北京和寧夏地區2家醫院臨床分離氣單胞菌屬的臨床分布和耐藥性分析

摘要：目的 了解北京和寧夏地區2家醫院（解放軍總醫院第五醫學中心和寧夏醫科大學總醫院）臨床分離氣單胞菌屬的分布特點及耐藥性，為臨床治療和防控氣單胞菌屬感染提供參考。方法 回顧性分析2013—2022年間2家醫院臨床分離氣單胞菌屬感染患者的年齡、性別、菌種分布、標本類型分布和耐藥率等，使用Whonet5.6軟件和Graphpad Prism 8軟件進行統計分析。結果 10年間2家醫院分離氣單胞菌屬細菌共541株，分別為198株和343株，感染患者均是男性多于女性，年齡多為50歲以上的中老年人。2家醫院檢出的氣單胞菌屬中均以嗜水氣單胞菌為主，其次為豚鼠氣單胞菌、維隆氣單胞菌溫和亞種，其他檢出的菌種包括維隆氣單胞菌維隆亞種、殺鮭氣單胞菌和斑點氣單胞菌。541株氣單胞菌的標本來源主要為膽汁和血液，分別占31.98%和19.78%，其他標本類型包括痰液、引流液、分泌物等。2家醫院氣分離單胞菌屬的標本類型有統計學差異，解放軍總醫院第五醫學中心前五位的標本類型為血液、糞便、腹水、膽汁和引流液，寧夏醫科大學總醫院的標本類型主要為膽汁、痰液、分泌物、引流液、血液。氣單胞菌屬對碳青霉烯類、氨基糖苷類、喹諾酮類抗菌藥物的耐藥率均較低，3種氣單胞菌均未檢測到阿米卡星耐藥的菌株。豚鼠氣單胞菌對頭孢類及單環類抗菌藥物的耐藥率在寧夏醫科大學總醫院明顯高于解放軍總醫院第五醫學中心。結論 2家醫院檢出的氣單胞菌屬的菌種組成類似，但在臨床分布及耐藥性間均存在差異性，每個醫院都需要監測本地區氣單胞菌的流行情況及耐藥性，為氣單胞菌的診療提供參考。

關鍵詞：氣單胞菌屬；菌種分布；臨床分布；耐藥性

中圖分類號：R978 文獻標志碼：A

Distribution characteristics and antimicrobial resistance of Aeromonas genus in two hospitals in Beijing and Ningxia

Tao Jia1，2， Chen Suming3， Wang Wen1，2， Li Gang1，2， Wang Huan3， Wang Liang1，2， Ma Tingting1，2，

Qu Fen3， Jia Wei1，2， and Wang Liru1，2

（1 Center of Medical Laboratory， General Hospital of Ningxia Medical University， Yinchuan 750004; 2" Ningxia Key Laboratory of Clinical and Pathogenic Microbiology， General Hospital of Ningxia Medical University， Yinchuan 750004; 3 Clinical Laboratory， Fifth Medical Center of Chinese PLA General Hospital，Beijing 100039）

Abstract Objective To analyze the clinical distributions and drug resistance characteristics of clinical Aeromonas isolates in two hospitals in Beijing and Ningxia， the Fifth Medical Center of Chinese PLA General Hospital and General Hospital of Ningxia Medical University， and provide references for clinical treatment， prevention and control of Aeromonas infection. Methods A retrospective analysis method was used to analyze the age， gender， bacterial species distribution， specimen type distribution， and antibiotic resistance rate of Aeromonas species in two hospitals from January 2013 to December 2022. Whonet5.6 and GraphPad Prism 8 software were used to analyze the data. Results Over the past decade， a total of 541 strains with 198 and 343 Aeromonas strains were isolated from the two hospitals in Beijing and Ningxia， respectively. The patients were more likely to be male than female and tended to be older than 50. Similarly， A. hydrophila was the most common species， followed by A. caviae and A. veronii biovar sobria in two hospitals. Other detected strains include A. veronii subspecies， A. salmoicida， and A. punctata. The specimens of 541 strains of Aeromonas mainly come from bile and blood， accounting for 31.98% and 19.78%， respectively. Other specimen types include sputum， shunt fluid， secretions， etc. There is a statistical difference in the types of specimens of the genus Aeromonas isolated from two hospitals. The five top specimens were blood， feces， abdominal fluid， bile， and shunt fluid for the Fifth Medical Center of Chinese PLA General Hospital， and bile， sputum， secretion， shunt fluid， and blood for the General Hospital of Ningxia Medical University. Aeromonas strains in this study showed high susceptibility rates to carbapenems， aminoglycosides and quinolones. None of the Aeromonas isolates were found to be resistant to amikacin. The resistance rate of A. caviae to cephalosporins and monocyclic antibiotics was significantly higher in the General Hospital of Ningxia Medical University than in the Fifth Medical Center of Chinese PLA General Hospital. Conclusion The strain composition of Aeromonas strains detected in the two hospitals was similar， but there was a significant difference in clinical distribution and drug resistance. It is necessary to monitor the prevalence of Aeromonas species and drug resistance for Aeromonas infection diagnosis and treatment.

Key words Aeromonas strains; Species distribution; Clinical distribution; Resistance rate

氣單胞菌屬屬于γ-變形菌綱（Gamma-Proteo-bacteria）、氣單胞菌目（Aeromonadales）、氣單胞菌科（Aeromonadaceae），是一類革蘭陰性短桿狀兼性厭氧菌，絕大多數有極端單邊毛，廣泛分布于自然界中，尤其是水源中，包括地下水、河流、湖泊、海水等[1-2]。氣單胞菌主要引起海產品感染，是人類的條件致病菌，可引起人類腸道內和腸道外疾病，如腹瀉、急性胃腸炎、食物中毒、肺炎、傷口感染、蜂窩織炎、腹膜炎、壞死性筋膜炎和敗血癥等[3]。隨著氣單胞菌的感染病例的增加和抗生素的廣泛使用，氣單胞菌屬的耐藥情況也日益嚴重。近些年，氣單胞菌引起的感染越來越多，不同地區分離的氣單胞菌屬細菌在菌種分布、標本來源、耐藥性有一定的差別。了解不同地區氣單胞菌屬感染的流行特征對臨床診療及預防控制有重要意義。本研究對北京與寧夏地區2家三甲醫院臨床分離氣單胞菌屬細菌的流行特征和藥敏情況進行比較分析，旨在為氣單胞菌感染的診療及防控提供一定的理論依據。

1 材料與方法

1.1 菌株來源

采用回顧性分析方法，選擇2013年1月—2022年12月共10年間解放軍總醫院第五醫學中心（下稱醫院一）和寧夏醫科大學總醫院（下稱醫院二）臨床患者標本中分離的氣單胞菌屬（剔除同一患者重復菌株），統計2家醫院氣單胞菌屬的臨床分布及耐藥率。

1.2 細菌分離及鑒定

細菌培養按第4版《全國臨床檢驗操作規程》，細菌鑒定采用Vitek 2 Compact系統（法國Bio-Merieux）或VITEK MS質譜儀（法國Bio-Merieux）輔以生化試驗鑒定到種。

1.3 藥敏試驗

采用瓊脂紙片擴散法（K-B法）或Vitek 2 Compact細菌鑒定儀進行藥敏試驗，敏感性判定參照美國臨床實驗室標準化研究所（CLSI M45）標準。質控菌株為：大腸埃希菌（ATCC25922） 、大腸埃希菌（ATCC 35218）、金黃色葡萄球菌（ATCC25923）、銅綠假單胞菌（ATCC27853），藥敏紙片購自英國Oxoid公司。

1.4 統計學方法

使用Whonet 5.6軟件對患者性別、年齡、菌種分布、標本類型分布及菌株對抗菌藥物的耐藥率進行統計，計數資料采用株數或構成比表示，使用GraphPad Prism 8軟件進行數據分析，兩組間比較采用Fisher's精確檢驗或χ2檢驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 患者年齡與性別分布

2013—2022年間，本研究中2家醫院共檢查氣單胞菌屬541株（剔除重復后），男性患者（70.24%）多于女性患者（29.76%）。醫院一臨床分離氣單胞菌屬為198株，來自198例患者，其中男性154例（77.78%），女性44例（22.22%）；中位年齡為53歲（1～88歲）。醫院二臨床分離氣單胞菌屬為343株（剔除重復后），來自343例患者，其中男性226例（65.89%），女性117例（34.11%）；中位年齡為65歲（0～96歲）。2家醫院的患者年齡主要集中在50歲以上。2家醫院的患者性別和年齡分布均存在統計學差異，見表1。

2.2 氣單胞菌屬菌種構成

541株氣單胞菌屬中排名前3位的菌種為嗜水氣單胞菌（227株）、豚鼠氣單胞菌（148株）、維隆氣單胞菌溫和亞種（103株），分別占41.96%、27.36%和19.04%。2家醫院檢出的氣單胞菌屬中均以嗜水氣單胞菌為主，分別為76株（38.38%）和151株（44.02%），其次為豚鼠氣單胞菌、維隆氣單胞菌溫和亞種，分別為64株（32.32%）和84株（24.49%），44株（22.22%）和59株（17.20%），其他檢出的菌種包括維隆氣單胞菌維隆亞種、殺鮭氣單胞菌和斑點氣單胞菌。醫院二分離的殺鮭氣單胞菌（P=0.02）和斑點氣單胞菌（Plt;0.0001）的構成比明顯高于醫院一，而維隆氣單胞菌維隆亞種（P=0.04）明顯低于醫院一，差異有統計學意義，見表2。

2.3 氣單胞菌屬標本類型分布

541株氣單胞菌分離自不同標本類型，主要為膽汁和血液，分別占31.98%和19.78%，其他標本類型包括痰液、引流液、分泌物、糞便、腹水等。2家醫院臨床分離氣單胞菌屬的標本類型有所不同，醫院一前五位的標本類型為78份血液、37份糞便、31份腹水、29份膽汁、9份引流液，分別占39.39%、18.69%、15.66%、14.65%、4.55%。其他標本類型有胸水、痰液、尿液等。醫院二的標本來源以膽汁為主，共144份占41.98%，其次為45份痰液、38份分泌物、31份引流液、29份血液，分別占13.12%、11.08%、9.04%、8.45%。大多數標本類型的構成比在2家醫院間均具有統計學差異（P＜ 0.05），見表3。

2.4 氣單胞菌屬對常用抗菌藥物的耐藥率比較

對排名前3位的氣單胞菌進行耐藥率統計，結果顯示嗜水氣單胞菌、豚鼠氣單胞菌、維隆氣單胞菌溫和亞種對氨基糖氨類的耐藥率較低，對慶大霉素和妥布霉素的耐藥率為2.5%～7.5%和9.3%～11.4%，沒發現對阿米卡星耐藥的菌株。β-內酰胺類藥物中，3種菌對頭孢類藥物的耐藥率為2.6%～37.8%，對亞胺培南的耐藥率相類似（6.1%～6.9%），對美羅培南的耐藥率差別較大，嗜水氣單胞菌為13.5%，豚鼠氣單胞菌為4.3%，未出現對美羅培南耐藥的維隆氣單胞菌溫和亞種。3種菌對喹諾酮類藥物（環丙沙星和左氧氟沙星）的耐藥率為2.8%～15.7%。進一步對2家醫院3種氣單胞菌的耐藥率進行比較，結果顯示醫院一檢出嗜水氣單胞菌對亞胺培南（P=0.0454）的耐藥率高于醫院二，而頭孢呋辛（P=0.0292）的耐藥率低于醫院二，差異有統計學意義。醫院一豚鼠氣單胞菌對頭孢呋辛（P=0.0063）、頭孢他啶（P=0.0047）、頭孢曲松（P=0.0071）、頭孢吡肟（P=0.0119）和氨曲南（P=0.0242）的耐藥率低于醫院二。醫院一維隆氣單胞菌溫和亞種對頭孢他啶（P=0.0079）和氨曲南（P=0.0438）的耐藥率低于醫院二，差異具有統計學意義，見表4～6。

3 討論

氣單胞菌是我國水產養殖產業中細菌性傳染病的重要病原體之一，可引起水產動物多種疾病，大部分對氣單胞菌耐藥性和毒力基因的研究主要集中在水產動物中。近年來，氣單胞菌引起人體感染性疾病的報道逐漸增多，感染人體的氣單胞菌主要有嗜水氣單胞菌、豚鼠氣單胞菌、維隆氣單胞菌溫和生物型，并且隨著抗生素的廣泛使用，氣單胞菌屬的耐藥率也逐漸增高。本研究回顧性分析了北京地區和寧夏地區2家醫院臨床分離氣單胞菌的臨床分布及耐藥特征。

2家醫院的感染患者男性均多于女性，與國內外報道一致，但是不同醫院報道的比例差別也較大，傅美芹等[4]報道男性患者占68.3%，與本研究中醫院二（65.89%）相近，但低于醫院一的77.78%，而Kaki等[5]報道的嗜水氣單胞菌感染患者男性比例為91.7%。氣單胞菌屬感染的患者主要為大于50歲的中老年人，但患者比例最高的年齡段，不同研究略有不同，本研究中醫院一患者最多的年齡段位為51～60歲，而醫院二為61～70歲。這可能由于老年人群免疫力降低，常伴有基礎疾病而更容易感染。一項研究顯示80%以上的患者有基礎疾病，主要為腫瘤和慢性病[6]。另一項研究也顯示氣單胞菌屬引起菌血癥的患者中大于50%為65歲以上的老年人，并且大多數患者有基礎疾病，例如腫瘤、肝硬化、糖尿病、或使用免疫抑制劑等[7]。這提示，臨床診療過程中遇到此類患者應高度警惕氣單胞菌屬感染。

本研究中，2家醫院檢出的氣單胞菌主要為嗜水氣單胞菌、豚鼠氣單胞菌和維隆氣單胞菌溫和亞種，與國內外研究報道一致[8-10]。本研究中檢出的其他菌種有維隆氣單胞菌維隆亞種、殺鮭氣單胞菌和斑點氣單胞菌，這3種菌在醫院二檢出的數量高于醫院一，這可能由于醫院二納入研究的菌株數更多，故檢出的菌種也更豐富。

對菌株來源的標本類型進行分析發現，2家醫院的標本類型存在較大差異，醫院一最常見的標本類型為血液，占39.39%，其次是糞便，而醫院二最多的標本是膽汁，占41.98%，其次是痰液和分泌物。方海英等[11]報道浙江地區腸道外分離氣單胞菌的標本來源最多的也是血液標本，與醫院一類似，其次是痰液和膽汁；而重慶地區的一項研究顯示腸道外分離氣單胞菌主要來源于手術傷口分泌物，占30.4%，其次是膽汁和尿液[12]。這可能與不同醫院，收治的患者類型不同有關，因此，不同醫院都需要監測本醫院細菌的流行特征。氣單胞菌感染人類以腸道內感染為主，通常表現為腹瀉，國內研究顯示腹瀉病原菌的分布中，沿海地區氣單胞菌占15.42%，內陸地區占4.2%[13]。本研究中寧夏地區的菌株沒有腸道來源的，雖然寧夏屬于內陸地區，氣單胞菌引起腸道感染的比例較低，但在腹瀉患者診斷時仍需關注氣單胞菌的感染。

對嗜水氣單胞菌、豚鼠氣單胞菌和維隆氣單胞菌溫和亞種的耐藥率進行統計分析，3種菌對抗菌藥物的耐藥率在2家醫院間總體耐藥趨勢類似，氣單胞菌對抗菌藥物的耐藥率較低。進一步對2家醫院3種菌的耐藥率進行比較發現，醫院二的菌種耐藥率更高，氨基糖苷類、喹諾酮類、復方磺胺甲惡唑的耐藥率在2家醫院的菌種中沒有差異，但頭孢類和單環類藥物的耐藥率在醫院二高于醫院一，尤其是豚鼠氣單胞菌，對頭孢吡肟、頭孢曲松、頭孢他啶和氨曲南的耐藥率均高于醫院一，差異有統計學意義。這可能是因為醫院二在患者經驗性治療時使用頭孢類藥物較多造成的。2家醫院的3種菌種菌出現了碳青霉烯類耐藥的菌株， Xu等[14]

報道血流感染分離的氣單胞菌對碳青霉烯類的耐藥率高達70%，遠高于本研究報道，這提示雖然本研究中耐藥率還較低，但依然需要引起注意，警惕碳青霉烯類耐藥率的增加。Sakurai等[15]報道的一項多中心研究中，不同菌種對碳青霉烯類的耐藥率不同，豚鼠氣單胞菌對亞胺培南的非敏感率為1%，與本研究類似，而嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌對亞胺培南的非敏感率在50%以上。CphA是最初分離自嗜水氣單胞菌的一類金屬β-內酰胺酶，由cphA基因編碼，能水解碳青霉烯類抗生素，常被認為是引起氣單胞菌對碳青霉烯類耐藥的機制[16]。cphA基因在氣單胞菌屬的不同菌種間存在特異性，在嗜水氣單胞菌、維隆氣單胞菌維隆亞種、簡氏氣單胞菌和殺鮭氣單胞菌中都檢測到，但豚鼠氣單胞菌中未檢測到[17]。Sinclair

等[18]對100株耐碳青霉烯類氣單胞菌株檢測cphA基因，77%菌株攜帶cphA基因，其中90%的嗜水氣單胞菌、100%的維隆氣單胞菌維隆亞種攜帶cphA基因，但沒有發現攜帶cphA基因的豚鼠氣單胞菌。

綜上所述，不同地區臨床分離氣單胞菌屬細菌在臨床分布及耐藥性等方面都存在差異，各地區需持續監測氣單胞菌屬的流行特征及耐藥性，為氣單胞菌感染的診療及預防控制提供參考。

參 考 文 獻

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