溫州地區獻血者梅毒螺旋體抗體檢測及召回分析

楊杰 張鋒 吳婭婭 陳曉燕 林楊楊

[摘要]?目的?通過溫州地區無償獻血者梅毒螺旋體抗體檢測，對酶聯免疫吸附試驗（enzyme-linked?immunosorbent?assay，ELISA）單試劑反應性獻血者開展召回自檢及召回檢測，評估召回方案的可行性。方法?2021年1月至2023年5月成功參與無償獻血的獻血者275?652名，經抗梅毒螺旋體（treponema?pallidum，TP）ELISA雙試劑檢測，對不同試劑檢測反應性率、S/CO值等指標進行比較，同時選取ELISA檢測單試劑反應性，且距上次獻血屏蔽間隔6個月以上自愿參與召回的獻血者24名，以面談的方式進行召回告知，進行針對性的健康征詢、一般檢查和初篩檢測合格后，采集血樣進行召回自檢和召回檢測。結果?抗TP?ELISA試驗共檢測275?652名，檢出反應性數627例，反應性率為0.23%，其中雙試劑反應性率為0.12%，單試劑反應性率為0.11%；雙試劑反應性S/CO≥5.00占比73.6%（240/326），單試劑反應性S/CO<5.00占比92.4%（278/301）；進入召回流程24名，成功召回20名，3名召回自檢不合格，1人召回檢測不合格，召回成功率83.3%（20/24）。結論?采供血機構抗TP?ELISA檢測單試劑假反應性問題突出，通過建立的召回方案對召回意愿強烈的獻血者進行召回自檢和召回檢測，既能保證獻血者安全和血液質量，又能提升采供血服務體系建設水平。

[關鍵詞]?獻血者；梅毒；召回流程；假反應性

[中圖分類號]?R33??????[文獻標識碼]?A??????[DOI]?10.3969/j.issn.1673-9701.2024.17.007

Detection?and?recall?analysis?of?treponema?pallidum?antibody?in?blood?donors?in?Wenzhou?area

YANG?Jie，?ZHANG?Feng，?WU?Yaya，?CHEN?Xiaoyan，?LIN?Yangyang

Wenzhou?Key?Laboratory?of?Blood?Transfusion?Medicine，?Wenzhou?Central?Blood?Bank，?Wenzhou?325000，?Zhejiang，?China

[Abstract]?Objective?Through?the?detection?of?treponema?pallida?antibody?in?the?unpaid?blood?donors?in?Wenzhou?area，?the?recall?self-test?and?recall?test?were?carried?out?on?the?blood?donors?who?were?reactive?to?enzyme-linked?immunosorbent?assay?（ELISA）?test，?and?the?feasibility?of?the?recall?plan?was?evaluated.?Methods?From?January?2021?to?May?2023，?275?652?blood?donors?who?successfully?participated?in?unpaid?blood?donation?were?tested?by?anti-treponema?pallidum?（TP）?ELISA，?the?reactivity?rate?and?S/CO?value?of?different?reagents?were?compared，?and?the?reactivity?of?single?reagent?was?detected?by?ELISA.?In?addition，?24?blood?donors?who?volunteered?to?participate?in?the?recall?more?than?six?months?after?the?last?blood?donation?screening?were?informed?of?the?recall?by?way?of?interview，?targeted?health?consultation，?general?examination?and?preliminary?screening?test?were?passed，?and?blood?samples?were?collected?for?recall?self-test?and?recall?test.?Results?A?total?of?275?652?people?were?tested?by?anti-TP?ELISA，?and?627?cases?were?found?to?be?reactive，?with?a?reactivity?rate?of?0.23%，?including?a?double?reagent?reactivity?rate?of?0.12%?and?a?single?reagent?reactivity?rate?of?0.11%.?The?ratio?of?S/CO≥5.00?with?double?reagent?was?73.6%?（240/326），?and?the?ratio?of?S/CO<5.00?with?single?reagent?was?92.4%?（278/301）.?24?people?entered?the?recall?process，?20?people?were?successfully?recalled，?3?people?failed?to?pass?the?self-test?and?1?person?failed?to?pass?the?test.?The?recall?success?rate?was?83.3%?（20/24）.?Conclusion?The?problem?of?false?reactivity?of?anti-TP?ELISA?test?single?reagent?in?blood?collection?and?supply?institutions?is?prominent.?Through?the?established?recall?scheme，?the?self-test?and?recall?test?of?blood?donors?with?strong?recall?intention?can?not?only?ensure?the?safety?of?blood?donors，?but?also?improve?the?construction?of?blood?collection?and?supply?service?system.

[Key?words]?Blood?donor;?Syphilis;?Recall?process;?False?reaction

梅毒是梅毒螺旋體（treponema?pallidum，TP）感染引起的慢性傳染性疾病，主要通過性傳播，而輸注血液制品亦是其重要的傳播途徑[1]。近年來，梅毒新發病例呈明顯上升趨勢，全國法定傳染病疫情數據顯示梅毒發病數達497?934例，位居乙類傳染病第3位，防控任務艱巨[2]。采供血機構血液篩查策略為使用兩種不同廠家試劑對獻血人群進行梅毒螺旋體抗體檢測，同時設置灰區，任一試劑呈反應性或灰區反應性均判定抗TP不合格，獻血者永久屏蔽。該項措施雖一定程度降低了梅毒經血傳播的風險，同時也因假反應問題增加血液報廢率，造成不必要的血液浪費和獻血者流失。因此，對該部分獻血者制定召回檢測方案，評估獻血者是否可回歸獻血隊伍，是亟待解決的問題。

1??對象與方法

1.1??儀器與試劑

全自動加樣儀（瑞士?Tecan公司）、全自動酶免分析處理系統（瑞士?Hamilton公司）、酶標儀（瑞士Sunrise公司）、化學發光免疫分析儀（美國羅氏公司）。梅毒螺旋體抗體酶聯免疫吸附試驗（enzyme-?linked?immunosorbent?assay，ELISA）檢測試劑：試劑1（北京萬泰公司），試劑2（廈門英科新創公司）；梅毒螺旋體抗體ECLIA檢測試劑（美國羅氏公司）。

1.2??對象與留樣

2021年1月至2023年5月成功參與無償獻血的獻血者275?652名，經抗TP?ELISA雙試劑檢測，選取抗TP?ELISA檢測單試劑反應性，且距上次獻血屏蔽間隔6個月以上，自愿參與召回的獻血者24名，以面談的方式進行召回告知，并在知情同意書上簽名。進行針對性的健康征詢、一般檢查和初篩檢測合格后，采集EDTA-k2抗凝靜脈血樣兩支用于召回自檢和召回檢測。

1.3??召回方案

1.3.1??召回自檢??召回的獻血者標本先經兩個不同廠家抗TP?ELISA試劑（試劑1、試劑2）自檢檢測，ELISA雙試劑檢測無反應性，進一步進行召回檢測；雙試劑反應性或灰區反應性，自檢檢測不合格，獻血者永久屏蔽；單試劑反應性或灰區反應性，采用反應性試劑進行雙孔復試，任一孔反應性或灰區反應性判定自檢檢測不合格，獻血者永久屏蔽，復試結果無反應性者進行召回檢測。

1.3.2??召回檢測??經召回自檢檢測合格的標本，進一步進行抗TP電化學發光免疫分析（electrochemiluminescence?immunoassay，ECLIA）試驗、梅毒螺旋體明膠凝集試驗（treponema?pallidum?particle?assay，TPPA）梅毒確證試驗檢測。抗TP?ECLIA試驗無反應性、TPPA梅毒確證試驗無反應性，獻血者可允許召回；TPPA梅毒確證試驗陽性，或抗TP?ECLIA試驗反應性、TPPA梅毒確證試驗保留，獻血者永久屏蔽；抗TP?ECLIA試驗反應性，TPPA確證試驗無反應性或抗TP?ECLIA試驗無反應性、TPPA梅毒確證試驗保留，獻血者6個月后再次進行第二輪召回，第二輪召回檢測出現抗TP?ECLIA試驗無反應性、TPPA梅毒確證試驗無反應性，獻血者可允許召回，否則永久屏蔽。

2??結果

2.1??無償獻血者抗TP?ELISA試驗結果

2021年1月至2023年5月抗TP?ELISA共檢測275652例，檢出反應性數627例（0.23%），其中雙試劑反應性326例（0.12%），單試劑反應性301例（0.11%），試劑1單試劑反應性199例，試劑2單試劑反應性102例，抗TP?ELISA試驗結果見表1。

2.2??抗TP?ELISA反應性結果S/CO值比較

其中雙試劑反應性共326份，S/CO值位于0.85～0.99區間4份，S/CO值均位于1.00～4.99區間42份，S/CO值均≥5.00有240份，剩余40份雙試劑反應結果中，試劑1?S/CO值位于0.99～4.99區間且試劑2?S/CO值位于0.85～0.99區間3份，試劑1?S/CO值位于0.99～4.99區間且試劑2?S/CO值≥5.00有8份，試劑1?S/CO值≥5.00且試劑2?S/CO值位于0.85～0.99區間2份，試劑1?S/CO值≥5.00且試劑2?S/CO值位于1.00～4.99區間27份。見表2。

2.3??召回對象召回前抗TP?ELISA檢測情況

2021年1月至2023年5月期間因抗TP?ELISA檢測單試劑反應性被屏蔽獻血者要求進行召回，召回對象24名中，6名抗TP?ELISA檢測S/CO值位于0.85～0.99區間，16名抗TP?ELISA檢測S/CO值位于0.99～4.99區間，2名抗TP?ELISA檢測S/CO值≥5.00，召回前抗TP?ELISA檢測單試劑反應性情況見表3。

2.4??召回對象檢測結果

24名獻血者經健康征詢、一般檢查和初篩檢測合格后進入召回流程，其中20名獻血者經召回自檢抗TP?ELISA試驗合格、召回檢測抗TP?ECLIA檢測合格、TPPA確證檢測合格而成功召回。1名獻血者召回自檢抗TP?ELISA檢測合格、抗TP?ECLIA試驗反應性、TPPA確證試驗無反應性，該獻血者暫緩屏蔽6個月后進入下一輪召回流程后經檢測抗TP?ECLIA試驗仍為反應性，永久屏蔽。3名獻血者召回自檢抗TP?ELISA檢測結果反應性，其中2名抗TP?ELISA檢測雙試劑反應性，1名抗TP?ELISA檢測單試劑反應性，最終3名均永久屏蔽。

3?討論

梅毒主要通過性接觸傳播，但輸注血液制品亦是其重要的傳播途徑之一，因此對獻血者進行梅毒螺旋體抗體檢測仍是采供血機構血液傳染病檢測必檢項目。溫州市無償獻血者抗TP?ELISA結果反應性率為0.23%，單試劑反應性率為0.11%，雙試劑反應性率為0.12%，低于相關報道數據，如山東臨沂地區抗TP?ELISA結果反應性率為0.38%，單試劑反應性率為0.18%，雙試劑反應性率為0.19%；廣州地區抗TP?ELISA結果反應性率為0.86%，單試劑反應性率為0.51%，雙試劑反應性率為0.35%；河北承德地區抗TP?ELISA結果反應性率為0.37%，單試劑反應性率為0.12%，雙試劑反應性率為0.25%[2-4]。各地區抗TP?ELISA反應性數據存在較大差異，主要原因可能為：①獻血人群梅毒感染率存在省份、地區間的差異；②所采用的梅毒試劑廠家不同，不同試劑廠家在檢測反應性率上存在差異；③各個省市采供血機構在抗TP?ELISA檢測的灰區設置方式上存在差異，部分機構設置85%?Cutoff值做為灰區下限，部分機構設置60%?Cutoff值做為灰區下限，也有部分采供血機構不設灰區，灰區設置的不同也造成檢測反應性率的差異。這些觀察說明每年因抗TP?ELISA假反應性被淘汰、無緣再次獻血的獻血者大量存在，迫切需要建立一套因抗TP?ELISA假反應性被淘汰獻血者重新回歸獻血隊伍的召回方案。

抗TP?ELISA單試劑反應性，即試劑1單試劑反應性和試劑2單試劑反應性結果大多S/CO值為低值陽性，S/CO<5.00以下，占比92.4%（278/301）；雙試劑反應性大多數S/CO值為高值陽性，即S/CO≥5.00，占比73.6%（240/326）。因此，單試劑反應性可能是導致高假反應性的主要原因。為此，本研究選擇抗TP?ELISA單試劑反應性獻血者作為召回對象，采取召回檢測評估可解決獻血者獻血意愿與血液安全之間的矛盾。傅立強等[5]的研究也認為，抗TP?ELISA試驗S/CO值高低與TPPA確認反應性密切相關，如TPPA確證無反應性，則抗TP?ELISA試驗對應的S/CO值較低；TPPA確證反應性，則抗TP?ELISA試驗對應的S/CO值較高[5]。

我國采供血機構采用雙試劑抗TP?ELISA試驗檢測梅毒感染標志物，為了提高試劑檢測靈敏度，降低漏檢率，普遍設置灰區而忽略假反應性問題，而假反應性將合格獻血者淘汰外也給獻血者家庭帶來矛盾糾紛[6]。因此如何制定召回策略，做好風險評估尤為重要。歸隊指引的召回策略研究，結合本地區實際情況，制訂溫州地區獻血者召回方案及檢測策略：單試劑反應性且屏蔽6個月以上，獻血者本人召回意愿強烈，經健康征詢、一般檢查合格采集樣本，經抗TP?ELISA試驗自檢、抗TP?ECLIA試驗和TPPA確證試驗，即抗TP?ELISA試驗結果呈雙試劑無反應性，抗TP?ECLIA無反應性、TPPA確證無反應性，則獻血者允許召回[7-13]。

24名單試劑反應性獻血者，經過6個月或以上時間屏蔽后，自檢檢測中抗TP?ELISA試驗雙試劑無反應性占比87.5%（21/24），3名獻血者召回自檢抗TP?ELISA檢測結果反應性，經抗TP?ECLIA檢測、TPPA確證試驗，2名抗TP?ELISA檢測雙試劑反應性且TPPA確證試驗反應性，1名抗TP?ELISA檢測單試劑反應性TPPA確證試驗無反應性。實踐證明大部分因抗TP?ELISA單試劑反應性被屏蔽的獻血者實際為合格的獻血者，抗TP?ELISA檢測單試劑反應性或者灰區反應性獻血者在追蹤檢測中大部分抗TP?ELISA檢測會呈無反應性，主要因為ELISA法檢測梅毒螺旋體抗體容易受年齡、疾病、血脂等影響出現假反應性，非特異性反應隨著機體狀態的改變而發生變化。在召回檢測中24名獻血者經抗TP?ECLIA試驗和TPPA確證試驗檢測，20名成功召回，其中1名因抗TP?ECLIA試驗反應性后，進入下一輪召回檢驗時抗TP?ECLIA試驗結果仍為反應性而永久屏蔽。通過建立的召回策略本次研究召回成功率為83.3%（20/24），召回方案及檢測策略的制訂，充分評估了獻血者安全的前提下增加了合格獻血者回歸的可能，使獻血者權益得到有效保障，也提升了采供血機構的服務能力。

綜上所述，采供血機構抗TP?ELISA檢測假反應性問題突出，不僅造成血液浪費，同時也使獻血者身心和名譽受到傷害。通過建立一套召回方案對召回意愿強烈的獻血者，按照召回策略進行健康征詢、一般檢查、召回自檢、召回檢測，充分評估獻血者安全后給予解除屏蔽，一定程度上解決了血液檢測假反應問題，保證血液質量安全，同時也使優質、高效的采供血服務體系構建更為完善。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

[參考文獻]

[1] TUCKER?J?D，?CHEN?X?S，?PEELING?R?W.?Syphilis?and?social?upheava1?in?China[J].?N?Engl?J?Med，?2010，?362（18）：?1658–1661．

[2] 耿貴華，?朱加強，?趙高偉，?等.?2012-2015年臨沂地區無償獻血人群梅毒篩查、確認結果分析及回訪研究[J].?山東醫學高等專科學校學報，?2016，?38（2）：?129–133．

[3] 陳錦艷，?黎世杰，?何博，?等.?廣州地區無償獻血者傳染性標志物檢測結果分析[J].?右江民族醫學院學報，?2015，?37（3）：?486–489．

[4] 周靜江，?劉明麗.?血清學聯合核酸檢測在承德市無償獻血者血液篩查中的應用研究[J].?河北醫藥，?2021，?43（24）：?3817–3820．

[5] 傅立強，?童海明，?桑列勇.?ELISA法檢測梅毒抗體反應性強度與TPPA確證陽性、抗體效價的相關性研究[J].?中國衛生檢驗雜志，?2011，?21（5）：?1215–1216．

[6] 劉宇寧，?蔡菊英，?劉曉音.?血液篩查HBsAg、抗-HCV假陽性獻血者歸隊的調查分析[J].?中國輸血雜志，?2012，?25（3）：?260–262．

[7] 郭永健，?姚鳳蘭，?林授，?等.?HIV-1和HCV核酸檢測、血液處置和獻血者屏蔽與歸隊指引（上）[J].?中國輸血雜志，?2011，?24（1）：?79–84．

[8] 葛紅衛，?林授，?汪德海，?等.?HIV-1和HCV核酸檢測、?血液處置和獻血者屏蔽與歸隊指引（下）[J].?中國輸血雜志，?2011，?24（2）：?172–176．

[9] 呂蓉，?李素萍，?蔣菲菲，?等.?安徽省采供血系統ELISA單試劑檢測呈反應性獻血者重新召回的檢測結果分析[J].?中國輸血雜志，?2018，?31（4）：?405–409．

[10] 王東，?臧亮，?陳輝，?等.?梅毒螺旋體抗體單試劑反應性獻血者歸隊策略研究[J].?中國輸血雜志，?2018，?31（10）：?1177–1180．

[11] 徐利強，?李建華，?王日春，?等.?嘉興市梅毒反應性獻血者歸隊的可行性研究[J].?中國輸血雜志，?2017，?30（5）：?528–530．

[12] 程玉根，?梁啟忠，?費海燕.?單試劑陽性獻血者屏蔽與歸隊的可行性分析[J].?中國輸血雜志，?2017，?30（12）：?1376–1378．

[13] 楊轉笑，?肖慧芬，?肖忠，?等.?深圳地區HBV核酸檢測反應性獻血者兩種歸隊模式風險評估研究[J].?中國衛生質量管理，?2020，?27（3）：?111–113．

（收稿日期：2023–11–14）

（修回日期：2024–02–18）

Informatics?and?Health征稿啟事

Informatics?and?Health（《信息學與健康》）是由中國醫學科學院北京協和醫學院主辦，中國醫學科學院醫學信息研究所與科愛公司合作編輯出版，旨在反映醫學衛生健康領域與信息科學技術相關的前沿學術研究進展的英文期刊（ISSN：2949-9534），本刊由中國工程院院士、中國醫學科學院北京協和醫學院院校長王辰教授擔任主編，中國醫學科學院醫學信息研究所所長劉輝研究員擔任執行主編。

期刊將持續組織聚焦前沿的研究專題，誠邀國內外專家學者共同參與選題策劃、開設相關研究專題和賜稿，編委會和編輯部將竭誠為您做好同行評議、編輯出版、成果推介等工作。期刊收稿范圍包括但不限于以下研究領域的內容：健康研究中的創新性信息學方法、臨床前期基礎科學研究中的數字化轉型、臨床決策支持和衛生保健應用中的多源信息分析、公共健康與環境健康中的信息學實踐、科學智能在衛生保健領域的應用、人口健康與信息學相關的經濟與社會決定因素。

本刊的收稿類型以原創性研究論文和綜述文章為主，所有收稿將經過嚴格的同行評議后決定是否錄用，錄用后即安排單篇上線（online?first），2024—2025年免收文章出版費。投稿系統地址：www.editorialmanager.com/infoh/default2.aspx，電子郵箱：info_health@imicams.ac.cn，inforhealth@163.com，聯系電話：010-52328735。