豬圓環病毒2型-豬肺炎支原體二聯滅活疫苗（圓支優）臨床免疫效力試驗和最佳免疫日齡探索

摘要：[目的] 為客觀、科學地評價圓支優（豬圓環病毒2型-豬支原體肺炎二聯滅活疫苗）的免疫效力，并探索最佳免疫日齡。[方法] 本試驗選取圓支優分別免疫7、14和21日齡仔豬各221頭、216頭和209頭，同類商品疫苗分別免疫7、14和21日齡仔豬各217頭、211頭和202頭，空白對照組為205頭仔豬，不免疫2種疾病的相關疫苗。各組于相同條件下隔離飼養，觀察并統計免疫應激反應、豬群健康度、生產性能指標等進行臨床免疫效力評價。各組隨機選擇40頭豬，于40、60、100日齡采集全血和喉拭子分別用于豬圓環病毒和豬肺炎支原體的病原檢測，并統計豬圓環病毒感染和豬肺炎支原體排菌情況以進行實驗室評價。[結果] 圓支優免疫后無任何應激反應，同類商品疫苗7、14日齡免疫后分別有部分豬只出現應激現象；圓支優7、14和21日齡免疫組的成活率分別為88.24%、89.35%和88.52%，均高于同類商品疫苗（分別為87.56%、87.68%和88.12%），2組均遠高于空白對照組（81.46%）；圓支優7、14日齡免疫組的呼吸道疾病發生率分別為2.71%和2.31%，均低于同類商品疫苗（分別為4.61%和3.79%），21日齡免疫組為3.83%，略高于同類商品疫苗（3.47%），2組均遠低于空白對照組（15.61%）；圓支優組和同類商品疫苗組的平均日增重分別為0.47 kg/頭和0.46 kg/頭，均高于空白對照組（0.43 kg/頭），料肉比分別為1.76和1.82，2組差異較為顯著，均遠低于空白對照組（1.93）；圓支優7、14日齡免疫組至試驗結束2種病原檢測結果均為陰性，21日齡免疫組至60日齡時，2種病原檢測結果均為陰性，但100日齡檢測時分別有2頭豬圓環病毒陽性和1頭豬肺炎支原體陽性，陽性率分別為5%和2.5%；同類商品疫苗7、14和21日齡免疫組至60日齡時2種病原檢測結果均為陰性，至100日齡檢測時各組分別有4、7、6頭為豬圓環病毒陽性和2、2、3頭為豬肺炎支原體陽性，陽性率分別為10%、17.5%、15%和5%、5%、7.5%；空白對照組于40、60和100日齡檢測時，分別有9、6、4頭為豬圓環病毒陽性以及6、7、10頭為豬肺炎支原體陽性，陽性率分別為22.5%、15%、10%和15%、17.5%、10%。[結論] 與同類商品疫苗相比，7～14日齡免疫圓支優，可更安全、有效和持久的預防豬圓環病毒和豬肺炎支原體感染，顯著提高豬群的健康度和生產性能指標，同時有效降低勞動強度、注射應激以及非瘟等直接接觸性疾病的感染幾率，是目前養豬生產中防控2種疾病的優選疫苗。

關鍵詞：圓支優；同類商品疫苗；臨床免疫效力；最佳免疫日齡

豬圓環病毒（PCV）有PCV-1、PCV-2、PCV-3和PCV-4型等4個血清型，其中以PCV-2臨床危害最為嚴重，可造成感染豬的嚴重免疫抑制，易繼發或并發其他病原體，使病情進一步加劇和復雜化，給養豬業造成嚴重的經濟損失[1]。豬肺炎支原體（M.hyo）可使支氣管中纖毛凝結成束、脫落，喪失擺動功能，從而導致支原體肺炎，繼而引發一系列復雜的呼吸系統疾病，嚴重影響患豬飼料轉化率及生長發育，堪稱豬場利潤的隱形殺手。目前，疫苗免疫是防控上述2種疾病最經濟和最有效的手段[2-3]。鑒于生產實踐中2種疾病混合感染率較高，疫苗接種時間也較為接近，免疫持續期均要求持久，因此，豬圓環病毒2型-豬支原體肺炎二聯滅活疫苗（以下簡稱圓支二聯疫苗）不僅可互助增效，還可有效降低勞動強度、注射應激以及非瘟等直接接觸性疾病的感染幾率，因此，為越來越多的豬場所關注和選用。本研究旨在對免疫不同圓支二聯疫苗的豬群進行跟蹤，通過臨床生產和實驗室檢測數據來評估疫苗免疫效果，為臨床選擇疫苗提供參考，同時驗證不同免疫日齡的免疫效力評估，以探索最佳免疫日齡，為其臨床科學應用提供指導依據。

1 材料和方法

1.1 疫苗

圓支二聯疫苗（商品名：圓支優）由北京華夏興洋生物科技有限公司提供，同類商品疫苗購自國內某生物制品公司。

1.2 試劑和儀器

豬圓環病毒2型和豬支原體肺炎的熒光定量PCR檢測試劑盒以及熒光定量PCR儀均由河南農業大學動物疫病診斷中心提供。

1.3 實驗動物

圓支優試驗組7、14和21日齡仔豬分別為221頭、216頭和209頭，同類商品疫苗組7、14和21日齡仔豬分別為217頭、211頭和202頭，空白對照組205頭仔豬，共計1 481頭，均由河南省某養殖集團公司提供。

1.4 試驗設計和免疫

詳見表1。

1.5 臨床生產數據統計

各組于相同條件下隔離飼養。試驗前稱量平均初始重，免疫后觀察、統計仔豬6小時內的各種應激反應。整個試驗期間每日仔細觀察、記錄豬群狀態及各種生產指標，試驗結束后全面評估豬群健康狀況并計算平均日增重及料肉比。

1.6 實驗室檢測

各組隨機選擇40頭豬，分別于40、60、100日齡采集全血和喉拭子，送至河南農業大學動物疫病檢測中心開展豬圓環病毒和豬肺炎支原體的病原檢測，統計豬圓環病毒感染和豬肺炎支原體排菌情況。

1.7 分析與總結

對圓支優進行臨床免疫效果評估，并驗證不同免疫日齡的免疫效力，從而探索最佳免疫日齡。

2 結果

2.1 臨床生產數據統計

第一，免疫應激結果。結果見表2。圓支優組7、14和21日齡免疫后均無任何應激反應；同類商品疫苗組于7、14日齡免疫后各有2、1頭試驗豬出現嘔吐和臥地不起，應激比例分別為0.92%和0.47%。空白對照組無異常。

第二，豬群健康度。結果見表3。圓支優7、14和21日齡免疫組分別成活195頭、193頭和185頭，成活率分別為88.24%、89.35%和88.52%；同類商品疫苗7、14和21日齡免疫組分別成活190頭、185頭和178頭，成活率分別為87.56%、87.68%和88.12%；空白對照組成活167頭，成活率為81.46%；結果顯示，圓支優組成活率明顯高于同類商品疫苗組，二者均遠高于空白對照組。圓支優7、14和21日齡免疫組分別有6、5和8頭發生呼吸道疾病，疾病發生率分別為2.71%、2.31%和3.83%；同類商品疫苗7、14和21日齡免疫組分別有10、8和7頭發生呼吸道疾病，疾病發生率分別為4.61%、3.79%和3.47%；空白對照組有32頭發生呼吸道疾病，疾病發生率為15.61%。結果顯示，圓支優組7日齡和14日齡呼吸道疾病發生率明顯低于同類商品疫苗組，21日齡免疫組略高于同類商品疫苗組，但二者均遠低于空白對照組。

第三，生產性能指標結果。結果見表4。圓支優組和同類商品疫苗組的平均日增重分別為0.47 kg/頭和0.46 kg/頭，2組差異不顯著，均高于空白對照組（0.43 kg/頭）；圓支優組和同類商品疫苗組的料肉比分別為1.76和1.82，2組差異較為顯著，均遠低于空白對照組（1.93）。

2.2 實驗室檢測結果

結果見表5和表6。圓支優7、14日齡免疫組至試驗結束豬圓環病毒陽性和豬肺炎支原體的病原檢測結果均為陰性，21日齡免疫組至60日齡時，2種病原檢測結果均為陰性，但100日齡檢測時分別有2頭豬圓環病毒陽性和1頭豬肺炎支原體陽性，陽性率分別為5%和2.5%；同類商品疫苗7、14和21日齡免疫組至60日齡時2種病原檢測結果均為陰性，至100日齡檢測時各組分別有4、7、6頭為豬圓環病毒陽性和2、2、3頭為豬肺炎支原體陽性，陽性率分別為10%、17.5%、15%和5%、5%、7.5%；空白對照組于40、60和100日齡檢測時，分別有9、6、4頭為豬圓環病毒陽性以及6、7、10頭為豬肺炎支原體陽性，陽性率分別為22.5%、15%、10%和15%、17.5%、25%。結果顯示，與空白對照組相比，接種圓支二聯疫苗，均在60日齡內有效抵抗感染豬圓環病毒陽性和豬肺炎支原體感染；與同類商品疫苗相比，圓支優免疫效果更好，保護期更長，尤其是7、14日齡免疫組至100日齡時仍未感染2種病原，免疫效果極佳，而21日齡免疫組則存在極個別感染。

3 討論

本研究中，整個試驗周期內各組試驗豬被分別飼養于完全獨立的不同豬舍內，試驗過程嚴格按照豬場正常養殖流程進行，未發生重大烈性傳染性疾病，因此，可最大程度排除其他因素對本研究結果的干擾。

近年來圓支二聯疫苗逐漸得到市場認可，但免疫效果和安全性嚴重參差不齊。當前生產實踐中以“豬群健康度+生產性能指標+抗原檢測”相結合作為主導來進行2種疫苗的免疫效果評估[4-5]。本試驗選用的圓支優免疫豬只后，成活率明顯高于同類商品疫苗，免疫保護期則更為持久，呼吸道疾病發生率和料肉比則明顯低于同類商品疫苗，效果顯著。另外，在疫苗評估過程中，同樣需要關注安全性，圓支優在不同日齡接種后無任何免疫應激，安全性很高，而同類商品疫苗7、14日齡接種后均有部分豬只出現應激現象。

通常情況下，豬肺炎支原體感染可加重豬圓環病毒相關的肺部及淋巴結病變，增加PMWS的發病概率，而豬圓環病毒感染則不會加重豬肺炎支原體鼻腔排毒及其引起的肺部病變，因此在聯合免疫時，應首先重點關注豬肺炎支原體的免疫效力和免疫日齡。豬肺炎支原體的母源抗體僅能保護10日齡內仔豬，而感染最早可發生于2～3周齡仔豬，加之滅活苗免疫2周后才可發揮保護作用，因此免疫日齡應越早越好，本研究結果有力地證實了這一觀點。7、14日齡組免疫圓支優至試驗結束均未感染豬肺炎支原體，21日齡免疫組至60日齡時檢測結果仍為陰性，但100日齡時已有個別豬只感染，同類商品疫苗7、14日齡組僅能保護至60日齡，21日齡免疫組的感染率則上升至3倍。豬圓環病毒抗原檢測結果與豬肺炎支原體抗原檢測結果基本一致。因此，生產實踐中圓支優的免疫時間應以7～14日齡最為合適，盡量不要選擇21日齡時免疫，易造成極個別豬只免疫效果不佳。

綜上，圓支優7～14日齡免疫時，可有效預防豬肺炎支原體和豬圓環病毒感染，并可有效降低勞動強度、注射應激以及非瘟等直接接觸性疾病的感染概率，是目前養豬生產中防控2種疾病的優選疫苗?！?/p>

參考文獻：

[1] 翟少倫，婁亞坤，杜麗銀，等.豬圓環病毒2型和3型雙重熒光PCR檢測方法建立及應用[J].中國動物保健，2021，23（03）：101-102.

[2] 高一鳴.廣西某公司種豬場豬肺炎支原體流行病學調查及免疫效果評估[D].武漢：華中農業大學，2023.

[3] 鄧清文，秦樂娟，胡澤奇，等.五種常用豬2型圓環病毒疫苗的效果比較與分析[J].湖南畜牧獸醫，2023（01）：25-28.

[4] 吳麗艷，覃旺，王勤華，等.不同豬圓環病毒疫苗臨床免疫效果的比較[J].中國豬業，2020，15 （05）：73-77.

[5] 肖婷，陳忠偉，蔣家霞，等.不同豬支原體肺炎滅活疫苗免疫效果評價及比較[J].中國動物檢疫，2021，38 （12）：109-115.

收稿日期：2024-11-22

作者簡介：常洪濤（1978.7.17—），男，博士，副教授。研究方向：豬病快速診斷技術及新型疫苗研發。

通訊作者：劉慧敏（1984.2.6—），女，博士，副教授。研究方向：免疫與代謝、病毒與宿主相互作用的機制研究。