溫陽逐瘀湯對腎陽虛證大鼠急性腦缺血損傷后Wnt3a、β-catenin表達的影響

摘要 目的：觀察溫陽逐瘀湯對腎陽虛證大鼠急性腦缺血損傷后缺血腦組織無翅型MMTV整合位點家族成員3A（Wnt3a）、β-連環蛋白（β-catenin）表達的影響，并探討溫陽逐瘀湯防治腎陽虛證大鼠腦缺血損傷的作用機制。方法：將176只雄性SD大鼠分為空白組（Blank組，44只）和腎陽虛組（SYX組，132只）；成功建立腎陽虛證大鼠模型后隨機分為假手術組（Sham組，44只）、腦缺血模型組（MCAO組，44只）、溫陽逐瘀湯組（WYZY組，44只）。WYZY組大鼠灌胃溫陽逐瘀湯，MCAO組與Sham組灌胃等體積蒸餾水。各組在術后1 d，運用Zea Longa評分標準進行大鼠神經行為學評分，于術后3、7、14、21 d取材，每個時間選11只大鼠。蘇木精-伊紅（HE）染色觀察神經細胞形態變化；運用酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測各組大鼠血漿環磷酸腺苷（cAMP）、環磷酸鳥苷（cGMP）含量；免疫蛋白印跡法（Western Blot）檢測缺血側腦組織Wnt3a、β-catenin表達；實時熒光定量聚合酶鏈式反應（RT-PCR）檢測Wnt3a、β-catenin mRNA表達。結果：與Blank組比較，SYX組cAMP含量下降（P＜0.05）、cGMP含量升高（P＜0.05）。HE染色結果顯示，MCAO組細胞排列紊亂、大量細胞壞死、細胞膜消失、細胞核固縮，呈明顯的腦缺血損傷表現；WYZY組前期細胞排列紊亂、部分細胞壞死，隨著時間的延長，細胞損傷減輕，細胞排列逐漸密集，壞死細胞減少，腦缺血損傷顯著改善。與MCAO組、Sham組比較，WYZY組cAMP含量升高，cGMP含量降低（P＜0.05）。與MCAO組比較，WYZY組1、3、7、14、21 d神經行為學評分均降低（P＜0.05）。與Blank組、Sham組比較，MCAO組、WYZY組缺血腦組織3、7、14、21 d Wnt3a、β-catenin表達均有增加（P＜0.05）；與MCAO組比較，WYZY組Wnt3a、β-catenin表達均增加（P＜0.05），7 d Wnt3a達到峰值，14 d" β-catenin達到峰值。與Blank組、Sham組比較，MCAO組、WYZY組3、7、14、21 d Wnt3a、β-catenin mRNA表達均有增加（P＜0.05）；與MCAO組比較，WYZY組Wnt3a、β-catenin mRNA表達增加（P＜0.05），7 d Wnt3a mRNA達到峰值，14 d β-catenin mRNA達到峰值。結論：溫陽逐瘀湯可改善腎陽虛證大鼠cAMP、cGMP水平及腎陽虛病理狀態，可能通過上調Wnt3a、β-catenin表達減輕急性腦缺血損傷，減少神經功能缺損。

關鍵詞 急性腦缺血；溫陽逐瘀湯；腎陽虛證；無翅型MMTV整合位點家族成員3A；β-連環蛋白；大鼠；實驗研究

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.14.012

Effect of Wenyang Zhuyu Decoction on Expressions of Wnt3a and β-catenin after Acute Cerebral Ischemic Injury in Rats with Kidney-Yang Deficiency Syndrome

HE Hongdun， WEI Liang， SUN Shijie， LI Tian， HU Jiajing， ZHU Meizhen

Guangxi University of Chinese Medicine， Nanning 530001， Guangxi， China

Corresponding Author ZHU Meizhen， E-mail： beauty0822@126.com

Abstract Objective：To observe the effect of Wenyang Zhuyu decoction on the expression of wingless MMTV integration site family member 3A（Wnt3a） and β-catenin in the ischemic brain tissue of rats with kidney-Yang deficiency syndrome after acute cerebral ischemia injury，and to explore the mechanism of Wenyang Zhuyu decoction in preventing and treating cerebral ischemic injury in rats with kidney-Yang deficiency syndrome.Methods：One hundred and seventy-six male SD rats were divided into Blank group（44 rats） and kidney-Yang deficiency group（132 rats）.After the successful establishment of kidney-Yang deficiency syndrome model，the rats were randomly divided into Sham operation group（Sham group，44 rats），cerebral ischemia model group（MCAO group，44 rats） and Wenyang Zhuyu decoction group（WYZY group，44 rats）.WYZY group was gavaged with Wenyang Zhuyu decoction，MCAO group and Sham group were gavaged with equal volume of distilled water.One day after operation，neurobehavioral scores of rats in each group were collected by Zea Longa score criteria.Materials were collected on 3 day，7 day，14 day and 21 day after operation，and 11 rats were selected at each time.The morphological changes of nerve cells were observed by hematoxylin-eosin（HE） staining.The contents of cyclic adenosine monophosphate（cAMP） and cyclic guanosine monophosphate（cGMP） in the plasma were detected by enzyme-linked immunoadsorbent assay（ELISA），and the expressions of Wnt3a and β-catenin in ischemic cerebral tissue were detected by Western Blot.Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction（RT-PCR） was used to detect the mRNA expressions of Wnt3a and β-catenin mRNA.Results：Compared with the Blank group，cAMP content in the WSYX group decreased（P＜0.05），and cGMP content increased（P＜0.05）.The results of HE staining showed that the MCAO group showed disordered cell arrangement，necrosis，disappearance of cell membrane and contraction of nuclei，and showed obvious ischemic injury.The WYZY group showed disordered cell arrangement and partial cell necrosis in the early stage.With the extension of time，the cell damage was alleviated，the cell arrangement was gradually dense，the necrotic cells reduced，and the ischemic state" improved significantly.Compared with MCAO group and Sham group，cAMP content increased and cGMP content decreased in the WYZY group（P＜0.05）.Compared with MCAO group，the neuroethological scores of WYZY group on 1 day，3 day，7 day，14 day and 21 day were decreased（P＜0.05）.Compared with Blank group and Sham group，the expressions of Wnt3a and β-catenin in ischemic brain tissue of MCAO group and WYZY group increased on 3 day，7 day，14 day and 21 day（P＜0.05）.Compared with MCAO group，the expressions of Wnt3a and β-catenin in the WYZY group" significantly increased（P＜0.05），and Wnt3a and β-catenin in the WYZY group reached their peak value on 3 day，7 day， respectively.Compared with Blank group and Sham group，the mRNA expressions of Wnt3a and β-catenin in MCAO group and WYZY group were increased on 1 day，3 day，7 day，14 day and 21 day（P＜0.05）.Compared with MCAO group，the mRNA expressions of Wnt3a and β-catenin in the WYZY group were increased（P＜0.05），and the mRNA expression of Wnt3a reached its peak value on 7 day and the mRNA expression of β-catenin reached its peak value on 14 day.Conclusion：Wenyang Zhuyu decoction could improve the levels of cAMP，cGMP and the pathological state in rats with kidney-Yang deficiency.Wenyang Zhuyu decoction might relieve acute cerebral ischemia and reduce neurological function injury in rats with kidney-Yang deficiency by up-regulating the expressions of Wnt3a and β-catenin.

Keywords acute cerebral ischemia; Wenyang Zhuyu decoction; kidney-Yang deficiency syndrome; wingless MMTV integration site family member 3A; β-catenin; rats; experimental study

中醫稱缺血性腦卒中為中風，是一類因腦部血液供應障礙腦組織缺血缺氧，從而發生神經功能缺損表現的疾病。相關研究表明，無翅型MMTV整合位點家族成員（Wnt）/β-連環蛋白（β-catenin）信號通路與腦缺血損傷關系密切，是調控細胞增殖分化的重要信號通路之一［1-2］，其中Wnt3a、β-catenin是Wnt信號通路的關鍵指標，腦缺血發生后Wnt3a作為Wnt信號通路中重要的信號傳遞激活劑，可激活下游關鍵因子β-catenin，激發內源性神經干細胞增殖，從而促進神經發生［3-4］。中風多見于中老年人，因年高腎虛、陽氣虧損，無力運血而致血瘀，痹阻腦脈而引發。本課題組深入中醫學理論并綜合前期臨床實踐，認為“陽虛血瘀”是缺血性腦卒中的病機根源，治以“溫陽逐瘀、化痰通絡”為法，在臨床實踐中發現溫陽逐瘀湯對腎陽虛缺血性腦卒中的防治有一定的效果，相關作用機制尚未明確。本研究基于Wnt信號通路，觀察溫陽逐瘀湯對腎陽虛證大鼠急性腦缺血損傷后Wnt3a、β-catenin表達的影響，探討溫陽逐瘀湯防治缺血性腦卒中的部分作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

SD雄性大鼠［購自長沙天勤生物技術有限公司，SCXK（湘）2014-0010］，無特定病原體（SPF）級，176只，體質量（250±50）g。飼養于廣西中醫藥大學動物實驗中心。實驗開始前予以適應性喂養7 d，自由飲水、標準飼料，術前24 h禁食不禁水。本研究已通過實驗動物研究倫理委員會審核。

1.2 實驗藥物

氫化可的松注射液（購自天津天藥藥業股份有限公司，國藥準字H12020199）。溫陽逐瘀湯，組方：制附子10 g，肉桂5 g，杜仲15 g，巴戟天15 g，當歸10 g，熟地20 g，桃仁10 g，紅花10 g，水蛭8 g，姜半夏9 g，南山楂15 g，紅參10 g。來源：廣西中醫藥大學第一附屬醫院。煎煮前浸泡1 h，制附子提前煎煮30 min，浸泡后煎煮2次，第1次30 min，第2次20 min，與煎煮后的藥液混合，紅參單煎1 h后過濾混合至藥液中，肉桂焗3 min；完成后將其加熱至生藥含量2 g/mL的混合藥液，冷卻后封裝保存，置入4 ℃冰箱備用。

1.3 實驗試劑與儀器

環磷酸腺苷（cAMP）/環磷酸鳥苷（cGMP）酶聯免疫吸附法（ELISA）試劑盒（武漢基因美生物科技有限公司，貨號：JYM1299Ra，JYM1136Ra）；蘇木精-伊紅（HE）染色試劑盒（北京索萊寶科技有限公司，貨號：G1120）；抗甘油醛-3-磷酸脫氫酶（anti-GAPDH）抗體（Biosharp，貨號：BL006B）；anti-Wnt3a/β-catenin抗體（博奧森生物技術有限公司，貨號：bs-1700R；貨號：bs-1165R）；cDNA合成試劑盒、聚合酶鏈式反應（PCR）擴增試劑盒（莫納生物科技有限公司，貨號：MR05101M，MQ10301S）；大腦中動脈栓塞（MCAO）模型線栓（平頂山豫順科技有限公司）。

生物光學顯微鏡（日本奧林巴斯公司）；實時熒光定量PCR儀（美國羅氏公司LightCycler96 型）；全波長掃描式讀數儀（賽默飛世爾科技有限公司）；凝膠成像系統（美國伯樂公司）；垂直電泳儀（美國BIO-RAD 公司）。

1.4 方法

1.4.1 分組、造模與給藥

1.4.1.1 實驗動物分組

采用SPSS 24.0統計軟件分為空白組（Blank組，44只）和腎陽虛組（SYX組，132只）。成功建立腎陽虛證大鼠模型后，采用隨機數字表法將大鼠分為假手術組（Sham組，44只）、腦缺血模型組（MCAO組，44只）、溫陽逐瘀湯組（WYZY組，44只）。

1.4.1.2 腎陽虛證模型的建立及評價標準

腎陽虛組將氫化可的松注射入大鼠后腿肌肉，每日1次，劑量25 mg/kg［5］，持續3周，期間自由飲水、給予標準飼料。每次注射前后觀察記錄各組大鼠體質量、一般狀態及二便情況。當出現大便稀溏、精神萎靡、喜臥嗜睡、消瘦等符合腎陽虛證的臨床表現及血漿cAMP、cGMP改變提示腎陽虛證大鼠模型建立成功。

1.4.1.3 腦缺血損傷模型的建立及評價標準

參照相關文獻［6］，將水合氯醛注射入大鼠腹腔，完成麻醉后，在大鼠頸部正中偏右2～3 mm處縱形切口，鈍性分離頸總動脈（CCA）、頸外動脈（ECA）、頸內動脈（ICA），剝離迷走神經，結扎近心端CCA和ECA，CCA遠心端和ICA打一松動活結，夾住CCA剪一楔形切口，線栓插入ICA，有輕微阻力時停止，之后結扎并固定CCA和ICA上的活結，縫合。腹腔注射青霉素防止感染、保溫毯保溫提高大鼠生存率。Sham組與上述步驟一致，但線栓深度不足以阻塞大腦中動脈血流。

術后24 h進行Zea longa評分：0分，正常無神經缺損癥狀；1分，手術對側前爪伸展不完全；2分，行走向對側轉圈；3分，行走向對側傾倒；4分，自發行走能力喪失，意識喪失。Zea longa評分1～3分為實驗大鼠造模成功，0、4分剔除，補充相應數量的大鼠 。

1.4.1.4 給藥

造模后24 h，參照相關文獻［7］，按1.4 mL/100 g灌胃，根據大鼠體質量調整藥量，WYZY組灌胃7 d溫陽逐瘀湯；Blank組、Sham組、MCAO組灌胃等體積蒸餾水。

1.4.2 觀察指標

1.4.2.1 cAMP、cGMP

注射氫化可的松琥珀酸鈉21 d，MCAO術后3、7、14、21 d，大鼠尾靜脈采血，樣本靜置數小時后離心，分離血漿，提取上清液，置于－4 ℃條件保存。

1.4.2.2 大鼠腦組織標本處理

造模成功后，從各組大鼠中隨機抽取11只大鼠于3、7、14、21 d進行麻醉取材。HE染色：10%水合氯醛腹腔注射麻醉，大鼠心臟使用生理鹽水、4%多聚甲醛依次灌注，灌注后斷頭取腦，固定于4%多聚甲醛水溶液中。免疫蛋白印跡法（Western Blot）、實時熒光定量聚合酶鏈式反應（RT-PCR）：麻醉方式同上，使用生理鹽水灌注大鼠心臟后取腦，將腦組織放于冰塊中的收集管內，置于冰箱中保存備用 。

1.4.2.3 HE染色觀察神經細胞形態學變化

石蠟切片經二甲苯脫蠟，采用不同濃度的乙醇逐級脫蠟至水；蘇木精染色25 min后流水沖洗；鹽酸乙醇分化30 s；流水沖洗；伊紅染色1 min，流水沖洗；經乙醇、石炭酸二甲苯及二甲苯脫水后，滴上中性樹膠，封片，鏡下觀察。

1.4.2.4 Western Blot檢測Wnt3a、β-catenin蛋白表達水平

取凍存的腦組織30 mg，冰上裂解30 min，提取總蛋白，二喹啉甲酸（BCA）蛋白試劑盒測定蛋白濃度。100 ℃加熱10 min，蛋白變性，制備蛋白上樣液，進行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）電泳，將蛋白轉至聚偏氟乙烯（PVDF）膜，加入5%脫脂牛奶室溫封閉1 h，將膜分別與Wnt3a、β-catenin、GAPDH一抗4 ℃封閉過夜，洗膜，加入二抗，常溫搖床孵育2 h，加入電化學發光（ECL）溶液，曝光。采用Image J軟件分析圖像，以GAPDH為內參，計算目的蛋白相對表達量。

1.4.2.5 RT-PCR檢測Wnt3a、β-catenin mRNA表達水平

取凍存腦組織30 mg，Trizol提取總RNA，檢測樣品RNA濃度和純度，反轉錄cDNA。反應體系：10×PCR Buffer 2.5 μL，cDNA 1.0 μL，正向引物、反向引物各1.0 μL，Taq DNA聚合酶（Taq DNA）0.3 μL，脫氧核糖核苷酸三磷酸（dNTPs）2.0 μL，不含RNase的高純度純水（RNase-free-water）20 μL；反應條件：加熱至95 ℃，5 s；退火至60 ℃，30 s，持續循環40次。采用公式2－△△Ct法進行計算。引物序列見表1。

1.5 統計學處理

采用SPSS 24.0統計學軟件對數據進行分析，符合正態分布的定量資料以均數±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間比較符合正態分布且滿足方差齊性者，采用單因素方差分析，進一步兩組間比較采用LSD檢驗；多因素比較采用重復測量方差分析；不符合正態分布或方差齊性采用秩和檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 各組各時間點體質量比較

2.1.1 Blank組與SYX組各時間點體質量

14 d時，與Blank組比較，SYX組體質量逐漸下降，差異有統計學意義（P＜0.05）；21 d時SXY組體質量較Blank組下降，差異有統計學意義（P＜0.05）；經重復測量方差分析，兩組各時間體質量變化差異均有統計學意義（P＜0.05）。詳見表2。

2.1.2 術后各組各時間點體質量比較

與Blank組比較，Sham組、MCAO組、WYZY組體質量減輕，差異均有統計學意義（P＜0.05）；與MCAO組比較，WYZY組體質量呈上升趨勢（P＜0.05）。詳見表3。

2.2.2 術后各組各時間點cAMP、cGMP含量比較

與Blank組比較，MCAO組、Sham組、WYZY組cAMP含量降低，cGMP含量升高，差異有統計學意義（P＜0.05）。WYZY組與MCAO組cAMP、cGMP含量比較，差異有統計學意義（P＜0.05），且WYZY組cAMP含量呈上升趨勢，cGMP含量呈下降趨勢。詳見表5。

2.3 各組各時間點神經功能缺損評分比較

與Sham組比較，MCAO組、WYZY組各時間神經功能缺損評分均升高，差異均有統計學意義（P＜0.05）。與MCAO組比較，WYZY組神經功能缺損評分降低（P＜0.05），且神經功能缺損評分呈下降趨勢。詳見表6。

2.4 各組腦組織神經細胞形態學變化

Blank組、Sham組細胞未受缺血缺氧影響，細胞核、細胞膜結構未破壞，可見完整的細胞結構，細胞之間排列整齊緊密。MCAO組存在嚴重的腦缺血損傷破壞，可見大量壞死細胞，壞死細胞結構殘缺，且散亂分布于缺血腦組織中。WYZY組術后3 d，細胞散亂分布、排列稀疏，可見一定數量的空泡樣壞死；術后7 d，細胞損傷狀態較MCAO組稍改善，細胞逐步呈現致密排列，破壞的細胞結構減少，細胞核逐漸清晰，可見少量的空泡樣壞死；術后14 d，MCAO組可見正常細胞增多，細胞結構完整，細胞核清晰可見，細胞間排列整齊緊密，空泡樣壞死進一步減少；術后21 d，細胞損傷狀態較前進一步改善。詳見圖1。

2.5 術后各組各時間點Wnt3a、β-catenin蛋白表達比較

與Blank組、Sham組比較，MCAO組Wnt3a、β-catenin蛋白表達升高（P＜0.05）；與MCAO組比較，WYZY組Wnt3a、β-catenin蛋白表達升高（P＜0.05）。詳見表7、表8及圖2、圖3。

2.6 術后各組各時間點Wnt3a、β-catenin mRNA表達比較

與Blank組、Sham組比較，MCAO組Wnt3a、β-catenin mRNA表達升高（P＜0.05）；與MCAO組比較，WYZY組Wnt3a、β-catenin mRNA表達升高（P＜0.05）。詳見表9、表10。

3 討 論

大腦是人體重要的器官之一，對缺血、缺氧極為敏感。腦缺血損傷引發腦組織嚴重缺血缺氧，導致神經細胞大量死亡，嚴重損害神經網絡的復雜聯系，引發各種神經功能缺失癥狀［2］。腦缺血損傷發生后，通過溶栓或重建腦血管側支循環，以期恢復缺血區及半暗帶的血液供應是治療腦缺血損傷的有效方法。然而，臨床溶栓治療有嚴格的時間窗限制，存在顱內出血或腦缺血再灌注損傷（cerebral ischemic reperfusion injury，CIRI）風險［8-9］。

有研究表明，腦組織發生損傷后，神經再生修復被激活［10］。多項研究表明，Wnt/β-catenin 信號通路在調控成體神經干細胞及祖細胞增殖、分化及神經元存活過程中發揮著重要的作用［11-14］。Wnt3a蛋白作為Wnt/β-catenin信號通路的起始蛋白，其表達增加可激活Wnt信號通路，Wnt3a作為細胞生長、增殖的關鍵信號分子，參與了促進神經干細胞增殖及新生細胞的分化。有研究發現，Wnt蛋白表達上調可刺激腦缺血后神經發生［15］。Wnt信號啟動的關鍵是細胞質中是否存在結構穩定的、可溶的β-catenin。因此，β-catenin認為是Wnt/β-catenin信號通路中的關鍵信號轉導因子，即β-catenin表達水平較低時，Wnt信號通路關閉，β-catenin表達水平升高時，Wnt信號通路激活。β-catenin主要分布在細胞質和細胞膜上，是細胞黏連和細胞骨架形成的主要參與者之一，具有促進組織器官生長發育及受損組織細胞修復的功能［16］。β-catenin作為控制神經干細胞分化命運的信號分子，參與腦缺血神經發生，抑制腦缺血后神經細胞凋亡及壞死，發揮神經保護的作用［17］。

腎者，先天之本也，在人的不同階段發揮著關鍵作用。40歲以上的中老年人是中風的好發人群。有學者分析了68例中風病人，發現59例（86.18%）病人年齡超過50歲［18］。人體腎中之精氣隨著年齡增長漸衰，腎陰精虧則陽無以化，腎陽虧虛氣化無力，百病始生。缺血性腦卒中發病之因與痰瘀痹阻腦絡密切相關，痰瘀濁邪所生非朝夕也，蓋因人之年歲漸長，腎中陽氣漸衰，津血漸緩，痰瘀漸生。腎陽司氣化之職，陽氣虧虛，氣化推動無力，痰濁難化，瘀血難除。腎中陽氣漸衰，津血失溫，血失溫運久則成瘀，津失溫化久則成痰，痰瘀膠結、腦脈痹阻，形成腎陽虛衰-痰瘀膠結-腦脈痹阻的病機傳導鏈條，久之導致中風發病。因此，腎陽虧虛、痰瘀互結是中風發病的病機關鍵，針對關鍵病機采用溫復腎陽、化痰逐瘀的治法，以期鼓動腎中之陽、溫化痰濁瘀血，腦脈復通，恢復大腦血供，修復神機。溫陽逐瘀之法，意在激濁揚清、陽長陰消，扶正祛邪，標本兼顧，腎腦同治。根據“陽虛血瘀、腎腦相關”理論，以溫復腎陽、逐瘀通脈為法，一是腎陽復則痰瘀除，二是痰瘀除則腦脈通，三是腦脈暢則氣血運，最終實現氣血運則腦元生的臨床療效。

本研究結果顯示，相較于MCAO組，WYZY組大鼠表現出的畏寒、便溏、體質量下降等顯著改善，腎陽虛證相關指標cAMP水平上升，cGMP水平下降，cAMP/cGMP比值升高，各指標變化隨著時間延長呈逐漸上升或下降趨勢，表明溫陽逐瘀湯可改善腎陽虛證相關指標。本研究觀察到溫陽逐瘀湯在改善腎陽虛證大鼠腦缺血損傷神經功能方面有一定的效果；HE染色結果可見，腦缺血組織細胞損傷改善。究其機制可能是溫陽逐瘀湯中附子、肉桂、人參、杜仲、巴戟天等峻補腎陽之劑，調控了cAMP、cGMP表達，改善了腎陽虛證，陽氣復充、祛痰化瘀，復加桃紅、當歸、水蛭、姜半夏等藥取其祛瘀化痰之功，諸藥合用，腦脈復通、血流恢復，既改善了腎陽虛之證，又減輕了神經功能缺損癥狀。

同時本研究結果還顯示，WYZY組腦組織Wnt3a、β-catenin表達水平升高，7 d Wnt3a達到峰值，14 d β-catenin達到峰值，之后開始回落，在21 d趨于穩定，提示溫陽逐瘀湯促進機體內源性神經修復的作用需要一定的時間且具有時限性，溫陽逐瘀湯干預腎陽虛證，使Wnt3a表達在7 d內達到峰值，通過Wnt/β-catenin的正性調節因子蓬亂蛋白（Dishevelled蛋白）傳遞信號，促進Wnt/β-catenin信號通路的關鍵信號分子β-catenin在缺血腦組織中的表達達到峰值，進而啟動Wnt途徑，調控Wnt/β-catenin信號通路轉導，誘導缺血梗死灶周圍皮層新生細胞增殖，促進梗死灶周圍皮層新生細胞向神經元分化，抑制新生細胞向膠質細胞分化，進一步介導成體神經干細胞及祖細胞增殖、分化及神經元存活的過程，促進神經發生，發揮內源性修復作用，改善腎陽虛證急性腦缺血大鼠的神經功能缺損，發揮防治急性腦缺血損傷的重要作用。

綜上所述，溫陽逐瘀湯可改善腎陽虛證大鼠cAMP、cGMP水平及腎陽虛病理狀態，可能通過上調Wnt3a、β-catenin表達減輕急性腦缺血損傷，減少神經功能缺損。

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（收稿日期：2022-07-01）

（本文編輯薛妮）

基金項目 廣西中醫基礎研究重點實驗室項目（No.19-050-45-06，20-065-53-04）；廣西研究生教育創新計劃資助項目（No.YCSW2021222）

作者單位 廣西中醫藥大學（南寧" 530001）

通訊作者 祝美珍，E-mail：beauty0822@126.com

引用信息 何宏盾，韋亮，孫詩杰，等.溫陽逐瘀湯對腎陽虛證大鼠急性腦缺血損傷后Wnt3a、β-catenin表達的影響［J］.中西醫結合心腦血管病雜志，2024，22（14）：2568-2574.