豬偽狂犬病研究進展

摘要：豬偽狂犬病是由偽狂犬病病毒引起的豬的一種急性、高度接觸性傳染病，臨床癥狀以哺乳仔豬神經癥狀、成年豬繁殖障礙為主要特征。隨著豬養殖行業發展，該病已成為常見疫病，給養豬業帶來了巨大的經濟損失。文章闡述總結豬偽狂犬病最新研究進展，重點闡述豬偽狂犬病診斷和防控方法，以給科研領域和生產中提供參考。

關鍵詞：豬偽狂犬病;偽狂犬病病毒;病毒性傳染病;研究進展;防控;診斷

1 流行病學

多種動物均可感染偽狂犬病病毒（PRV），但豬是PRV的主要儲存宿主[1]。不同年齡階段的豬均可感染，對新生仔豬危害最大，其發病率、死亡率高達100%。成年豬感染后死亡率低，對繁殖能力有影響。豬感染PRV排毒期一般為3～6 d，時間長的可達17 d[2]。一年四季均可感染，大多發生在冬春季節[3]，呈散發或地方性流行?？赏ㄟ^直接接觸傳播，也可通過空氣中的飛沫、被病毒污染的飼料、飲用水等間接接觸傳播。豬可以通過呼吸系統、消化系統水平傳播，也可通過生殖系統垂直傳播[4]。懷孕母豬攜帶病毒通過胎盤將病毒傳播給胎兒，新生仔豬可通過乳汁感染病毒。豬感染PRV后可繼發細菌性或其他病毒性疾病，加速豬只死亡[5]。

2 臨床表現

不同日齡的豬感染豬PRV后臨床表現不同。仔豬感染后，主要表現為嘔吐、腹瀉等消化道癥狀，呼吸困難、喘等呼吸道癥狀，抽搐、四肢劃水、后肢麻痹、轉圈等神經癥狀。哺乳仔豬發病急，一般發病后 24～48 h內死亡，死亡率100%;斷奶仔豬發病率30%～40%，死亡率10%～20%。保育豬和育肥豬發病常出現呼吸道癥狀、生長緩慢，死亡率約為 1%～2%;后備母豬和空懷母豬發病后主要表現為不發情、返情、屢配不孕。妊娠母豬感染后出現流產、產死胎、弱胎和木乃伊胎，弱胎分娩后易在 1 周內死亡。公豬感染后表現為睪丸炎、睪丸腫脹、萎縮等，失去配種能力[6]。

3 診斷方法

豬偽狂犬病可通過流行病學調查、癥狀觀察、病理剖檢進行初步診斷，再通過實驗室方法進行確診。由于豬偽狂犬病與豬瘟等其他豬病在臨床上有相似癥狀，故在診斷時需以實驗室檢測結果為重要參考，避免出現誤診[7]。

3.1 病原檢測

適用于檢測死亡豬和剖檢豬病料、流產胎兒組織（如扁桃體、肺臟和腦組織等）、活豬扁桃體、血液、鼻拭子和公豬精液等。常用的病原學方法有聚合酶鏈式反應（PCR），包括普通 PCR 檢測、熒光定量 PCR 檢測和數字 PCR 檢測，該方法可快速、靈敏、準確檢測PRV，可同時檢測大批量樣品，給臨床診斷提供科學依據，給治療爭取最快時間，把損失和成本降至最低[8]。偽狂犬病診斷方法國標[9]中PCR檢測有gD基因檢測和gE基因檢測，該方法可鑒別區分野毒毒株和疫苗毒株，當被檢樣品和陽性對照擴增產物大小均為368 bp時可判定為PRV野毒陽性，如不出現該擴增產物但被檢樣品和陽性對照擴增產物大小均為217 bp時可判定為gE基因缺失疫苗毒株。農業農村部《種用動物健康標準》[10]中，豬偽狂犬病病原學檢測除上述方法外還用另一國標法，即偽狂犬病病毒熒光PCR檢測方法[11]，該方法也可快速靈敏檢測PRV核酸和PRV gE缺失株核酸。另外免疫熒光技術也是重要的PRV檢測方法。郎洪武等[12]首次將PRV抗體制備成熒光抗體，并通過高度免疫SPF豬后制備高免血清，采用硫酸銨鹽析法提純抗體后與異硫氰酸熒光素（FITC）結合制成熒光抗體診斷試劑。該方法可廣泛應用于豬偽狂犬病流行病學調查、病原學診斷等領域。2008年，BARTHA-K61、FA株PRV熒光抗體獲批農業部頒發的二類新獸藥證書。

3.2 抗體檢測

血清學技術包括中和試驗、乳膠凝集試驗和酶聯免疫吸附試驗等。其中酶聯免疫吸附試驗（ELISA）是實驗室常用方法，包括PRV抗體ELISA（PRV-ELISA）、PRV gB抗體ELISA（gB-ELISA）和PRV gE抗體ELISA（gE-ELISA）三種方法，均可大批量開展豬偽狂犬血清抗體檢測，gE-ELISA鑒別診斷方法可用于區分PRV gE基因缺失疫苗免疫和自然感染。近兩年，PRV gE蛋白阻斷ELISA抗體檢測試劑盒等ELISA診斷試劑經農業農村部批準，核發《新獸藥注冊證書》，具體情況詳見表1所示。2011年后，我國PRV發生變異，部分專家學者根據當地流行株研制出流行株抗體檢測方法。其中王寅彪[13]表達了豬PRV新流行株的 gE 蛋白和 gB 蛋白，建立間接和單抗阻斷 ELISA 來區分疫苗免疫抗體與野毒感染抗體，同時利用 gE 蛋白或 gB 蛋白高免血清 IgG 及特異性單抗酶標物建立雙抗體夾心 ELISA 并制備膠體金快速檢測試紙，能直觀便捷地進行野毒感染的檢測和疫苗質量評估。

4 防治

4.1加強飼養管理

定期對豬舍進行消毒、通風，保持豬舍的清潔、干燥，降低豬舍內病原含量;定期清理料槽內剩料，以免出現霉菌毒素中毒;蚊蠅季節加強滅蚊蠅工作;加強滅鼠工作，以免傳播病毒[14]。重視消毒工作，舍外豬場道路、排污溝、空地等定期進行大掃除，不留積糞、積尿、污水污物等，每周消毒 1 次;運動場每天清掃 2 次;舍內每天清掃豬舍，清洗食槽、水槽等用具，及時清除糞便和更換墊料，保持清潔和干燥，每天清掃 2次，每周消毒 2～3 次，豬舍空置期間徹底清洗所有用具，使用2～3種不同類型的消毒劑分別進行2～3次不同方法的消毒[15]。加強豬只日常保健，對轉群豬及產前產后母豬尤其要注意做好預防工作，可在飲水中添加電解多維，增強豬群免疫力和抗應激能力。做好生物安全管理。堅持自繁自養，或嚴格做好全進全出，封閉式飼養，轉豬前后對豬舍環境徹底清洗和消毒，做好養殖人員和器具消毒，注意消毒藥輪換使用，以免出現耐藥。加強日常巡視，有臨床癥狀豬只及時診斷、及時隔離淘汰。加強日常采樣檢測，減少隱性感染豬只在豬群中的散毒風險。

4.2做好疫苗免疫

疫苗免疫是預防豬偽狂犬病的重要方法，可免疫滅活疫苗、弱毒活疫苗和偽狂犬病毒活載體疫苗等。近兩年獲批《新獸藥注冊證書》的豬偽狂犬病疫苗如表2所示。根據山東省地方標準，豬偽狂犬病推薦免疫程序為：種公豬每隔 4 個月免疫一次;母豬每次配種前免疫一次，產前 30 天進行二免;仔豬斷奶前后至60 日齡之間進行首免，30 天后進行二免[15]。生產上國內常用基因缺失苗即gE 基因缺失苗給豬群免疫，原理為剔除PRV gE 基因后，該病毒毒力減弱，但保留了PRV的正常擴增和免疫原性，因此免疫gE 基因缺失苗后，再通過gE-ELISA 抗體檢測即可鑒定是否為野毒株感染[16]。

20世紀90年代我國從國外引進經典豬偽狂犬弱毒苗 Bartha-K61 株，經過臨床推廣和應用，我國豬偽狂犬病疫情得到有效控制。但2011年我國多個地區多個豬場再次流行豬偽狂犬疫情，即使免疫過gE 基因缺失苗的豬場依然出現大批量的母豬產弱仔、死胎、流產，仔豬出現神經癥狀且病死率高達100%，給養豬業造成巨大經濟損失，研究發現此次流行毒株發生變異[17]。部分專家學者根據流行毒株研制新型疫苗。其中，侯承堯[18]將改造后的PRV弱毒株作為載體，以豬繁殖與呼吸綜合征病毒主要抗原基因為外源基因構建重組毒株，試驗表明豬免疫后可產生較高抗體，對豬只提供一定保護力。楊雁婷[19]研制出一種PRV活載體疫苗，將其他豬病病毒基因重組到PRV，制備成PRV活載體疫苗，該重組病毒可誘導被免疫豬產生相應抗體，在預防豬偽狂犬病的同時具有免疫其他病原的能力，大大提高免疫效率。

4.3 凈化

凈化，即有計劃地在特定區域或場所對特定動物疫病，通過免疫、監測、檢疫、隔離、消毒、淘汰、撲殺、無害化處理等一系列技術和管理措施，消滅和清除病原，最終達到并維持在該范圍內動物個體不發病和無感染狀態的過程[20]。有研究表明，野毒感染普查檢測-強化免疫-檢測和淘汰-監測認證-持續凈化的方案較為有效[21]?？刹扇∫韵聟⒖挤桨高M行：首先，對豬群普查采樣檢測抗體，可根據豬只數量全部采樣或抽樣檢測。其次，根據豬群感染陽性率高低，制定不同的凈化方案，凈化后繁殖豬群gE野毒抗體連續 2 次抽檢結果均為陰性，且偽狂犬gB免疫抗體合格率≥80%，則判定該豬群為凈化豬群，否則繼續凈化。最后，凈化維持，后備豬在入群前全部檢測，確保gE野毒抗體陰性和偽狂犬疫苗免疫抗體水平合格;種公豬每季度全群采血檢測，確保gE野毒抗體陰性和偽狂犬疫苗免疫抗體水平合格[22]。根據山東省省級動物疫病凈化場評估技術規范（2024版），我省省級種豬場、規模豬場和公豬站的豬偽狂犬病凈化場評估需滿足表3中豬偽狂犬病抗體檢測標準。

5 討論

豬偽狂犬病毒在我國普遍存在，為養豬業重要的傳染病之一[23]，是我國三類動物疫病。PRV能引起羊、兔、駱駝、狐貍等多種家畜和野生動物發病，呈世界性分布。豬感染后，日齡不同，癥狀表現也存在差異，成年豬多呈隱性感染，無明顯癥狀排毒帶毒成為傳染源;妊娠母豬感染后流產、產死胎、木乃伊胎;公豬不育、生殖障礙;新生仔豬嘔吐、發熱，有劃水狀、共濟失調等神經癥狀，可導致大量死亡;育肥豬呼吸困難、生長緩慢。健康豬只一旦感染病毒很難除凈，存在排毒、傳播病毒風險，引起其他健康豬只感染發病，給畜牧業造成巨大經濟損失。另外，我國有PRV引起人眼內炎和腦炎感染病例報道[24-25]，也有疑似在豬偽狂犬陽性豬場感染人的報道[26]，給人類安全造成一定威脅，因此豬偽狂犬病防控對于養殖業發展和人類健康有重要意義。

感染期、隱性感染期和潛伏期豬是主要傳染源，由于育肥豬和成年豬感染PRV后病死率不高，有一定的自愈能力，因此感染豬只長期排毒導致豬群出現持續感染現象。豬感染PRV后終生帶毒，又因PRV可垂直傳播，對豬群健康造成嚴重威脅，因此凈化法是最有效根除PRV方法。檢測凈化時，該病的防控優勢在于基因缺失苗的使用與相應檢測方法的建立方便區分野毒感染與疫苗免疫，從最初自然缺失 gE 基因的 Bartha 株到 gE/TK 基因雙缺失、gG/TK 基因雙缺失等疫苗株的出現，相繼研制出相對應的鑒別診斷方法。有效的免疫疫苗和正確的免疫程序可大大降低豬偽狂犬病暴發風險，除平時常規預防免疫外，當養豬場中有豬只出現PRV感染，還應立即給其余豬只注射豬狂犬病滅活苗進行免疫，并在注射時注意更換針頭，避免引發其他病毒和細菌的繼發感染[27]?！?/p>

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