉍膠囊，收載于《國家藥品標準化學藥品地方標準上升國家標準》第六冊[2]，2007年更名為硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊并沿用至今，主要不良反應為胃腸道癥狀以及耳毒性和腎毒性等，其中耳腎毒性主要源自處方中的硫酸慶大霉素[3-4]。截至目前，歷版《中國藥典》和各國藥典中均未收載過該品種，其現執行標準為國家食品藥品監督管理局國家藥品標準（WS-10001-（HD-0525）-2002-2007）[5] 。經國家藥品監督管理局網站查詢[6]本品現有批準文號27個，分別由27家生產企業持有，均為膠囊劑，其中26個批準文號的處方及規格為每粒含硫酸慶大霉素（以慶大霉素計）40 mg （4萬單位）和堿式碳酸鉍0.6 g，另有1個批準文號的處方及規格為每粒含利福平0.1125 g，次硝酸鉍0.151 g。

慶大霉素（Gentamicin，GM）是由小單孢菌屬（Micromonospora purpurea）發酵產生的一組結構相近的多組分氨基糖苷類抗生素[7-8]。根據其分子結構的差異，主要可分為C組：包括慶大霉素C1、C1a、C2、C2a和C2b等，和A/B組：包括A、A1～A4、B、B1和X2等[7，9]，同時，慶大霉素發酵產物中還發現有數十種結構已知或未知的微量組分[7]。慶大霉素各不同組分的抗菌活性和毒性存在明顯差別[7，10-11]。已有大量的文獻報道，不同國家、不同企業、不同批次的慶大霉素原料及其制劑中各組分的比例存在明顯差異[7，11]，這種差異被認為是慶大霉素臨床中出現嚴重毒副作用可能的原因之一[7-13]。但現行標準（WS-10001-（HD-0525）-2002-2007）中僅對其中慶大霉素的生物效價含量進行質控，并未對其中各有效組分和有關物質的（絕對或相對）含量進行質量控制，使得該品種在臨床用藥安全性和有效性上均可能存在風險。

為對硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊的質量進行更為全面有效的控制，本研究參照《中國藥典》2020年版二部硫酸慶大霉素和硫酸慶大霉素注射液質量標準[14]以及相關文獻[15-18]，建立了HPLC-ELSD法測定該復方制劑中慶大霉素C組分及其有關物質含量的方法，完成相關方法學驗證工作，并采用該方法對市售16家生產企業43批次樣品的C組分及其有關物質含量進行測定，獲得數據，在此基礎上展開討論。新建方法是在中國藥典方法基礎上優化并驗證適用于硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊，方法簡便準確，專屬性良好。

1 儀器與材料

1.1 藥品與試劑

慶大霉素標準品（批號：130326-201015，絕對含量：C114.7%，C1a15.3%，C2a8.5%，C218.5%；理論效價：C1739.61 u/mg、C1a 1286.98 u/mg、C2a 1079.52 u/mg、C21095.74 u/mg）；西索米星對照品（批號：130635-201301，含量56.0%）；小諾霉素標準品（批號：130342-201404，相當于563單位，含量51.8%），均購自中國食品藥品檢定研究院；三氟乙酸購自北京百靈科技有限公司；色譜級甲醇購自美國Merck公司。

1.2 儀器

Waters e2695型高效液相色譜儀（美國Waters公司）；XS105型精密電子天平（上海梅特勒有限公司）。

1.3 供試品

全部供試品來自2017年國家評價性抽驗，涵蓋16家生產企業，處方均為硫酸慶大霉素和堿式碳酸鉍的復方制劑，占全部26個批文比例的62%（16/26），全部樣品均在有效期內。廠家來源和批次數如下：A廠家2批次；B廠家4批次；C廠家3批次；D廠家2批次；E廠家3批次；F廠家3批次；G廠家3批次；H廠家3批次；I廠家3批次；J廠家4批次；K廠家3批次；L廠家2批次；M廠家3批次；N廠家3批次；O廠家1批次；P廠家1批次。

2 試驗方法

2.1 慶大霉素C組分和有關物質的測定方法

2.1.1 色譜條件

色譜柱：GRACEApollo C18柱（250 mm×4.6 mm， 5 μm）；流動相：0.2 mol/L三氟乙酸溶液-甲醇（96：4）;流速0.6 mL/min；檢測器：Waters低溫分流型蒸發光散射檢測器；柱溫30 ℃，進樣量20 μL，載氣（氮氣）流量40 psi，漂移管溫度55 ℃。

2.1.2 溶液的配制

系統適用性溶液：取慶大霉素標準品、小諾霉素標準品和西索米星對照品適量，精密稱定，加流動相溶解并定量稀釋制成每1 mL約含慶大霉素總C組分2.5 mg、小諾霉素0.1 mg和西索米星40 μg的溶液。

慶大霉素標準品溶液：精密稱取慶大霉素標準品12.48、24.97和48.94 mg，分別置25 mL容量瓶中、24.97、49.93和59.92 mg置10 mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋制成含硫酸慶大霉素0.50、1.00、1.96、2.50、4.99和5.99 mg/mL的溶液，作為標準品溶液。

小諾霉素標準品溶液：精密稱取小諾霉素標準品12.07、21.22、26.51、42.43和48.33 mg，分別置10 mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，再從各溶液中精密量取1 mL，分別置25 mL容量瓶中，加流動相稀釋制成含小諾霉素25.01、43.97、54.93、87.92和100.14 μg/mL的溶液，作為標準品溶液。

西索米星對照品溶液：精密稱取西索米星對照品11.18、19.62、24.52、39.25和44.65 mg，分別置10 mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，再從各溶液中精密量取1 mL，分別置25 mL容量瓶中，加流動相稀釋制成約含西索米星25.04、43.95、54.92、87.92、100.01 μg/mL的溶液，作為對照品溶液。

供試品溶液：取裝量差異項下的內容物，研磨混勻，精密稱取適量（約相當于慶大霉素125 mg），置于50 mL容量瓶，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，過濾。

專屬性溶液：取硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊內容物適量，置50 mL容量瓶中，分別經酸破壞（1.0 mol/L鹽酸30 min后，1.0 mol/L氫氧化鈉中和）、堿破壞（1.0 mol/L氫氧化鈉30 min后，1.0 mol/L鹽酸中和）、氧化破壞（10%H2O2密閉環境放置60 min）、高溫（80 ℃水浴中水浴1 h），光照破壞（254 nm紫外照射5 d）處理。

2.1.3 測定方法

精密量取“2.1.2”項下慶大霉素標準品溶液、小諾霉素標準品溶液和西索米星對照品溶液各20 μL注入液相色譜儀，以“2.1.1”項下的色譜條件測定，記錄色譜圖，計算標準品溶液各組分濃度對數值與相應峰面積對數值的線性回歸方程，相關系數（r）應不小于0.99；精密量取供試品溶液20 μL，用各組分的線性回歸方程分別計算供試品中對應組分的量（CtCx），并按公式（1）和公式（2）計算出各組分和有關物質的含量（%，u/u）。

組分計算公式：

式中Cx為慶大霉素各組分的含量（%，u/u），為由回歸方程計算出的各組分的含量（mg/mL），Vt為供試品溶液稀釋體積（mL），W為供試品稱重（g），標示量以u/mL計；慶大霉素4個組分（C1， C1a， C2a， C2）的理論效價分別為739.6、1287.0、1079.5和1095.7 u/mg。

有關物質計算公式：

[8]" " " " " " " "（2）

其含義：每一單位（u）慶大霉素活性物質中含有某雜質的質量（μg），量綱（單位）為μg/u。式中RtCx為由回歸方程計算出的每毫升供試品溶液中含某雜質的質量（mg）。其中西索米星和其他單個雜質由西索米星對照品線性回歸方程計算其含量；小諾霉素由小諾霉素標準品線性回歸方程計算其含量。V1為量取的供試品溶液的量（mL）；V2為供試品溶液稀釋體積（mL）；PLA為標示量u/mL；1000為換算系數，1 mg=1000 μg。

2.2 方法學驗證試驗

按《中國藥典》2020年版四部9101分析方法驗證指導原則[19]要求對所建HPLC-ELSD方法開展方法學驗證。

2.2.1 專屬性

（1） 各組分分離情況

取“2.1.2”項下系統適用性溶液20 μL，按“2.1.1”色譜條件分別進樣檢測并記錄色譜圖，與慶大霉素國家標準物質使用說明書中標準圖譜比較。

（2） 破壞性試驗

取“2.1.2”項下專屬性溶液，按“2.1.1”色譜條件分別進樣檢測并記錄色譜圖，考察供試品在酸、堿、氧化、高溫和紫外光照射條件下的降解情況，以及各破壞條件下雜質與主組分的分離情況。

2.2.2 準確度

取C企業樣品，分別精密稱取相當于標示量的80%，100%和120%的慶大霉素標準品3份，置于50 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，得到高中低3個濃度溶液，按“2.1.3”項下方法測定并計算慶大霉素各組分的回收率。

2.2.3 精密度

取同一批號硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊樣品分別稱取6份，制備并測定，記錄色譜圖，用上述慶大霉素各組分的線性回歸方程分別計算出供試品中對應組分的量（CtCx），并根據所得各組分的量（CtCx），按“2.1.3”計算出各組分的含量（%），計算RSD值。

2.2.4 檢測限和定量限

取西索米星和小諾霉素混合對照品溶液（50 μg/mL），分別加流動相逐級稀釋成系列稀釋溶液，按信噪比3：1對應的西索米星和小諾霉素的濃度為檢測限，按信噪比10：1對應的西索米星和小諾霉素的濃度為定量限。

2.2.5 線性

取“2.1.2”項下的慶大霉素標準品溶液、小諾霉素標準品溶液和西索米星對照品溶液，按“2.1”進行測定計算各組分濃度對數值與相應峰面積對數值的線性回歸方程。

3 結果與討論

3.1 方法學驗證結果

3.1.1 系統適應性試驗

結果表明系統適應性溶液色譜圖與慶大霉素國家標準物質使用說明書中標準圖譜一致，西索米星峰和慶大霉素C1a峰之間，慶大霉素C2峰、小諾霉素峰和慶大霉素C2a峰之間的分離度分別為3.0、6.2、4.8（圖1）；西索米星對照品溶液色譜圖中主成分峰峰高的信噪比為23.98，精密量取“2.1.2”項下小諾霉素標準品溶液20 μL，連續進樣5次，峰面積的RSD值為0.2%。

3.1.2 專屬性試驗

通過酸、堿、紫外光照射、氧化和高溫處理樣品后，各C組分峰面積均無明顯變化，各雜質峰與主峰之間都能有效分離，表明該方法專屬性良好，結果見圖2。

3.1.3 準確度

C1a、C2、C2a和C1的平均回收率為101.02%、100.84%、99.46%和99.70%，RSD分別為0.7%、0.8%、0.7%和0.7%，表明該方法回收率良好（表1）。

3.1.4 精密度

按“2.1.3”計算出各組分的含量（%），各C組分含量均值（RSD值，n=6）如下，C1a：36.02%（1.63%）；C2：33.90%（1.39%）；C2a：25.40%（1.23%）；C1：21.30%（1.39%）。

3.1.5 檢測限和定量限

西索米星檢測限和定量限分別為0.1和0.2 μg/mL，小諾霉素檢測限和定量限分別為0.1和0.8 μg/mL。

3.1.6 線性

（1）慶大霉素標準品溶液在0.5～6 mg/mL濃度范圍內，各組分濃度對數值與相應峰面積對數值呈良好線性關系，各組分（C1a、C2、C2a、C1）的回歸方程及相關系數如下：

YC1a =1.5586X+7.1655（r=0.9998）；

YC2=1.5449X+7.091（r=0.9998）；

YC2a=1.6107X+7.2412（r=0.9998）；

YC1=1.6656X+7.1020（r=0.9995）。

（2）西索米星和小諾霉素標準品溶液各自在25～100 μg/mL濃度范圍內，其濃度對數值與相應色譜峰面積對數值呈良好線性關系，西索米星、小諾霉素的線性回歸方程分別為

Y小諾霉素=1.2572X+6.7077（r=0.9978）；

Y西索米星=1.3651X+7.0671（r=0.9978）。

3.2 市售硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊的測定結果

3.2.1 慶大霉素C組分的測定結果

16家生產企業43批次市售硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊中慶大霉素C組分按標示量計算含量結果匯總詳見表2，各組分含量頻數分布詳見圖3。

3.2.2 有關物質的測定結果

16家生產企業43批次市售硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊中有關物質按標示量計算含量結果匯總詳見表3，各組分含量頻數分布詳見圖4。

3.3 討論

3.3.1 色譜條件的優化

蒸發光散射檢測器ELSD有低溫蒸發型和高溫蒸發型兩種。當采用低溫分流型檢測器計算25 μg/mL西索米星對照品溶液中西索米星色譜峰（tR =16 min）的信噪比，靈敏度（S/N=0.24），將濃度增至40 μg/mL時，靈敏度（S/N=27.01），靈敏度提高112倍。由于被分析物的濃度和體積質量等決定進入光散射池的氣溶膠中顆粒的直徑[20]，低溫型檢測器為了保證低溫時樣品溶液的蒸發[16]，對漂移管的樣品溶液進行了分流[16，20]，故降低了儀器的靈敏度[16]，因此使用低溫型檢測器在保持進樣體積不變時，提高西索米星濃度可提高靈敏度，能保證有關物質測定時結果的一致性。

3.3.2 市售硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊中慶大霉素C組分及其有關物質含量的總體情況

本研究利用建立的HPLC-ELSD方法共測定了來自全國16家生產企業的43批次市售硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊樣品。按生產企業來源分類，將全部43批次樣品中慶大霉素C組分和有關物質的含量分布范圍在圖5～6中進行展示。

選擇《中國藥典》2020年版二部硫酸慶大霉素注射液標準中慶大霉素C組分和有關物質項下限度要求作為質控限度。對于43批次市售樣品中慶大霉素C組分含量：僅有J企業的2個批次樣品C1（14.3%，15.1%）和4組分總含量（75.0%，79.1%）不符合規定，占比5%（2/43）。對于43批次市售樣品中有關物質含量：僅有J企業的3個批次樣品西索米星含量超標（4.5%，4.2%和4.2%），占比7%（3/43）；共計15個批次樣品小諾霉素含量超標，占比35%（15/43），其中A、B、I、K、M和N企業各1個批次，H、F和J企業各2、3和4個批次，不合格批次中小諾霉素含量在3.1%～5.1%之間；共計31個批次其他總雜質含量超標，占比72%（31/43），其中A、P企業各1個批次，G、H、K、L、M企業各2個批次，B、C、F、I、N企業各3個批次，J企業4個批次，不合格批次中其他總雜質含量在4.7%和13.8%之間；綜上，有關物質各質控項全部合格的批次僅為11批，占比26%（11/43）。全部43批次樣品中，僅有來自D、E、O企業的全部樣品（各2、3、1個批次）和A、G、H、K、M企業的部分樣品（各1個批次）中慶大霉素C組分和有關物質均符合規定要求，共計11個批次，占比26%（11/43）。

選擇文獻[8]中慶大霉素注射液有關物質限度建議（具體數值詳見表3）作為質控限度。43批次市售樣品中，僅有J企業的全部4個批次樣品有關物質含量超標，占比9%（4/43），其中，3個批次樣品西索米星含量超標（4.5%，4.2%和4.2%），占比7%（3/43）；1個批次樣品小諾霉素含量超標（5.1%），占比2%（1/43）；4個批次其他總雜質含量超標（13.8%，13.7%，9.4%和9.7%），占比9%（4/43），其他總雜質含量超過10%的2個批次樣品中慶大霉素C組分C1（14.3%，15.1%）和4組分總含量（75.0%79.1%）同時偏低均不符合《中國藥典》2020年版二部注射液標準中的限度規定。

無論采用何種限度規定，J企業的產品均涉及使用不合格硫酸慶大霉素原料投料生產復方制劑，該企業產品存在較大風險隱患。

3.3.3 對硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊的質控建議

硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊未被歷版《中國藥典》收載，目前執行國家藥品標準（WS-10001-（HD-0525）-2002-2007），該標準中僅采用抗生素微生物檢定法對產品的生物效價含量進行質控，并無慶大霉素C組分和有關物質檢查項。利用建立的HPLC-ELSD法對市售的43批次樣品進行測定，選擇《中國藥典》2020年版二部硫酸慶大霉素注射液標準中慶大霉素C組分和有關物質項下限度要求作為質控限度時，僅有11批樣品中慶大霉素C組分和有關物質含量均符合規定，占比僅為26%（11/43）。故建議對國家藥品標準（WS-10001-（HD-0525）-2002-2007）[5]進行修訂，增加慶大霉素C組分和有關物質檢查項，以此堵住標準漏洞，避免不合格的硫酸慶大霉素原料流向此類缺乏質控要求的復方制劑產品中。

4" " 結論

本文建立了測定硫酸慶大霉素碳酸鉍膠囊中慶大霉素C組分及有關物質含量的HPLC-ELSD方法，并采用該方法對市售16家生產企業43批次樣品進行測定。通過對市售樣品測定結果的分析可知，該復方制劑中組分和有關物質含量差異較大，特別是部分企業存在使用不合格原料投料生產的風險隱患，故此類產品標準中急需增加相關檢查項，從而對產品質量進行有效質控。在確保用藥有效性的前提下，對毒副雜質進行合理控制，在標準層面為人民臨床用藥安全性提供技術支撐。

參 考 文 獻

劉志科， 段晶， 鄭朝麗. 腸炎靈膠囊工藝條件及穩定性[J]. 中國藥學雜志， 1994， 29（11）： 670.

國家藥典委員會. 國家藥品標準化學藥品地方標準上升國家標準[S]. 第6冊： 84.

陳守平， 李巖， 梁帥. 慶大霉素的不良反應及合理用藥[J]. 中國實用醫藥， 2008， 3（8）： 74-75.

何鵬彬， 張培福， 普樺， 等. 503例慶大霉素不良反應分析[J]. 中國臨床藥學雜志， 2001， 10（2）： 114-116.

國家食品藥品監督管理局. 國家藥品標準： 化學藥品地方標準上升國家標準[S]. 第6冊. WS-10001-（HD-0525）-2002-2007.

國家藥品監督管理局數據查詢[DB/OL]. [2022-12-12]https： //www. nmpa. gov. cn/datasearch/search-result. html.

常艷， 姚尚辰， 胡昌勤. 《中國藥典》2015年版慶大霉素C組分限度修訂——從相對含量到絕對含量的飛躍[J]. 中國抗生素雜志， 2016， 41（1）： 1-15.

常艷， 姚尚辰， 胡昌勤. 對中國藥典2015年版硫酸慶大霉素原料及其注射液標準中存在問題的探討[J]. 中國抗生素雜志， 2018， 43（7）： 853-862.

劉英， 王立萍. 慶大霉素質量標準變遷對慶大霉素質量的影響[J]. 藥物分析雜志， 2014， 34（2）： 207-214.

劉英， 王立萍. 兩種方法測定硫酸慶大霉素組分和有關物質的比較[J]. 華西藥學雜志， 2014， 29（6）： 716-719.

宋漢敏， 劉英， 王立萍， 等. 硫酸慶大霉素原料及其制劑雜質譜分析[J]. 中國抗生素雜志， 2014， 39（7）： 513-519.

李少杰， 姚永青， 劉英， 等. 硫酸慶大霉素注射液質量評價[J]. 中國藥事， 2014， 28（11）： 1231-1240.

楊利紅， 李進， 胡昌勤." HPLC-ELSD法分析慶大霉素中小組分雜質[J]. 藥物分析雜志， 2014， 34（1）： 75-84.

國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[S]. （二部）. 北京： 中國科技醫藥出版社， 2020， 5： 1577-1579.

王立萍， 姚永青， 梅芊， 等. HPLC-ELSD法測定硫酸慶大霉素片的組分和有關物質[J]. 中國抗生素雜志， 2019， 44（5）： 558-562.

張建革， 劉英， 王立萍. HPLC-ELSD測定硫酸慶大霉素注射液含量及其有關物質的研究[J]. 華西藥學雜志， 2010， 25（1）： 80-82.

熊雯， 袁濤. HPLC-ELSD測定硫酸慶大霉素有關物質及其C組分質量標準改進[J]. 中國抗生素雜志， 2011， 36（10）： 775-777.

王立萍， 姚永青， 劉英. HPLC-ELSD法在硫酸慶大霉素及其制劑質量控制中的影響因素考察[J]. 中國抗生素雜志， 2020， 45（5）： 448-454.

國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[S]. （四部）. 北京： 中國科技醫藥出版社， 2020， 5： 480-483.

張悅晗， 甄漢深， 成莉. 蒸發光散射檢測器（ELSD）應用概況[J]." 中華中醫藥學刊，" 2007，" 25（4）：" 831-833.