不同殺菌劑對小白菜軟腐病菌室內活性的影響及田間防效試驗

摘 要：小白菜軟腐病是小白菜夏季栽培中的常見病害。為了篩選出對小白菜軟腐病具有顯著性防效的藥劑，本試驗采用牛津杯抑菌圈測定法，通過建立回歸方程，進行EC50值分析，測定了6種高效低毒的殺菌劑對小白菜軟腐病菌的離體抑菌效果及防治效果。結果表明，20%春雷霉素水分散粒劑（WG）、3%中生菌素可濕性粉劑（WP）、50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑（SP）、30%噻唑鋅懸浮劑（SC）對軟腐病菌均具有抑菌活性，且田間軟腐病防效較好，可作為防治小白菜軟腐病的優選殺菌劑。

關鍵詞：小白菜軟腐病；殺菌劑；EC50值；防效

中圖分類號：S634 文獻標志碼：A 文章編號：1008-1038（2024）11-0058-05

DOI：10.19590/j.cnki.1008-1038.2024.11.011

The Effect on Indoor Biological Activity of Different Bactericides against Pectobacterium carotovorum of Pakchoi Cabbage and"Field Control Efficiency

GAO Tianyi， REN Xiliang， MENG Qiufeng， WANG Jie

（Ningbo Academy of Agricultural Sciences/Ningbo Key Laboratory of Characteristic Horticultural Crops"in Quality Adjustment and Resistance Breeding， Ningbo 315040， China）

Abstract： Soft rot is a common disease in summer cultivation of pakchoi cabbage. To select the suitable bactericides for control of soft rot of pakchoi cabbagee by Pectobacterium carotovorum， oxford-cup antimicrobial method was used to establish the regression equation and get EC50 value， further analyzed combined with disease incidences， disease index and control effect in field. Results showed that kasugamycin 20% WG， zhongshengmycin 3% WP， chloroisobromine cyanuric acid 50% SP and zinc thiazole 30% SC had antibacterial activity against soft rot bacteria， and the control effect of soft rot was good， they could be used as the optimal bactericides for controlling soft rot.

Keywords： Pakchoi cabbage soft rot; bactericides; EC50 value; control effect

小白菜，學名不結球白菜（Brassica campestris ssp. Chinensis Makina），又名青菜、雞毛菜、油菜等，是我國重要的栽培蔬菜，具有生長周期短、種類多樣、適應性廣、可周年栽培供給和經濟效益高等特點，在蔬菜保障供應中起到了重要作用，是人們喜愛的綠葉蔬菜之一[1]。軟腐病是小白菜生產中發生的一種重要病害，在我國大部分產區廣泛發生，該病在小白菜全生育期均可造成危害，高溫高濕環境利于病菌侵染，發病初期葉基部出現水漬狀斑點，后期小白菜莖基部腐爛，嚴重時導致整株腐爛死亡，造成減產甚至絕產[2]。小白菜生長喜冷涼氣候條件，在夏季高溫栽培時往往出現生長緩慢、抗性降低的情況[3]，此時軟腐病最容易爆發，防治難度最大。

使用化學殺菌劑是防治小白菜軟腐病最直接有效的方法。長期以來由于軟腐病的防治用藥種類不合理、防治藥劑單一等問題，選擇高效低毒的殺菌劑對于小白菜軟腐病的防治尤為重要。傳統上常用的防治藥劑為農用鏈霉素及銅制劑，然而由于農用鏈霉素及銅制劑長期大量使用，造成病原菌易產生抗藥性，且鏈霉素能夠在人體內富集，2016年后已禁止在農作物上使用[4]。總之不同藥劑對于軟腐病的防治機制和效果不同，目前對小白菜軟腐病藥劑防效研究有限，且多聚焦于傳統抗生素和銅制劑，針對新型殺菌劑的防效研究較少，毒力效果與田間防效研究也亟需加強。本研究選擇常用的6種高效低毒殺菌劑，測定了不同濃度殺菌劑對小白菜軟腐病菌室內抑制效果，并開展田間藥效試驗，比較了各藥劑間的防效，以期篩選出適用于軟腐病防治的藥劑。

1 材料與方法

1.1 試驗材料及供試藥劑

軟腐病病原菌（Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum），寧波市農業科學研究院蔬菜所分離鑒定。20%春雷霉素水分散粒劑，四川海潤作物科學技術有限公司；20%噻森銅懸浮劑，浙江東風化工有限公司；3%中生菌素可濕性粉劑，深圳諾普信農化股份有限公司；30%噻唑鋅懸浮劑，浙江新農化工股份有限公司；50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑，南京南農農藥科技發展有限公司；80%乙蒜素乳油，開封大地農化生物科技有限公司。

1.2 菌懸液配制及不同殺菌劑室內毒力測定

用牛津杯法測定不同殺菌劑對小白菜軟腐病菌的影響。將-80 ℃保存的軟腐病菌在NA平板上劃線活化，置于28 ℃培養箱中培養48 h，在平板上挑取單菌落接種在NB培養基中，28 ℃、180 r/min振蕩培養12 h，配制成軟腐病菌菌懸液，后將菌懸液均勻涂布在NA平板上，制成含菌平板。用鑷子將已滅菌的牛津杯（外徑8 mm）均勻地放在含菌平板上，每皿放置7只牛津杯。將6種殺菌劑分別用無菌水配制成不同質量濃度的液劑，分別吸取各濃度殺菌劑200 μL加入牛津杯內，以加入清水的處理為對照。每個處理重復3次。置于28 ℃的恒溫培養箱中，48 h后測量抑菌圈直徑，并按照公式（1）計算每種藥劑的抑菌率。

抑菌率/%=×100（1）

將抑菌率轉化為抑菌率概率值[5]，以藥劑濃度的對數值為橫坐標，以抑菌率概率值為縱坐標，計算每個藥劑的毒力回歸方程y=a+bx，計算供試藥劑對供試菌株的毒力回歸方程 y=a+bx、相關系數r及有效抑制中濃度（EC50值）。以EC50值衡量不同殺菌劑對軟腐病菌的毒力。1.3 不同殺菌劑對田間小白菜軟腐病發生情況影響及防效

試驗地點位于浙江省寧波市鄞州區高新農業技術試驗園區，參試小白菜品種為‘甬青8號’，為寧波豐登種業科技有限公司生產。試驗按照《農藥田間藥效試驗準則》（GB/T 17980.114—2004）執行，略有修改。選取常年連作小白菜、軟腐病近幾年發病嚴重的塑料薄膜大棚，將小白菜栽培于大棚內，畦寬（連溝）1.2 m，溝渠暢通，小區面積10 m2，生產示范面積共333 m2。土壤肥力中等，pH 7.1。

每個處理設定3個小區，以噴施清水作為對照，不同殺菌劑的用量以各商品包裝標注的處理用量為準，詳見表1，分別在移栽后的第7天及第14天進行施藥處理，連續施藥2次，試驗期間不施用其他殺菌劑、除草劑和殺蟲劑，只進行常規管理和基本的農事操作，在第2次施藥后第2天調查不同處理間軟腐病發病情況，每個小區統計50株。對小白菜軟腐病進行病害分級，并根據公式（2）（3）（4）分別計算軟腐病發病率、病情指數及防治效果。

病害等級分級標準：0級，無癥狀；1級，始見病斑，1～2片葉發病；3級，1/3以下腐爛；5級，1/3～1/2腐爛；7級，1/2至全株腐爛。

發病率/%=×100（2）

病情指數=×100（3）

防治效果/%=×100（4）

1.4 數據處理

用DPS數據處理系統（v20.00a版）對數據進行統計分析，多重比較分析采用LSD法分析。

2 結果與分析

2.1 不同殺菌劑對小白菜軟腐病菌的室內抑制作用

從表2可以看出，6種殺菌劑在NA培養基平板上對軟腐病菌均表現出一定的毒力，對病菌產生了不同程度的抑制作用，各藥劑的抑菌作用隨著處理濃度的增加而增加，其中抑菌率最高的為T5及T2，最大質量濃度下抑菌率分別為82%和78%。T6、T7、T3、T4最大質量濃度下抑菌率分別為60%、72%、64%和68%。

2.2 不同殺菌劑對小白菜軟腐病菌的室內生物活性

如表3所示，6種殺菌劑處理的質量濃度對數與對應的抑菌率概率值呈正相關的線性關系，同時回歸方程的相關系數r均在0.90以上，表明試驗設計中兩個變量的擬合度高，生物活性方程得出的各藥劑的EC50值具有較高的可靠性。EC50值由高至低順序為T3gt;T4gt;T2gt;T5gt;T6gt;T7。其中T7的EC50值最低，為3.16 μg/mL，對軟腐病菌的毒力最強。而T3的EC50 值為7 849.32 μg/mL，對軟腐病菌的毒力最弱，T1處理無室內抑菌生物活性。

2.3 不同殺菌劑對小白菜軟腐病的田間防效

不同殺菌劑對小白菜軟腐病田間防效的影響如表4所示，根據每種藥劑商品包裝上的最適宜用量進行田間施用，6種供試藥劑均有一定的防治效果，且不同殺菌劑之間的發病率、病情指數及防效間存在差異。防效由強至弱為T7gt;T6gt;T5gt;T4gt;T3gt;T2。T7處理的發病率及病情指數均為最低，分別為44.67%和32.29，防效最高，為38.62%。與T1處理相比，T2與T3的發病率及病情指數無顯著性差異。T7、T6、T5、T4之間防效無顯著性差異，但與T3、T2之間有顯著差異。所有處理均未發現藥害情況。

3 結論與討論

不同的藥劑防治病菌的機制不同，目前常用防治細菌性病害的藥劑主要包括銅制劑、抗生素類藥劑及其他類型藥劑等[6]。本研究選用了不同類型的殺菌劑進行防效試驗，其中春雷霉素和中生菌素屬于抗生素類藥劑，噻森銅屬于銅制劑，乙蒜素屬于植物性誘抗劑，氯溴異氰尿酸屬于氧化型消毒劑。田間試驗結果表明，乙蒜素及噻森銅處理后軟腐病發病率及病情指數與CK處理無顯著性差異，且這兩種藥劑的防效差異不顯著；而春雷霉素、中生菌素、氯溴異氰尿酸處理后的發病率及病情指數與CK處理均有顯著性差異，表明抗生素類藥劑及氧化型消毒劑防效最佳，推測防治軟腐病最佳的方式是通過抑菌作用殺滅細菌。

噻菌銅和噻唑鋅均具有噻唑基團，能夠通過植物內吸和金屬離子殺菌的方式進行病害防治[7-8]。但針對這兩種殺菌劑對軟腐病的毒力測定及防效比較還未有研究。本研究發現，在室內生物活性測定及田間防效試驗中，30%噻唑鋅SC的EC50值、田間軟腐病發病率及病情指數均低于20%噻森銅SC，防效高于20%噻森銅SC，但無顯著性差異，前人研究表明由于銅化合物殺菌劑在田間長期使用，能夠使病原菌出現耐銅現象[9]，推測本研究所用軟腐病菌對銅離子有一定的耐受能力，而對鋅離子的耐受能力較弱，因此銅制劑在田間小白菜軟腐病的防治中可能會存在防效不佳的情況，可用噻唑鋅替代噻森銅進行防治。30%噻唑鋅SC的EC50值高于20%春雷霉素WG、3%中生菌素WP和50%氯溴異氰尿酸SP，但田間防效并無顯著性差異，推測噻唑鋅雖然毒性弱，但噻唑基團的通過植物內吸作用一定程度上增強了田間植株對軟腐病菌的防護作用。

乙蒜素是一種植物仿生農藥，是大蒜素提取物，在許多病原菌防治中能起到很好的防效，包括馬鈴薯晚疫病、大豆細菌性斑點病、獼猴桃細菌性潰瘍病等[10-13]。本研究中發現，80%乙蒜素EC的EC50值為55.76 μg/mL，對軟腐病菌具有毒性作用，且毒力高于30%噻唑鋅SC（EC50值為1 495.17 μg/mL），但對田間軟腐病的防效最差。韓鳳英等[14]研究發現大白菜軟腐病的田間防治過程中，氨基·乙蒜素微乳劑防效最差。本文研究與前人報道一致，推測原因可能為乙蒜素屬于在蔬菜和土壤中易消解的農藥，防效期短[15]。軟腐病菌在土壤中存活時間較長，具有持續侵染植株的能力，乙蒜素雖然具有一定的抑菌能力，但田間施用后分解過快，防治期較短。

篩選適宜防治軟腐病的高效低毒藥劑，對軟腐病的綠色防控具有重要意義。目前已有研究進行了白菜軟腐病的室內毒力測定，但并未進一步進行相關田間防效試驗[16]。本研究通過室內毒力測定及田間防效試驗，對6種殺菌劑的EC50值、田間病情指數、防效指標進行了綜合分析，發現20%春雷霉素WG、3%中生菌素WP、50%氯溴異氰尿酸SP及30%噻唑鋅SC對防治軟腐病的防治效果較好，可作為防治小白菜軟腐病的優選殺菌劑。

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基金項目：寧波市公益類科技計劃項目（2021S072）

第一作者簡介：高天一（1987—），男，助理研究員，博士，主要從事十字花科蔬菜抗病育種研究工作