酵母培養物替代魚粉對黃顙魚生長性能、血清生化、體成分、抗氧化及免疫力的影響

王欽，易建華，王輝，宋慶洋，敖慧玲，曹詩宜，別漢晴，張彥，覃先武，戴晉軍

（1.農業微生物資源發掘與利用全國重點實驗室，湖北宜昌 443003；2.湖北省酵母功能湖北省重點實驗室，湖北宜昌 443003）

魚粉是水產養殖中最重要的飼料蛋白質來源。然而，由于水產養殖的快速發展，魚粉的生產不能滿足對水產飼料的需求，導致飼料成本高，給水產養殖帶來了巨大挑戰。因此，尋找合適的新型替代物成為飼料工業當務之急。

酵母培養物是一種在特定工藝條件下，由酵母細胞、代謝產物和酵母經多級發酵形成的發酵培養基，其富含的有機酸、β- 葡聚糖和甘露聚糖，可提高水生動物的腸道消化酶活性及免疫力，進而促進機體生長（易建華等，2024）。目前，有關酵母培養物替代魚粉在水產飼料的應用研究，在凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）、大口黑鱸（Micropterus salmoides）、鯉魚（Carassius auratus gibelio）、鯽魚（Carassius auratus）、黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）和淡水蝦（Macrobrachium rosenbergii）均有報道（Zhang 等，2022；Xv 等，2021；Nguyen 等，2019；程鑫等，2019）。

黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）在我國被廣泛養殖，具有巨大的經濟和營養價值。黃顙魚是一種肉食性魚類，因此商業飼料中魚粉和動物蛋白的消費量相對較高。本文以酵母培養物為替代蛋白源1 ∶1 替代魚粉，評價其對黃顙魚生長性能、血清生化、體成分、抗氧化及免疫力的影響，為酵母培養物作為水產飼料替代蛋白質來源提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料 按照配方設計將飼料分為2 個組，以基礎飼料為對照組（CK），功能蛋白原料酵母培養物1 ∶1 替代基礎飼料中進口蒸汽魚粉為試驗組（LYF），飼料組成及營養水平見表1。其中，酵母培養物（CP 57%）由安琪酵母股份有限公司提供，經酵母蛋白等發酵酶解、調味工藝制得。將原料粉碎過80 目篩，經逐級混合制粒膨化成3.0 mm 粒徑的顆粒飼料，冷藏儲存備用。

表1 試驗飼料組成及營養水平（風干基礎） %

1.2 飼養管理 黃顙魚購自湖北省當陽市某養殖場，投喂對照組飼料暫養7 d 后，挑選大小均勻[（25.00±0.15）g]、健康活潑的試驗魚隨機分配到 6 個 2400 L 塑料養殖桶中，每桶100 尾。每種試驗飼料投喂3 桶試驗魚，禁食24 h 后采用人工飽食投喂上述CK 組、LYF 組飼料，每天2 次（08 ：00 ～09 ：00 和 17 ：00 ～18 ：00），養殖試驗持續42 d，每天記錄投喂量。整個試驗過程中，水溫（26.00±2.00）℃，溶解氧濃度（7.00±0.35）g/L，pH 6.50 ～6.70，氨氮＜0.01 mg/L，亞硝酸鹽＜0.50 mg/L，保持自然光照。試驗期間的日常管理及水質條件同暫養期間保持一致。

1.3 誘食試驗 投喂對照組飼料暫養7 d 后，挑選大小均勻[（9.00±0.05）g]、無病、體表無傷的黃顙魚66 尾，隨機放入6 個玻璃缸（0.8 m×0.6 m×0.3 m）中，每缸黃顙魚11 尾。在玻璃缸上方用細鐵絲懸掛2 個餌料球（質量為5.00 g，雙球間距20.00 cm，離桶底高度5.00 cm）用于黃顙魚對餌料球的啄咬，馴化期約為3 d（馴化至餌料球放入，黃顙魚馬上開始咬食為止）。

誘食試驗開始時，每個玻璃缸同時放入2 個餌料球（魚粉球/LYF 球，餌料球：魚粉/LYF、小麥面粉和水=27.0 g：73.0 g：54.0 g 混合而成），記錄放入時間，20 min 后取出，每次設3 個處理，記錄餌料球重量。每2 d 為1 個試驗周期，每天上午1 次，下午1 次，兩次試驗需要交換LYF 球和魚粉球的懸掛位置（避免餌料球位置干擾）。兩次試驗結束后，給試驗魚投喂商品顆粒飼料至飽食。試驗期間，保持對照組和試驗組每次試驗條件都一致。

1.4 樣品采集 攝食生長試驗結束后，所有試驗魚饑餓 24 h，經 120 mg/L MS-222 麻醉后進行稱重及計數。每桶隨機挑選 6 尾魚，用一次性注射器從尾靜脈中抽血，離心（5000 r/min，10 min，4℃）獲得血清，-80℃保存，用于血清生化指標、抗氧化酶活性及免疫指標檢測。取血后的 6 尾魚被解剖獲取肝臟和內臟，稱重并計算肝體比和內臟比。每組取6 條，用于全魚體成分分析。

1.5 生化分析 血清谷草轉氨酶（AST）、谷丙轉氨酶（ALT）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素（UREA）、葡萄糖（GLU）、總膽固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、堿性磷酸酶（ALP）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）、過氧化氫酶（CAT）、丙二醛（MDA）及溶菌酶（LZM）等生化指標均由宜昌市第一人民醫院測定，相關試劑盒均來源于南京建成生物工程研究所。

1.6 全魚體成分分析 參考 AOAC 標準方法，測定全魚樣品中粗蛋白質、粗脂肪、水分及灰分的含量。樣品于烘箱中 105℃至恒重，測定水分含量；碳化后的樣品置于馬弗爐中 600℃至恒重，測定灰分含量；蛋白質含量測定采用 FP-528 全自動蛋白質分析儀（Leco 公司，美國密歇根）；脂肪含量測定采用2055 全自動索氏抽提儀（Foss 公司，瑞典赫加奈斯）。

1.7 計算公式

1.7.1 相對誘食率 相對誘食率計算公式如下：

相對誘食率（RAR）/%=[W1-W2]/[W3-W4] ×100；

式中：W1為LYF 餌料球的初重；W2為LYF餌料球的末重；W3為魚粉餌料球的初重；W4為魚粉餌料球的末重。

1.7.2 生長性能 生長性能相關計算公式如下：

存活率（SR）/%=（Nt/ N0）×100 ；

增重率（WGR）/%=（Wt-W0）/W0×100 ；

特定生長率（SGR）/%=[（ln Wt-ln W0）/ t]×100；

飼料系數（FCR）=F /（Wt+ Wd-W0）；

肝體比（HSI）/%=（Wz/Wt）×100 ；

臟體比（VSI）/%=（Wv/Wt）×100 ；

肥滿度（CF）/%=（Wt/L3）×100。

式中：Nt為試驗末魚數量，尾；N0為魚初始數量，尾；Wt為試驗終末均體質量，g ；Wd為試驗期間死亡魚均體質量，g ；W0為試驗初始均體質量，g ；t 為試驗天數，d ；F 為總攝食量，g ；L為終末平均體長，cm ；Wz為試驗終末平均肝胰臟質量，g ；Wv為試驗終末平均內臟團質量，g。

1.8 統計分析 采用 Minitab 21.3.1.0 軟件對數據進行Tukey 檢驗，結果以“平均值± 標準誤”表示，P＜0.05 代表差異顯著。

2 結果與分析

2.1 酵母培養物對黃顙魚的誘食效果 由表2可知，與CK 組（100%）相比，酵母培養物（LYF 110.43%）對黃顙魚的相對誘食率要明顯高于魚粉，提高了10.43%。

表2 酵母培養物對黃顙魚相對誘食率的影響

2.2 酵母培養物替代魚粉對黃顙魚生長性能的影響 由表3 可知，酵母培養物替代魚粉能提高黃顙魚的增重率和特定生長率、降低飼料系數，對黃顙魚生長有一定的促進作用，但與CK 組相比，LYF 替代魚粉對黃顙魚生長沒有顯著影響（P＞0.05）

表3 酵母培養物替代魚粉對黃顙魚生長性能的影響

2.3 酵母培養物替代魚粉對黃顙魚全魚體成分的影響 由表4 可知，與CK 組相比，LYF 替代魚粉對黃顙魚全魚體成分無顯著影響（P＞0.05）。

表4 酵母培養物替代魚粉對黃顙魚全魚體成分的影響 %

2.4 酵母培養物替代魚粉對黃顙魚血清生化指標的影響 由表5 可知，與CK 組相比，LYF 組黃顙魚血清谷草轉氨酶顯著降低（P＜0.05），降低25.73%。其余各項指標兩組間均無顯著差異。

表5 酵母培養物替代魚粉對黃顙魚血清生化的影響

2.5 酵母培養物替代魚粉對黃顙魚血清抗氧化和免疫力的影響 由表6 可知，與CK 組相比，LYF 組黃顙魚丙二醛含量顯著降低（P＜0.05），降低71.80% ；LYF 組黃顙魚溶菌酶和堿性磷酸酶活性顯著提高（P＜0.05），分別提高61.22%和65.63% ；其余各項指標均兩組間無顯著差異。

表6 酵母培養物替代魚粉對黃顙魚血清抗氧化及免疫指標的影響

3 討論

3.1 酵母培養物對黃顙魚的誘食效果 酵母培養物含有的呈味核苷酸（鳥苷酸和肌苷酸）具有誘食劑的功能，可以作為良好的酵母類誘食劑（孫雪梅等，2017）。在本試驗條件下，酵母培養物顯著提高了黃顙魚的相對誘食（P＜0.05）。目前關于酵母培養物的誘食機理報道較少，其誘食作用可能是酵母培養物具有特有的味道和口感，如鳥苷酸和肌苷酸等呈味核苷酸，酵母培養物中的氨基酸、小肽和免疫多糖等成分也可刺激味覺和嗅覺感受系統而促進水產動物采食。

3.2 酵母培養物替代魚粉對黃顙魚生長性能的影響 本研究中，酵母培養物1 ∶1 替代魚粉能提高黃顙魚的增重率和特定生長率，降低飼料系數，對黃顙魚生長有一定的促進作用，但作用效果不顯著。Zhang 等（2018）在魚粉含量為100 g/kg 飼料中，以60 g/kg 酵母培養物（粗蛋白質含量67.7 %）替代60% 魚粉，對異育銀鯽生長性能沒有產生不利影響。Wang 等（2022）在魚粉含量為340 g/kg 的石斑魚飼料中，以40 g/kg 酵母培養物（粗蛋白質含量50.0 %）替代30 g/kg 魚粉，顯著提高了魚體增重率，降低了飼料系數。程鑫等（2019）研究表明，在飼料中添加酵母培養物（粗蛋白質含量55.0%）能有效提高黃顙魚增重率、蛋白沉積率，降低飼料系數。酵母培養物能改善水產動物的生長性能和飼料利用率，可能與其含有豐富的有機酸、γ- 氨基丁酸、呈味核苷酸等物質，能促進水產動物攝食（黃維，2024 ；侯冬強等，2023）有關。

3.3 酵母培養物替代魚粉對黃顙魚血清生化的影響 谷丙轉氨酶可以反映水產動物肝功能的健康狀態。本試驗中，在黃顙魚飼料中添加酵母培養物1 ∶1 替代魚粉可以顯著降低血清中谷丙轉氨酶活性，表明酵母培養物在一定程度上有利于減緩對肝臟的損傷，促進脂肪代謝，與王成強等（2022）在珍珠龍膽石斑魚的結果類似。

3.4 酵母培養物替代魚粉對黃顙魚血清抗氧化和免疫力的影響 丙二醛水平通常用于評估體內的過氧化程度，丙二醛具有強大的毒性，可損害細胞結構和功能（Parvez 等，2005）。在本研究中，酵母培養物組黃顙魚丙二醛含量顯著低于對照組（P＜0.05），表明酵母培養物替代魚粉提高了黃顙魚的抗氧化水平。溶菌酶、堿性磷酸酶等指標常用來表征水產動物的免疫力，在機體抵御外來病原的免疫反應中起重要作用（朱春華等，2012）。在本研究中，酵母培養物組黃顙魚溶菌酶和堿性磷酸酶活性顯著高于對照組（P＜0.05），表明酵母培養物替代魚粉提高了黃顙魚的免疫力。原因可能是酵母培養物含有大量源自酵母細胞壁的β- 葡聚糖和甘露寡糖，在許多研究中已在免疫促進作用方面得到驗證。Dou 等（2023）在飼料中補充β- 葡聚糖（4 ～8 g/kg）可提高羅非魚（Oreochromis niloticus）的抗氧化酶活性，并降低腸道和肝臟中丙二醛的含量。β- 葡聚糖可提高多數魚類的溶菌酶活性，如南亞野鯪（Misra 等，2006）、大黃魚（Ai 等，2007）、石斑魚（Bagni 等，2005）等。此外，Gu 等（2011）證實，β- 葡聚糖和甘露聚糖具有協同作用，能共同提高機體抗氧化能力及免疫力。

4 小結

綜上所述，酵母培養物1 ∶1 替代魚粉，不會影響黃顙魚的生長性能、肝臟健康、體成分，還能提高黃顙魚的抗氧化能力和免疫力。