四種殺蟲劑對平菇菌絲及子實體的安全性評價

摘 要：為研究除蟲脲、呋蟲胺、高效氯氰菊酯和氯蟲苯甲酰胺4種殺蟲劑對平菇菌絲和子實體生長的影響，采用拌料和噴霧兩種方式對平菇進行藥劑處理，使用液相色譜-質譜聯用法和氣相色譜法對其殘留情況進行分析，并研究4種殺蟲劑對蚊蠅類雙翅目害蟲的防治效果。結果表明，4種殺蟲劑對平菇菌絲生長抑制率最高的是氯蟲苯甲酰胺，達14.39%，其他3種藥劑抑制率均較低。拌料處理中，100 mg·L-1除蟲脲和高效氯氰菊酯對平菇子實體產量的影響較小，第一潮菇的生物轉化率在56%以上；噴霧處理中，100 mg·L-1高效氯氰菊酯與呋蟲胺對平菇產量的影響較小，第一潮菇的生物轉化率在57%以上。呋蟲胺對蚊蠅類雙翅目害蟲的防治效果最好，蟲口減退率可在97.1%以上。平菇拌料處理子實體中均未檢測出高效氯氰菊酯和氯蟲苯甲酰胺農藥殘留；噴霧處理子實體中4種供試藥劑均未超出殘留限量。綜上所述，平菇拌料處理可選用高效氯氰菊酯藥劑，噴霧處理可選用呋蟲胺藥劑，對平菇子實體產品的安全性影響較小。

關鍵詞：平菇；殺蟲劑；菌絲；產量；安全性

中圖分類號：S646.1+4 文獻標志碼：A 文章編號：1673-2871（2024）12-109-07

收稿日期：2024-07-11；修回日期：2024-09-05

基金項目：國家食用菌產業技術體系（CARS-20）；江蘇省現代農業（蔬菜）產業技術體系（JATS﹝2023﹞320）

作者簡介：張智穎，男，在讀碩士研究生，研究方向為食品安全。E-mail：zzy1ng@163.com

通信作者：李福后，男，副教授，研究方向為食品加工與安全。E-mail：lifuhou2002@163.com

馬" " 林，女，研究員，研究方向為食用菌蟲害防控。E-mail：malin1590@sina.com

Evaluation of the safety of four insecticides on mycelium and substrate of Pleurotus ostreatus

ZHANG Zhiying1， 2， MA Lin2， QU Shaoxuan2， JIANG Ning2， LI Huiping2， HOU Lijuan2， LIN Jinsheng2， XU Ping2， WANG Weixia1， LI Fuhou1

（1. School of Ocean Food and Biological Engineering， Jiangsu Ocean University/Key Laboratory of Marine Bioresources and Environment in Jiangsu Province， Lianyungang 222005， Jiangsu， China; 2. Institute of Vegetable， Jiangsu Academy of Agricultural Sciences/Jiangsu Key Laboratory for Horticultural Crop Genetic Improvement， Nanjing 210014， Jiangsu， China）

Abstract： The objective of this study is to examine the impact of four insecticides， specifically diflubenzuron， dinotefuran， beta-cypermethrin and chlorantraniliprole， on the growth of the mycelium and fruiting bodies of Pleurotus ostreatus. The pharmacological treatment of P. ostreatus employs both mixing and spraying techniques. The residues were subjected to analysis using liquid chromatography-mass spectrometry（LC-MS/MS） and gas chromatography（GC）. A study was conducted to evaluate the efficacy of four insecticides against dipteran pests， specifically mosquitoes and flies. The results demonstrated that the highest inhibitory efficacy of the four insecticides on the mycelium of P. ostreatus was 14.39% for chlorantraniliprole. The remaining three agents exhibited lower inhibition rates. The impact of diflubenzuron in conjunction with beta-cypermethrin in the mixing treatment on the production of P. ostreatus substrates was found to be insignificant. The initial flush of mushrooms was subjected to a bioconversion process， resulting in a conversion rate of over 56%. The application of beta-cypermethrin and dinotefuran in spray treatments has been observed to exert a minimal influence on the yield of P. ostreatus. The bioconversion rate of the initial flush of mushrooms was in excess of 57%. Dinotefuran has been demonstrated to be the most effective chemical agent against mosquitoes and flies， which are classified as dipteran pests. The rate of population reduction can reach as high as 97.1%. The analysis of the treated substrates of P. ostreatus revealed the absence of beta-cypermethrin and chlorantraniliprole pesticide residues. Residue limits for all four insecticides tested were not exceeded in sprayed substrates. Overall， beta-cypermethrin can be used for mixing treatment of P. ostreatus， and dinotefuran can be used for spraying treatment. The impact on the safety of P. ostreatus substrate products is minimal.

Key words： Pleurotus ostreatus; Insecticide; Mycelium; Yield; Safety

食用菌產業在國內發展迅速，已經成為一類重要的經濟作物。但在食用菌栽培過程中會頻繁發生蟲害，造成食用菌產業嚴重損失[1-3]。平菇（Pleurotus ostreatus）在我國食用菌產業中占據重要地位，常見的平菇栽培方式主要是發酵料栽培，堆制發酵過程可使培養料更適宜平菇菌絲生長[4]，此過程無需高溫滅菌，若菇農忽略對蟲害的防治，或者采用不科學的防治措施，極易發生蟲害，且以雙翅目等小型害蟲為主，最終降低生產效益并造成嚴重的經濟損失[5]。隨著我國食用菌產業的快速發展，人們越來越重視食用菌的品質與安全[6-7]，不合理使用農藥會導致食用菌農藥殘留超標[8]，使食用菌在銷售和出口時受到阻礙[9]。2023年前三季度我國共有121批次食用菌產品被美國、日本、韓國和歐盟扣留（召回），其中一個原因就是疑含農藥殘留或殘留超標[10]。針對陜西省835份食用菌樣品進行農藥殘留檢測分析，有262份樣品檢測出農藥殘留，共檢出42種農藥，其中包括36種未登記農藥[11]。目前在食用菌生產中允許使用的登記農藥僅有17種，并且以殺菌劑為主[12-13]。蟲害方面缺乏適宜的農藥產品，導致菇農會根據自行判斷選擇其他農藥，導致農藥殘留超標。目前在平菇日常生產中極易發生的害蟲主要有果蠅、跳蟲、蕈蚊、線蟲、蛞蝓和螨類等，其中雙翅目害蟲主要有異遲眼蕈蚊、平菇厲眼蕈蚊、真菌癭蚊、短脈異蚤蠅等[14]。危害方式主要為幼蟲鉆入食用菌菌袋中直接取食菌絲或培養料原基，危害部位褐色并伴有黏狀物體，最終導致原基消失或菇蕾萎縮，繼而感染霉菌導致菌袋污染。研究表明，在菌袋發菌期間發現有蟲害時，可向菌袋內部注射菊酯類殺蟲劑或敵菇蟲800～1000倍液；在出菇后發生蟲害時可以用20%殺滅菊酯2000～2500倍液或者阿維菌素800～1000倍液對場地進行噴灑[15]。研究表明，對殺蟲劑產生抗藥性占比最高的是雙翅目害蟲，如淡色庫蚊幼蟲對氯菊酯的抗性系數達到了15.9，較之前的抗性系數增加了4.7倍[16]；家蠅已對47種化合物產生抗性；銅綠蠅已對25種化合物產生抗性[17]。由于目前針對大多數蟲害防治的主要方法還是化學防治，因此農藥的選擇至關重要。

目前我國在食用菌上登記的殺蟲劑僅有12種。盡管筆者擬采用的除蟲脲、高效氯氰菊酯和氯蟲苯甲酰胺均不在其中，呋蟲胺僅在雙孢蘑菇上進行登記，但這4種殺蟲劑均為市場上的常規農藥，具有代表性，探討4種殺蟲劑對平菇菌絲和子實體產量的影響，并對蚊蠅類等雙翅目害蟲的藥效以及平菇產品中藥劑殘留量進行檢測，明確藥劑在平菇中的殘留降解效果，以期對平菇生產選用農藥、施用方法等提供一定的參考，為殺蟲劑在食用菌生產中推廣應用提供借鑒。

1 材料與方法

1.1 材料

供試平菇菌種由江蘇省農業科學院蔬菜研究所食用菌團隊提供。培養料配方：84%棉籽殼、15%麩皮、1%石灰粉，含水量為65%。

供試藥劑：20%呋蟲胺懸浮劑（SC，江蘇劍牌農化股份有限公司）；25%除蟲脲可濕性粉劑（WP，山西康派偉業生物科技有限公司）；20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑（SC，安陽市銳普農化有限責任公司）；10%高效氯氰菊酯懸浮劑（SC，江蘇功成生物科技有限公司）。

1.2 試驗方法

試驗于2023年7—10月在江蘇省農業科學院蔬菜研究所食用菌團隊實驗室進行，田間藥效試驗在平菇大棚內完成。

1.2.1 供試藥劑拌料處理對平菇菌絲生長及產量的影響 結合除蟲脲、呋蟲胺、高效氯氰菊酯和氯蟲苯甲酰胺在其他作物上的使用劑量和產品的推薦劑量，用清水將其配成有效成分為100、500和1000 mg·L-1的3個施藥劑量，用清水作對照（CK）。采用3 cm×13 cm×26 cm的聚乙烯塑料袋，每袋稱取200 g干料培養料，分別與配置好的溶液攪拌均勻裝袋，每處理3次重復，每次重復10袋，后續的滅菌、接種、發菌、出菇管理采用常規方法[18]。

在培養過程中待菌絲蓋面時第一次劃線，以對照組長至菌袋底部的時間為準第二次劃線，測量每個處理菌袋上兩次劃線的距離，以此距離作為菌絲的生長速度來計算供試藥劑對平菇菌絲的抑制率[19]。根據樊玉萍[20]的采收方法對平菇第一潮菇進行采收，測定產量，并觀察供試藥劑拌料處理對平菇子實體產量的影響，計算平菇生物轉化率[21]。菌絲抑制率/%=（對照菌絲生長量－處理菌絲生長量）/對照菌絲生長量×100；生物轉化率/%=鮮菇質量/基質干料質量×100。

1.2.2 供試藥劑噴霧對平菇子實體產量的影響 用清水拌料，菌絲培養與出菇管理同1.2.1。待菌絲長滿菌袋形成原基時開袋，將供試藥劑配制成100、500和1000 mg·L-1的溶液均勻噴霧至菌袋表面，以噴清水作為對照，產量測定與生物轉化率同1.2.1。

1.2.3 供試藥劑對蚊蠅類雙翅目害蟲的藥效測定 結合拌料處理對平菇菌絲及產量的影響，以及正常生產中噴施藥劑基本不會超過最高推薦濃度，所以選取藥劑有效成分為100和500 mg·L-1 2個濃度進行殺蟲試驗。選擇9個有蚊蠅類雙翅目害蟲的平菇大棚，將大棚用塑料薄膜從中平均分為3部分，作為3次重復，將4種供試藥劑配制好溶液均勻噴灑于大棚中，每重復噴施20 L溶液，然后在大棚前、中、后3個部分分別懸掛3張黃色粘蟲板，以噴清水作為對照，按黃板上的粘蟲數為依據計算供試藥劑的防治效果，并計算蟲口減退率[22]。蟲口減退率/%=（防前蟲數－防后蟲數）/防前蟲數×100。

1.2.4 供試藥劑殘留分析 拌料處理取菌袋滅菌后、菌絲長滿、一潮菇后培養料與子實體樣品，噴霧處理取一潮菇后菌袋表面料、菌袋中間料與子實體樣品；稱取試樣各10 g于50 mL塑料離心管中，加入10 mL乙腈及一顆陶瓷均質子，劇烈振蕩1 min，加入4 g無水硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉二水合物、0.5 g檸檬酸二鈉鹽倍半水合物，振蕩1 min后4200 r·min-1離心5 min，吸取上清液過微孔濾膜，按照GB 23200.121－2021《植物源性食品中331種農藥及其代謝物殘留量的測定 液相色譜-質譜聯用法》測定除蟲脲、呋蟲胺和氯蟲苯甲酰胺農藥殘留[23]。準確稱取25 g試樣放入勻漿機中，加入50 mL乙腈，在勻漿機中高速勻漿2 min后用濾紙過濾，濾液收集到裝有5～7 g氯化鈉的100 mL具塞量筒中，收集濾液40～50 mL，蓋上塞子，劇烈震蕩1 min，在室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層，按照NY/T 761－2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定 氣相色譜法》測定高效氯氰菊酯農藥殘留[24]。對于4種供試藥劑處理后培養料與子實體中的藥劑殘留量是否超標，參照GB 2763－2021食品中農藥最大殘留限量標準進行判定[25]，呋蟲胺和氯蟲苯甲酰胺兩種藥劑在食用菌上暫無最大殘留限量，以茄果類最大殘留限量作為標準。

1.3 數據分析

使用SPSS26軟件對數據進行統計分析，結果用平均值±標準差表示，采用Duncan法進行差異顯著性分析；使用Microsoft Excel 2024制圖。

2 結果與分析

2.1 供試藥劑拌料處理對平菇菌絲生長及產量的影響

由圖1可知，供試藥劑不同有效成分濃度對平菇菌絲的生長抑制率不同，隨著有效成分濃度增大，抑制作用增強。氯蟲苯甲酰胺對平菇菌絲抑制作用最強，其最高濃度下對菌絲的抑制率在14%以上；呋蟲胺對平菇菌絲的抑制作用最小，抑制率在0.64%～6.39%，除蟲脲與高效氯氰菊酯對菌絲的抑制率均在2%～7%。由此可見，在平菇拌料中可加入呋蟲胺類對平菇菌絲抑制作用較小的殺蟲劑，其次可選用除蟲脲與高效氯氰菊酯。

由表1可知，供試藥劑拌料處理對平菇子實體產量有不同的影響，平菇產量隨著藥劑濃度的增大而降低。4種藥劑在100 mg·L-1時，除呋蟲胺顯著低于對照外，其他處理與對照無顯著差異，其中除蟲脲對平菇產量影響最小，轉化率達到57.84%；高效氯氰菊酯在100和500 mg·L-1時平菇產量均與對照無顯著差異，且生物轉化率在55%以上；4種藥劑在1000 mg·L-1時平菇產量均顯著低于對照。因此從供試藥劑拌料試驗結果來看，選擇除蟲脲與高效氯氰菊酯藥劑對平菇產量影響較小。

表1 供試藥劑拌料處理對平菇產量的影響

Table 1" " Effects of mixing treatments with test agents on the yield of Pleurotus ostreatus

[供試藥劑

Test preparation ρ/（mg·L-1） 每袋產量

Yield/（g·bag-1） 生物轉化率

Bioconver-

sion rate/% 除蟲脲

Diflubenzuron 100 115.67±12.91 a 57.84 500 109.50±15.83 b 54.75 1000 94.50±9.86 de 47.25 呋蟲胺

Dinotefuran 100 108.00±10.39 b 54.00 500 100.00±7.43 cd 50.00 1000 93.50±7.21 e 46.75 高效氯氰菊酯

Beta cypermethrin 100 112.83±12.30 ab 56.42 500 110.50±10.20 ab 55.25 1000 99.17±11.75 cde 49.59 氯蟲苯甲酰胺

Chlorantraniliprole 100 110.83±11.68 ab 55.42 500 100.67±9.71 c 50.34 1000 97.33±6.79 cde 48.67 CK 115.83±9.75 a 57.92 ]

注：同列數字后不同小寫字母表示差異顯著（p＜0.05）。下同。

Note： Different small letters in the same column indicate significate difference（p＜0.05）. The same below.

2.2 供試藥劑噴霧對平菇產量的影響

由表2可知，噴霧處理對平菇產量的影響效果不同，平菇產量隨著藥劑濃度的增大而降低。4種藥劑在100 mg·L-1處理時的平菇產量與對照均無顯著差異，其中呋蟲胺對平菇產量影響最小，第一潮菇生物轉化率達57.59%；呋蟲胺在500 mg·L-1時平菇產量與對照無顯著差異，其余3種藥劑在500 mg·L-1時的平菇產量均顯著低于對照；4種藥劑在1000 mg·L-1時的平菇產量均顯著低于對照。因此，從供試藥劑噴霧處理結果來看，選擇呋蟲胺藥劑對平菇產量影響最小。

表2 供試藥劑噴霧處理對平菇產量的影響

Table 2" " Effects of spray treatments with test agents on the yield of Pleurotus ostreatus

[供試藥劑

Test preparation ρ/（mg·L-1） 每袋產量

Yield/（g·bag-1） 生物轉化率

Bioconver-

sion rate/% 除蟲脲

Diflubenzuron 100 110.17±12.07 a 55.06 500 98.00±10.47 bc 49.00 1000 94.67±8.70 c 47.34 呋蟲胺

Dinotefuran 100 115.17±10.79 a 57.59 500 109.33±8.17 a 54.67 1000 99.33±5.37 bc 49.67 高效氯氰菊酯

Beta cypermethrin 100 114.50±12.06 a 57.25 500 103.00±11.26 b 51.50 1000 99.17±13.40 bc 49.59 氯蟲苯甲酰胺

Chlorantraniliprole 100 112.17±13.43 a 56.09 500 97.17±17.45 bc 48.59 1000 94.33±12.58 c 47.17 CK 115.83±9.75 a 57.92 ]

2.3 供試藥劑對蚊蠅類雙翅目害蟲的藥效測定

由表3可知，呋蟲胺處理的防治效果最好，在500 mg·L-1時對蚊蠅類害蟲的蟲口減退率在97%以上，100 mg·L-1時蟲口減退率也達到了93.56%；其次是除蟲脲，各處理濃度蟲口減退率均在77%以上；高效氯氰菊酯在100 mg·L-1時蟲口減退率最低，只有43.16%。呋蟲胺處理的蟲口減退率顯著高于同一有效成分濃度的除蟲脲、高效氯氰菊酯和氯蟲苯甲酰胺。從試驗數據來看，呋蟲胺的效果最好，因此可選用呋蟲胺藥劑來防治平菇日常生產中蚊蠅類等雙翅目害蟲。

2.4 供試藥劑農藥殘留分析

2.4.1" " 供試藥劑拌料處理的農藥殘留分析" " 由表4可知，無論用藥濃度高低，隨著時間延長，不同時期培養料中的農藥殘留量呈現降低的趨勢。參照GB 2763－2021食品中農藥最大殘留限量標準，除蟲脲3個濃度在子實體中的農藥殘留量為小于0.026 mg·kg-1，殘留量均低于食用菌中農藥最大殘留限量標準。呋蟲胺的兩個中低濃度在子實體中的殘留量為0.078～0.483 mg·kg-1，同樣低于最大殘留限量，而最高濃度（1000 mg·L-1）時子實體中的殘留量超出了殘留限量，這可能與呋蟲胺屬于內吸性農藥有關。根據呋蟲胺在食用菌上的建議用藥量為500 mg·L-1，說明呋蟲胺在拌料處理時有效成分濃度不超過說明書最大使用量，在平菇子實體中的農藥殘留量是符合要求的。在高效氯氰菊酯和氯蟲苯甲酰胺處理后的子實體中均未檢出農藥殘留，這兩種藥劑均屬于非內吸性農藥。從食品安全角度來看，本試驗平菇拌料處理中添加高效氯氰菊酯和氯蟲苯甲酰胺對食用菌產品的安全性影響較小。

2.4.2 供試藥劑噴霧處理的農藥殘留分析 由表5可知，平菇噴霧農藥殘留數據結果表明，100 mg·kg-1的除蟲脲和不同濃度處理的高效氯氰菊酯在菌袋中間部位的培養料中未檢測出農藥殘留，說明除蟲脲和高效氯氰菊酯向下滲透的程度較低；而另兩種藥劑在菌袋中間部位均檢測出農藥殘留，說明呋蟲胺和氯蟲苯甲酰胺向下滲透的能力較強。4種供試藥劑對菌袋進行噴霧處理后，除了100 mg·L-1高效氯氰菊酯子實體中未檢出農藥殘留外，其他處理的子實體中都檢測出農藥殘留，但都低于食品安全國家標準限量，藥劑殘留量從高到低為氯蟲苯甲酰胺＞高效氯氰菊酯＞呋蟲胺＞除蟲脲。

3 討論與結論

筆者采用噴霧和拌料處理兩種方法測定平菇子實體及培養料中農藥殘留情況。本試驗的噴霧處理是在子實體形成前噴施4種農藥，對菌袋中子實體的形成及后期生長未產生影響，且子實體中的農藥殘留均未超出殘留限量。本試驗中除了低濃度的高效氯氰菊酯外，其余藥劑的不同處理濃度對蚊蠅類等雙翅目害蟲的防治效果均較好，其中低濃度的高效氯氰菊酯效果不好的原因與該試驗場地長期使用菊酯類藥物，使害蟲對菊酯類藥物產生了抗藥性有關。目前國內對這幾種殺蟲劑在其他蟲害防治方面也有報道，研究表明，用2000倍的25%的除蟲脲噴灑料面可有效驅避發菌期成蟲產卵和消滅料內幼蟲[26]；4.5%高效氯氰菊酯對黑糞蚊有較好的防治效果[27]。

農藥拌料栽培中高效氯氰菊酯和氯蟲苯甲酰胺3個濃度處理后的子實體中均未檢出農藥殘留，說明拌料處理中添加高效氯氰菊酯和氯蟲苯甲酰胺對食用菌產品的安全性影響較小。研究表明，將高效氯氰菊酯加水稀釋750倍后與培養料混合均勻，在子實體中未檢測出農藥殘留[28]。從本試驗看，子實體中未檢出高效氯氰菊酯和氯蟲苯甲酰胺殘留，其原因與這兩種藥劑不屬于內吸性農藥有關，而除蟲脲和呋蟲胺則屬于內吸性農藥，子實體中均檢測出農藥殘留，從拌料處理農藥殘留結果可看出，高溫高壓滅菌過程中4種藥劑都產生一定程度的分解，這主要與農藥隨著溫度的升高從而加速分解有關。研究表明，拌料法中平菇菌絲對除蟲脲和高效氯氰菊酯的敏感性較低，且從供試藥劑拌料處理對平菇產量的影響試驗來看，這兩種藥劑對產量影響較小[29]。從拌料處理農藥殘留結果可以看出，高效氯氰菊酯拌料處理后的平菇子實體中均未檢測出農藥殘留，但在培養料中卻檢測出較高的殘留量，可能與該藥劑不屬于內吸性農藥有關，但在不同的培養料配方中，或者不同的食用菌品種中是否也是同樣的結果還需要進一步研究。

綜上所述，從噴霧殺蟲試驗、藥劑對平菇產量影響及農藥殘留量檢測結果來看，將有效成分為100～500 mg·L-1的呋蟲胺藥劑噴灑于菌袋表面或大棚中既能有效防治蚊蠅類等雙翅目害蟲，又對平菇產量的影響較小。從拌料處理中菌絲抑制試驗、藥劑對平菇產量的影響及農藥殘留檢測結果來看，平菇拌料處理中最適宜加入高效氯氰菊酯，在有效成分質量濃度不超過1000 mg·L-1時對平菇子實體安全性影響較小。

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