不同樣本存放時(shí)間在血凝指標(biāo)檢測(cè)中的對(duì)比分析

【摘要】 目的 探究不同樣本存放時(shí)間對(duì)血凝指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果的影響。方法 選取2022年6月—2023年5月周寧縣醫(yī)院100名健康體檢者作為研究對(duì)象，均進(jìn)行血凝指標(biāo)檢測(cè)，包括凝血酶原時(shí)間（prothrombin time，PT）、活化部分凝血酶原時(shí)間（activated partial thromboplastin time，APTT）、凝血酶時(shí)間（thrombin time，TT）、血漿纖維蛋白原（fibrinogen，F(xiàn)IB），檢測(cè)時(shí)間分別為采集即刻、存放6 h、存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h。樣本在20～25 ℃室溫下保存，準(zhǔn)確記錄每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的檢測(cè)結(jié)果，并進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果 比較分析采集即刻、存放6 h、存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，PT、APTT、TT的檢測(cè)結(jié)果，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。采集即刻、存放6 h、存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，F(xiàn)IB檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。存放24 h、存放36 h、存放48 h，PT檢測(cè)結(jié)果高于采集即刻（P＜0.05）；采集即刻、存放6 h、存放12 h，PT檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，APTT檢測(cè)結(jié)果高于采集即刻（P＜0.05）；采集即刻、存放6 h，APTT檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，TT檢測(cè)結(jié)果低于采集即刻（P＜0.05）；采集即刻、存放6 h，TT檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 樣本存放時(shí)間可對(duì)血凝指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響，應(yīng)在血液采集后盡快進(jìn)行檢測(cè)，盡可能減少存放時(shí)間，以保障檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性。

【關(guān)鍵詞】 血液樣本；存放時(shí)間；活化部分凝血酶原時(shí)間；凝血酶原時(shí)間

文章編號(hào)：1672-1721（2024）32-0063-03" " "文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A" " "中國(guó)圖書分類號(hào)：R446.11

凝血功能檢測(cè)是臨床常用的一個(gè)檢查項(xiàng)目，可用于術(shù)前凝血功能評(píng)估、抗凝藥物治療效果評(píng)價(jià)、出血性/血栓性疾病輔助診斷、溶栓治療監(jiān)測(cè)等，能夠判斷機(jī)體凝血功能是否正常，為臨床工作者提供有價(jià)值的信息[1-2]。凝血酶原時(shí)間（PT）、活化部分凝血酶原時(shí)間（APTT）、凝血酶時(shí)間（TT）、血漿纖維蛋白原（FIB）為凝血功能檢測(cè)主要內(nèi)容。當(dāng)檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)異常時(shí)，臨床主要表現(xiàn)為出血傾向和血栓形成，應(yīng)予以針對(duì)性治療[3-4]。目前不同醫(yī)院對(duì)血液樣本保存時(shí)間沒有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。有研究發(fā)現(xiàn)，在室溫條件下，不同保存時(shí)間會(huì)對(duì)PT、APTT等檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響，繼而影響臨床判斷的準(zhǔn)確性。本研究以100名健康體檢者作為觀察對(duì)象，分析不同樣本存放時(shí)間對(duì)血凝指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果的影響性，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2022年6月—2023年5月在周寧縣醫(yī)院體檢的100名健康體檢者作為研究對(duì)象，男性53名，女性47名；年齡20～70歲，平均年齡（48.52±5.65）歲；體質(zhì)量指數(shù)18.5～26.7kg/m2，平均體質(zhì)量指數(shù)（22.87±2.04）kg/m2。

納入標(biāo)準(zhǔn)：研究對(duì)象年齡≥20周歲且≤70周歲；臨床資料完整；無暈針、暈血等問題；精神、認(rèn)知狀態(tài)良好，可同醫(yī)護(hù)人員正常交流；對(duì)研究?jī)?nèi)容知情，表示支持和配合。

排除標(biāo)準(zhǔn)：合并重要臟器嚴(yán)重功能障礙；處于妊娠期或者哺乳期的女性；合并凝血功能障礙、血友病、自身免疫性疾病、惡性腫瘤疾病、傳染性疾病、急慢性感染性疾病；既往有精神病史、意識(shí)不清、視覺聽覺發(fā)音障礙或者其他因素?zé)o法配合進(jìn)行血液采集工作；近期有進(jìn)行抗凝藥物治療。

1.2 方法

為保障血液樣本檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性，應(yīng)盡可能消除不良因素干擾。叮囑健康體檢者保持清淡飲食、避免飲酒，檢測(cè)前1天22：00后禁食，保持空腹?fàn)顟B(tài)（禁食8 h以上）。在采血工作前，不可進(jìn)行劇烈運(yùn)動(dòng)，保持心情放松。以坐姿方式采血，嚴(yán)格按照血液樣本采集制度實(shí)施無菌操作，捆扎止血帶的時(shí)間不宜超過1 min。所有健康體檢者均采集2 mL空腹肘部靜脈血，將采集到的血液樣本放置于抗凝管中，緩慢搖晃試管8～10次使其混合。對(duì)血液樣本進(jìn)行離心處理，將離心機(jī)轉(zhuǎn)速設(shè)置為3 000 r/min，離心10 min后取出。血凝檢測(cè)儀器設(shè)備為日本Sysmex公司生產(chǎn)的CS-2000i全自動(dòng)血凝分析儀，試劑盒為德國(guó)西門子公司生產(chǎn)的試劑盒。檢驗(yàn)科工作人員按照說明書要求即刻進(jìn)行血凝指標(biāo)檢測(cè)，記錄下即刻檢測(cè)結(jié)果。之后在室溫環(huán)境下（20～25 ℃）保存血液樣本，分別在存放6 h、存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h時(shí)進(jìn)行血凝指標(biāo)檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比采集即刻、存放6 h、存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h的PT、APTT、TT、FIB檢測(cè)結(jié)果。其中，PT的正常值范圍為11～13 s，APTT的正常值范圍是25～35 s，TT正常值范圍是16～18 s，F(xiàn)IB正常值范圍為190～414 mg/dL。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 24.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以x±s表示，組間對(duì)比將應(yīng)用t檢驗(yàn)，3組及3組以上對(duì)比應(yīng)用方差分析和重復(fù)測(cè)量方差分析，計(jì)數(shù)資料以百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

采集即刻、存放6 h、存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，PT、APTT、TT檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。采集即刻、存放6 h、存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，F(xiàn)IB檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。存放24 h、存放36 h、存放48 h，PT檢測(cè)結(jié)果高于采集即刻（P＜0.05）；采集即刻、存放6 h、存放12 h，PT檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，APTT檢測(cè)結(jié)果高于采集即刻（P＜0.05）；采集即刻、存放6 h，APTT檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，TT檢測(cè)結(jié)果低于采集即刻（P＜0.05）；采集即刻、存放6 h，TT檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

3 討論

凝血功能是指血液從流動(dòng)狀態(tài)轉(zhuǎn)變成為凝膠狀態(tài)過程的一種能力。血液中的凝血、纖溶、抗凝3個(gè)系統(tǒng)處于動(dòng)態(tài)平衡，當(dāng)凝血功能過高或者過低時(shí)，可影響患者的健康狀態(tài)，甚至威脅到生命安全[5]。血凝指標(biāo)檢測(cè)可以有效評(píng)估患者凝血功能狀態(tài)，其檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性將直接關(guān)系到臨床治療方案的有效性[6]。在實(shí)際研究中發(fā)現(xiàn)，許多因素可影響血凝指標(biāo)檢測(cè)的準(zhǔn)確性。例如，在臨床檢驗(yàn)工作中有著較多的檢驗(yàn)樣本或檢驗(yàn)工作人員不足時(shí)，樣本可能長(zhǎng)時(shí)間放置，出現(xiàn)血細(xì)胞破裂、血液pH值改變等情況，導(dǎo)致凝血功能改變，血凝檢測(cè)結(jié)果無法準(zhǔn)確反映患者的健康狀態(tài)[7-8]。

PT測(cè)定的是暴露于組織因子時(shí)血漿凝固所需的時(shí)間，可反映外源性凝血是否正常，顯示血漿中凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ活性情況。PT是監(jiān)測(cè)口服抗凝劑的首選指標(biāo)[9]。PT超過正常對(duì)照值3 s以上為異常。PT延長(zhǎng)多見于先天性凝血因子缺乏、肝病、原發(fā)性纖溶癥、維生素K缺乏等，PT縮短常見于血栓性疾病、多發(fā)性骨髓瘤、口服避孕藥等。PT檢測(cè)結(jié)果對(duì)于出血性疾病、外源性凝血途徑導(dǎo)致的先天性凝血疾病以及早期肝硬化的臨床診斷有重要意義[10]。本研究發(fā)現(xiàn)，存放24 h、存放36 h、存放48 h，PT檢測(cè)結(jié)果高于采集即刻，呈逐漸延長(zhǎng)趨勢(shì)。上述結(jié)果說明PT檢測(cè)結(jié)果在存放24 h以內(nèi)有一定的穩(wěn)定性。當(dāng)存放24 h以上，PT檢測(cè)結(jié)果將無法滿足臨床需求。應(yīng)盡量在24 h以內(nèi)完成檢測(cè)工作。

APTT測(cè)定的是血漿暴露于可激活接觸因子的物質(zhì)后發(fā)生凝固所需的時(shí)間，可反映內(nèi)源性凝血系統(tǒng)是否正常，顯示血漿中凝血因子XI、XII、Ⅷ、IX水平[11]。APTT延長(zhǎng)常見于嚴(yán)重肝臟疾病、血友病A/B、口服抗凝藥、凝血因子VI、VI缺乏癥等，APTT縮短常見于高凝狀態(tài)和血栓性疾病[12]。本研究發(fā)現(xiàn)，樣本室溫存放6 h以內(nèi)APTT檢測(cè)結(jié)果無變化；存放12～48 h，APTT檢測(cè)結(jié)果呈延長(zhǎng)趨勢(shì)。樣本采集后長(zhǎng)時(shí)間放置，血細(xì)胞持續(xù)新陳代謝，隨著氧氣消耗產(chǎn)生二氧化碳、乳酸，使血液pH下降，Ⅷ因子活性程度隨著保存時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸降低。APTT處于內(nèi)源性凝血機(jī)制初始階段，最先受到影響，出現(xiàn)APTT延長(zhǎng)現(xiàn)象。為了確保此項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)在采血6 h內(nèi)完成檢驗(yàn)。

TT是指在血漿中加入標(biāo)準(zhǔn)化的凝血酶后血液凝固的時(shí)間，可以反映血漿纖維蛋白原的水平和功能。TT檢測(cè)結(jié)果時(shí)間延長(zhǎng)可能是機(jī)體出現(xiàn)低纖維蛋白原血癥、彌漫性血管內(nèi)凝血、感染、白血病等。樣本存在微小凝塊或者鈣離子時(shí)，可導(dǎo)致TT縮短[13-14]。本研究顯示，存放6 h內(nèi)進(jìn)行TT檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果無明顯變化；存放12～48 h，TT檢測(cè)結(jié)果呈縮短趨勢(shì)（P＜0.05）。這主要是由于FⅦ因子活化導(dǎo)致。最好在6 h內(nèi)進(jìn)行TT檢測(cè)。

FIB是肝細(xì)胞合成和分泌的一種糖蛋白（含2 964個(gè)氨基酸），是血漿中含量最高的凝血因子，可參與凝血和止血過程[15]。FIB水平升高時(shí)，可使血小板聚集，導(dǎo)致血液呈高凝狀態(tài)。FIB增加除生理情況下的應(yīng)激反應(yīng)和妊娠晚期外，可見于機(jī)體感染、糖尿病酸中毒、急性心肌梗死、自身免疫性疾病、尿毒癥等。FIB減少可見于肝臟疾病、原發(fā)性纖維蛋白原缺乏癥、惡性貧血、DIC等。當(dāng)出現(xiàn)FIB水平異常變化時(shí)，應(yīng)聯(lián)合動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)患者其他凝血指標(biāo)及一些炎癥指標(biāo)（如C-反應(yīng)蛋白、血降鈣素原等），為臨床判斷患者病情程度及預(yù)后提供依據(jù)。本研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)IB在各時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），可見FIB有著較高的穩(wěn)定性。在進(jìn)行FIB單項(xiàng)檢測(cè)時(shí)，48 h內(nèi)完成檢測(cè)即可。

在進(jìn)行血凝指標(biāo)檢測(cè)時(shí)，為保障檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，要求患者保持空腹?fàn)顟B(tài)，避免劇烈運(yùn)動(dòng)、飲酒等影響檢查結(jié)果的行為。操作人員應(yīng)嚴(yán)格遵照采血規(guī)范進(jìn)行血液樣本采集工作，及時(shí)將樣本送檢，按照說明書要求進(jìn)行檢驗(yàn)，最大程度減少誤差。

綜上所述，在室溫條件下，隨著血樣本放置時(shí)間延長(zhǎng)，PT、APTT、TT等血凝指標(biāo)會(huì)發(fā)生改變，應(yīng)在采集血液樣本后盡快進(jìn)行檢測(cè)，以保障檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性。

參考文獻(xiàn)

[1] 魏曉薇.標(biāo)本存放時(shí)間對(duì)血凝三項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的影響[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2023，18（6）：88-90.

[2] 張春雨.探討凝血真空采血管和標(biāo)本放置溫度及時(shí)間對(duì)凝血檢驗(yàn)的影響[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2021，27（32）：120-121.

[3] 王葛.血液標(biāo)本存放時(shí)間對(duì)血凝檢驗(yàn)結(jié)果的影響[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2021，16（15）：181-183.

[4] 丁侶霞，蔣勇.血液標(biāo)本存放時(shí)間對(duì)血凝檢驗(yàn)結(jié)果的影響[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2019，19（91）：21-22.

[5] 范見佩，鄭遠(yuǎn)華，李區(qū)杰.標(biāo)本因素對(duì)凝血五項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的影響[J].血栓與止血學(xué)，2019，25（3）：411-414.

[6] 易康平.凝血酶原時(shí)間和活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定的臨床意義[J].基層醫(yī)學(xué)論壇，2019，23（31）：4527-4528.

[7] 王艷.不同保存條件和存放時(shí)間的血液標(biāo)本對(duì)生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果的影響[J].安徽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2019，25（2）：151-152.

[8] 吳剛.標(biāo)本放置時(shí)間、離心時(shí)間以及溶血與否對(duì)凝血檢測(cè)結(jié)果的影響分析[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2020，14（1）：228-230.

[9] 郁玲，胡益飛.標(biāo)本不同存儲(chǔ)時(shí)間對(duì)常規(guī)凝血功能指標(biāo)影響的研究[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2019，29（9）：1111-1112.

[10] 陳柳玲，張志，宋晗，等.血液標(biāo)本存放時(shí)間對(duì)血凝中PT、APTT檢測(cè)結(jié)果的影響[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2020，15（18）：197-198.

[11] 鄧進(jìn)進(jìn).影響血凝試驗(yàn)檢驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)因素分析[J].基層醫(yī)學(xué)論壇，2018，22（7）：958-959.

[12] 劉婷.血液標(biāo)本存放時(shí)間對(duì)血凝中PT、APTT檢測(cè)結(jié)果影響[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2018，18（1）：137.

[13] 張琦.凝血真空采血管及標(biāo)本放置溫度、時(shí)間對(duì)凝血檢驗(yàn)的影響[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2020，18（19）：89-90.

[14] QIANG L，WEI C，YONG LI W，et al.A new method of monitoring catheter-directed thrombolysis for deep venous thrombosis-application of D-dimer and fibrinogen testing[J].Phlebology，2022，37（3）：216-222.

[15] 仝曉寧，陳葳.血液標(biāo)本存放的時(shí)間、離心的時(shí)間及發(fā)生溶血對(duì)患者凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果的影響[J].當(dāng)代醫(yī)藥論叢，2020，18（7）：174-175.

（編輯：張興亞）