血清ADAM12聯(lián)合SP70檢測(cè)對(duì)乳腺癌患者新輔助化療效果評(píng)估研究進(jìn)展

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【摘要】? 乳腺癌是女性常見(jiàn)惡性腫瘤之一，針對(duì)不同分子分型的乳腺癌患者，新輔助化療已成為常規(guī)治療策略之一。然而，準(zhǔn)確評(píng)估新輔助化療的療效對(duì)于指導(dǎo)治療方案的調(diào)整和預(yù)后預(yù)測(cè)至關(guān)重要。去整合素-金屬蛋白酶12（ADAM12）、腫瘤特異性蛋白70（SP70）作為乳腺癌相關(guān)蛋白，可用于療效評(píng)估。綜述血清ADAM12聯(lián)合SP70檢測(cè)對(duì)乳腺癌患者新輔助化療效果評(píng)估的研究進(jìn)展，包括ADAM12和SP70的生物學(xué)功能、血清檢測(cè)方法以及其在乳腺癌新輔助化療療效評(píng)估中的應(yīng)用情況，評(píng)估指標(biāo)的潛在應(yīng)用價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】? 乳腺癌；新輔助化療；去整合素-金屬蛋白酶12；腫瘤特異性蛋白70；療效評(píng)估

中圖分類號(hào)? R737.9? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼? A? ? 文章編號(hào)? 1671-0223（2024）13--03

乳腺癌是全球女性常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和死亡率逐年增加。乳腺癌的治療策略不斷進(jìn)化，新輔助化療已成為一種被廣泛接受的治療方法[1]。新輔助化療指在手術(shù)前給予化療藥物來(lái)縮小腫瘤體積、減少淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和改善手術(shù)可行性。然而，乳腺癌患者對(duì)新輔助化療的反應(yīng)存在很大的個(gè)體差異，有些患者在療程結(jié)束后可完全消失，而另一些患者則表現(xiàn)出耐藥或僅僅有部分縮小[2]。準(zhǔn)確評(píng)估新輔助化療的療效對(duì)于確定該患者的治療方案和預(yù)測(cè)預(yù)后非常重要[3]。然而，現(xiàn)有的評(píng)估方法如腫瘤體積測(cè)量、臨床病理反應(yīng)評(píng)估存在一定的局限性。因此，尋找更準(zhǔn)確和可靠的生物標(biāo)志物來(lái)評(píng)估新輔助化療療效具有重要意義。去整合素-金屬蛋白酶12（ADAM12）、腫瘤特異性蛋白70（SP70）是乳腺癌患者中被廣泛研究的蛋白，其中ADAM12作為一種在腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中參與調(diào)控的蛋白，已被證明與乳腺癌的進(jìn)展和預(yù)后相關(guān)[4]。SP70作為一種熱休克蛋白，具有細(xì)胞保護(hù)和應(yīng)激響應(yīng)的功能，也在乳腺癌中顯示出重要作用。因此，將ADAM12和SP70作為潛在的療效評(píng)估指標(biāo)，有助于更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)新輔助化療的療效。

1? ADAM12和SP70的生物學(xué)功能

1.1? ADAM12在乳腺癌中的生物學(xué)功能

ADAM12具有蛋白酶活性，能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)的成分，如膠原蛋白和纖維蛋白等，這種降解作用在乳腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中起到重要的作用[5]。ADAM12參與調(diào)節(jié)細(xì)胞間的黏附和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，與乳腺癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲等過(guò)程密切相關(guān)，ADAM12可以通過(guò)與細(xì)胞外基質(zhì)分子或細(xì)胞膜受體結(jié)合，調(diào)控細(xì)胞功能和轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)。Sternlicht等[6]研究分析乳腺癌組織和細(xì)胞系中ADAM12的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)ADAM12在乳腺癌發(fā)展過(guò)程中高度表達(dá)。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)表明，ADAM12通過(guò)與細(xì)胞外基質(zhì)分子結(jié)合，調(diào)節(jié)細(xì)胞的黏附和遷移能力。此外，研究發(fā)現(xiàn)，ADAM12可以通過(guò)與細(xì)胞膜受體結(jié)合，激活下游信號(hào)通路，如PI3K/Akt和MAPK/ERK等，促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的增殖和侵襲。這些發(fā)現(xiàn)表明，ADAM12在乳腺癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲中起到了重要的調(diào)節(jié)作用。ADAM12還具有腫瘤抑制及促進(jìn)的雙重作用。一方面，ADAM12可以作為腫瘤抑制因子，抑制乳腺癌的發(fā)展和轉(zhuǎn)移；另一方面，ADAM12也可以作為腫瘤促進(jìn)因子，促進(jìn)乳腺癌的增殖和侵襲，這取決于ADAM12在不同的生理和病理?xiàng)l件下的調(diào)控和相互作用。

1.2? SP70在乳腺癌中的生物學(xué)功能

SP70在細(xì)胞內(nèi)起到重要的保護(hù)作用，在應(yīng)激情況下調(diào)節(jié)細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)。SP70可以在細(xì)胞受到應(yīng)激時(shí)被表達(dá)和激活，具有抗氧化、抗凋亡和細(xì)胞修復(fù)等能力，有助于維持細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)和適應(yīng)外界環(huán)境的變化[7]。SP70可以作為一種抗原，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的免疫識(shí)別和殺傷，有助于抑制腫瘤的生長(zhǎng)和擴(kuò)散。SP70參與調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和增殖，對(duì)細(xì)胞的正常分裂和增殖具有重要影響。在乳腺癌中，SP70可能通過(guò)調(diào)控細(xì)胞周期相關(guān)因子的表達(dá)和活性，影響腫瘤細(xì)胞的增殖和侵襲能力。Li等[8]研究發(fā)現(xiàn)，SP70在乳腺癌組織中的表達(dá)顯著增加，與乳腺癌的發(fā)展和預(yù)后相關(guān)。通過(guò)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)，研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)，SP70具有抗氧化、抗凋亡和細(xì)胞修復(fù)等能力，可以保護(hù)乳腺癌細(xì)胞免受應(yīng)激情況的損害，維持其穩(wěn)態(tài)。此外，研究也表明，SP70在乳腺癌中參與調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和增殖，與細(xì)胞周期相關(guān)因子的表達(dá)和活性有關(guān)。更重要的是，研究發(fā)現(xiàn)，SP70在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)可激發(fā)免疫系統(tǒng)的應(yīng)答。SP70可以作為一種抗原，促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的免疫識(shí)別和殺傷，增強(qiáng)機(jī)體的免疫應(yīng)答，從而抑制腫瘤的生長(zhǎng)和擴(kuò)散，這一發(fā)現(xiàn)提示SP70可作為乳腺癌免疫治療的潛在靶點(diǎn)。

2? ADAM12和SP70的血清檢測(cè)方法

2.1? 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

對(duì)于ADAM12和SP70的血清檢測(cè)，可以應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）[9]。首先，在微孔板上固定與ADAM12或SP70特異性結(jié)合的抗體，形成免疫吸附層。然后，加入乳腺癌患者的血清樣本并進(jìn)行孵育，使ADAM12或SP70與固定抗體特異結(jié)合。之后，通過(guò)洗滌去除非特異結(jié)合物，加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體形成特異性復(fù)合物。再次洗滌后，加入適當(dāng)?shù)牡孜铮笻RP催化反應(yīng)產(chǎn)生發(fā)色反應(yīng)。最后，通過(guò)光譜儀測(cè)量反應(yīng)的顏色強(qiáng)度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出ADAM12或SP70的濃度。ELISA方法可以提供快速、準(zhǔn)確和定量的ADAM12和SP70的血清濃度信息，有助于評(píng)估乳腺癌患者的疾病狀態(tài)和治療效果[10]。然而，需注意的是，應(yīng)用ELISA檢測(cè)過(guò)程，需要選擇高敏感性和高特異性的抗體，以保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性。對(duì)于ADAM12和SP70，選擇正確的抗體尤其重要，因?yàn)樗鼈兛赡茉诜前┘?xì)胞中也有表達(dá)。過(guò)量或稀釋不足的樣品都可導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果，所以必須根據(jù)預(yù)期的蛋白質(zhì)濃度范圍，正確稀釋樣品。還需要盡量使用同一批次的試劑，同時(shí)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品需在相同條件下進(jìn)行處理和檢測(cè)，以避免批量效應(yīng)。

2.2? 質(zhì)譜法

質(zhì)譜法是一種高靈敏度的血清檢測(cè)方法，可以用于衡量乳腺癌患者血清中ADAM12和SP70的濃度。該方法基于蛋白質(zhì)的質(zhì)量-電荷比（m/z）特征，通過(guò)質(zhì)譜儀分析蛋白質(zhì)樣本，并提供關(guān)于蛋白質(zhì)組成和定量的信息[11]。對(duì)于ADAM12和SP70的血清檢測(cè)，研究人員可采集乳腺癌患者的血清樣本，對(duì)其進(jìn)行前處理和分離純化步驟。隨后，樣本中的蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)質(zhì)譜儀進(jìn)行離子化，產(chǎn)生m/z譜圖。通過(guò)與已知標(biāo)準(zhǔn)或數(shù)據(jù)庫(kù)中的參考譜圖進(jìn)行比對(duì)和分析，可以確定ADAM12和SP70的存在和濃度水平。質(zhì)譜法具有高度準(zhǔn)確性和靈敏度，能夠提供更詳細(xì)和全面的蛋白質(zhì)信息，對(duì)于乳腺癌患者新輔助化療療效的評(píng)估具有潛在的幫助[12]。同樣，這一方式應(yīng)用也需注意選擇合適標(biāo)準(zhǔn)品及質(zhì)控，主要是因?yàn)檠鍢悠返膹?fù)雜性，建立質(zhì)譜法時(shí)應(yīng)使用純化的ADAM12和SP70標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行方法的校準(zhǔn)和優(yōu)化。同樣重要的是在每次分析中包含質(zhì)量控制樣品以確保結(jié)果的可重復(fù)性和準(zhǔn)確性。

3? 血清ADAM12聯(lián)合SP70檢測(cè)對(duì)乳腺癌患者新輔助化療的療效評(píng)估

近年來(lái)，血清ADAM12和SP70作為乳腺癌的潛在生物標(biāo)志物引起了廣泛關(guān)注。乳腺癌新輔助化療是一項(xiàng)重要的治療策略，在手術(shù)前用藥以縮小腫瘤、提高手術(shù)效果。然而，乳腺癌患者對(duì)新輔助化療的反應(yīng)存在差異，因此有必要尋找有效的方法評(píng)估療效并個(gè)體化治療。

王漢楚等[13]研究納入了40例乳腺癌患者作為乳腺癌組，50例乳腺良性疾病患者作為乳腺良性疾病組，以及40名體檢健康者作為健康對(duì)照組。使用ELISA檢測(cè)血清中ADAM12的水平，同時(shí)還檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物相關(guān)指標(biāo)水平。結(jié)果顯示，乳腺癌組的ADAM12與各種腫瘤標(biāo)志物水平高于乳腺良性疾病組和健康對(duì)照組，此外乳腺癌組ADAM12的陽(yáng)性率為87.50%，研究表明，ADAM12聯(lián)合腫瘤標(biāo)志物，可以有效提高乳腺癌的篩查陽(yáng)性率，具有潛在作為乳腺癌診斷標(biāo)志物的能力。有研究表明，乳腺癌組織經(jīng)免疫組化染色后SP70的表達(dá)呈弱陽(yáng)性[14]，而SP70在乳腺癌患者血清中的表達(dá)水平鮮見(jiàn)研究。ADAM12和SP70等生物標(biāo)志物在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、分期、預(yù)后及腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移等多個(gè)方面顯示出潛在的關(guān)聯(lián)性，這為乳腺癌患者的管理提供了前所未有的個(gè)體化治療潛力[15]。在乳腺癌中，ADAM12的異常表達(dá)往往與腫瘤細(xì)胞的侵襲與遷移性能提升有關(guān)，其在血清中的水平可作為預(yù)測(cè)療效和預(yù)后的生物標(biāo)志物。理論上，如果患者的ADAM12水平在接受新輔助化療后顯著降低，這可能是化療有效的跡象[16]。在腫瘤細(xì)胞中，SP70的高表達(dá)與細(xì)胞凋亡的抑制、腫瘤的生存力及化療藥物的耐藥性相關(guān)。因此，SP70的表達(dá)水平也能作為監(jiān)測(cè)乳腺癌化療響應(yīng)的另一項(xiàng)指標(biāo)。

通過(guò)對(duì)患者血液中的ADAM12和SP70水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)，醫(yī)生們可以獲得關(guān)于腫瘤生物學(xué)特性的額外信息，這可以幫助預(yù)測(cè)患者的治療響應(yīng)。高的或升高的標(biāo)志物水平往往表明較差的預(yù)后，而標(biāo)志物水平的降低則可預(yù)示有利的化療效果。然而，血液生物標(biāo)志物在臨床應(yīng)用中的價(jià)值還需要大量的臨床證據(jù)來(lái)進(jìn)一步驗(yàn)證。

綜上所述，ADAM12和SP70可作為乳腺癌新輔助化療效果及預(yù)后評(píng)估的重要指標(biāo)，根據(jù)指標(biāo)檢測(cè)可作為新輔助化療效果以及調(diào)整用藥方案的參考依據(jù)。但是因?yàn)楫?dāng)前相關(guān)研究較少，因而未來(lái)的研究應(yīng)當(dāng)更加專注于大規(guī)模臨床試驗(yàn)，以驗(yàn)證血清中ADAM12與SP70水平作為聯(lián)合生物標(biāo)志的可靠性和精確性，以及它們預(yù)測(cè)乳腺癌患者對(duì)新輔助化療反應(yīng)的有效性，以提高生物標(biāo)志物檢測(cè)的精確度，進(jìn)而改善療效評(píng)估。

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[2024-03-14收稿]