復(fù)方芩柏顆粒對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠的改善作用及機(jī)制研究

中圖分類(lèi)號(hào) R965 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2025）06-0686-06

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2025.06.08

摘要 目的 基于短鏈脂肪酸（SCFA）及其作用靶點(diǎn)G蛋白偶聯(lián)受體（GPR），探究復(fù)方芩柏顆粒對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎（UC）大鼠的改善作用及潛在機(jī)制。方法 將雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組（12 只）和模型制備組（30 只），模型制備組大鼠通過(guò)飲用5% 葡聚糖硫酸鈉溶液構(gòu)建UC 模型。將造模成功的大鼠分為模型組、陽(yáng)性對(duì)照組[美沙拉秦腸溶片270 mg/（kg·d）]、復(fù)方芩柏顆粒組[2.52g/（kg·d）]，每組9 只。各組大鼠每天分2 次灌胃生理鹽水或相應(yīng)藥液，連續(xù)3 周。灌胃期間，觀察各組大鼠一般情況，于末次給藥后進(jìn)行疾病活動(dòng)性指數(shù)（DAI）評(píng)分，并檢測(cè)其血清中促炎因子（腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素6）和抑炎因子（轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1、白細(xì)胞介素10）水平，觀察其結(jié)腸組織病理變化并進(jìn)行病理學(xué)評(píng)分，檢測(cè)其糞便中SCFA（乙酸、丙酸、丁酸）含量以及結(jié)腸組織中GPR41、GPR43、GPR109A蛋白及mRNA的表達(dá)情況。結(jié)果 與正常組比較，模型組大鼠精神萎靡，糞便帶血明顯，結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)受損嚴(yán)重，可見(jiàn)明顯的腺體缺失、水腫、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等病理改變；其血清促炎因子水平、DAI評(píng)分、結(jié)腸病理學(xué)評(píng)分均顯著升高，而抑炎因子水平，SCFA含量以及GPR41、GPR43、GPR109A蛋白及mRNA的表達(dá)均顯著降低或下調(diào)（P＜0.01）。與模型組比較，各藥物組大鼠一般情況及結(jié)腸組織病理改變均有好轉(zhuǎn)，上述定量指標(biāo)均明顯逆轉(zhuǎn)（P＜0.05 或P＜0.01）。結(jié)論 復(fù)方芩柏顆粒能減輕UC大鼠的腸道炎癥及腸道黏膜病理?yè)p傷，上述作用可能與其恢復(fù)腸道SCFA的含量及其靶點(diǎn)GPR的表達(dá)有關(guān)。

關(guān)鍵詞 復(fù)方芩柏顆粒；潰瘍性結(jié)腸炎；短鏈脂肪酸；G蛋白偶聯(lián)受體

潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）是一種影響腸道下端黏膜及黏膜下層、累及結(jié)腸和直腸的炎癥性腸病，具體發(fā)病機(jī)制尚不清楚。研究指出，短鏈脂肪酸（short-chain fatty acid，SCFA）是腸道有益菌消化膳食纖維的關(guān)鍵代謝產(chǎn)物，以乙酸、丁酸、丙酸為主。SCFA及其作用靶點(diǎn)G蛋白偶聯(lián)受體（G protein-coupled receptor，GPR）對(duì)維持腸道菌群平衡、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)、減少炎癥和抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)至關(guān)重要，是目前UC治療領(lǐng)域研究的重要方向[1―2]。

研究發(fā)現(xiàn)，中藥可有效緩解UC癥狀，改善腸道菌群紊亂，并保持腸道微生態(tài)穩(wěn)定，在UC治療領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景[3]。中醫(yī)認(rèn)為，UC屬于“久痢”范疇，病機(jī)為腸道濕熱積聚、氣血運(yùn)行不暢[4]。止痛如神湯出自《外科啟玄》，以秦艽為君藥，輔以桃仁、皂角刺、蒼術(shù)、防風(fēng)、黃柏、當(dāng)歸、澤瀉、檳榔、熟大黃，兼顧“風(fēng)、熱、濕、燥”之邪，可改善UC患者腹痛、腹瀉、黏液血便等癥狀[5]。復(fù)方芩柏顆粒是湖南中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院化裁于止痛如神湯的復(fù)方制劑，其在原方基礎(chǔ)上去除辛溫刺激之品蒼術(shù)、皂角刺，加用延胡索、黃芩，以發(fā)揮更強(qiáng)的止痛止瀉之功；同時(shí)，還加用生地黃，以滋陰補(bǔ)血，改善UC患者日久體虛或貧血的癥狀[6]。本課題組前期開(kāi)展的臨床觀察和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均證實(shí)，復(fù)方芩柏顆粒對(duì)UC具有明顯的改善作用[6―7]，但具體機(jī)制尚不明確。為此，本研究基于腸道菌群及其代謝產(chǎn)物對(duì)UC的影響，以及中藥方劑對(duì)腸道菌群的改善作用，從腸道中占比最大的SCFA——乙酸、丁酸、丙酸及其作用靶點(diǎn)出發(fā)，探討該方對(duì)UC的影響及潛在機(jī)制，以期為復(fù)方芩柏顆粒的進(jìn)一步利用提供參考。

1 材料

1.1 主要儀器

本研究所用主要儀器包括TRACETM 1310 ISQLT型氣質(zhì)聯(lián)用（GC-MS）儀（美國(guó)Thermo Fisher Scientific 公司）、Epoch 型酶標(biāo)儀（美國(guó)BioTek 公司）、BX53 型生物顯微鏡（日本Olympus 公司）、ChemiDocTM XRS+型凝膠成像系統(tǒng)（美國(guó)Bio-Rad 公司）、ArtGeneTM A300 型聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增儀（杭州朗基科學(xué)儀器有限公司）等。

1.2 主要藥品與試劑

復(fù)方芩柏顆粒（湘藥制字Z20080819，批號(hào)為20230912，規(guī)格為每袋6 g）由黃柏、黃芩、澤瀉、當(dāng)歸、檳榔、秦艽、防風(fēng)（炒炭）、熟大黃、延胡索、生地黃、桃仁11味中藥按質(zhì)量比4∶4∶4∶4∶3.5∶3.5∶3.5∶3.5∶3.5∶5∶2 組成，為湖南中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院自制中成藥。

美沙拉秦腸溶片（批號(hào)20190109，規(guī)格0.25 g）購(gòu)自黑龍江天宏藥業(yè)股份有限公司；葡聚糖硫酸鈉（dextransulfate sodium，DSS；批號(hào)PHL83846）購(gòu)自美國(guó)Sigma 公司；糞便隱血檢測(cè)試劑（批號(hào)YM-TC0511）購(gòu)自上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司；蘇木素-伊紅（HE）染液（批號(hào)B600020）購(gòu)自武漢三鷹生物技術(shù)有限公司；白細(xì)胞介素6（interleukin-6，IL-6）、IL-10 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）試劑盒（批號(hào)分別為XK6156S、XK6154S）均購(gòu)自上海晅科生物科技有限公司；腫瘤壞死因子α（tumor necrosisfactor-α，TNF-α）ELISA 試劑盒（批號(hào)J22405）購(gòu)自武漢吉立德生物科技有限公司；轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（transforminggrowth factor- β1，TGF- β1）ELISA 試劑盒（批號(hào)EK981）購(gòu)自杭州聯(lián)科生物技術(shù)股份有限公司；乙酸、丙酸、丁酸、4- 甲基戊酸（內(nèi)標(biāo)）對(duì)照品（批號(hào)分別為MKCM7198、SHBC7498V、STBF8413V、STBJ4764，純度均大于99%）均購(gòu)自廣州順研生物科技有限公司；RIPA 裂解液、BCA 蛋白定量試劑盒（批號(hào)分別為P0013B、P0009）均購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)有限公司；兔抗GPR41、GPR43、GPR109A 多克隆抗體（批號(hào)分別為MBS8580632、MBS541594、MBS9140387）均購(gòu)自美國(guó)MyBioSource 公司；兔抗β-肌動(dòng)蛋白（β-actin）多克隆抗體（批號(hào)66009-1-Ig）購(gòu)自美國(guó)Proteintech 公司；辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔免疫球蛋白G 二抗（批號(hào)為SA00001-2）購(gòu)自武漢三鷹生物技術(shù)有限公司；TsingZol總RNA廣譜型提取試劑、SynScriptTM Ⅲ cDNA合成預(yù)混液、2×TSINGKE? Master qPCR 混合液（SYBR GreenⅠ）、dNTPs 混合液（10 mmol/L）（批號(hào)分別為T(mén)SP401、TSK3225、TSK201、TSK2200）及擴(kuò)增引物均由北京擎科生物科技有限公司提供。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF 級(jí)雄性SD大鼠42 只，體重（230±15）g，購(gòu)自湖北貝恩特生物科技有限公司，生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK（鄂）2021-0027。所有大鼠均飼養(yǎng)于溫度約22 ℃、相對(duì)濕度約60%、每天光照12 h 的環(huán)境里。本研究方案經(jīng)湖北貝恩特生物科技有限公司實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，批準(zhǔn)文號(hào)為L(zhǎng)ACUC（準(zhǔn)）-BNT-2022-002。

2 方法

2.1 造模、分組與給藥

按照SPF 標(biāo)準(zhǔn)適應(yīng)性喂養(yǎng)大鼠1 周后，將其隨機(jī)分為正常組（12 只）和模型制備組（30 只）。正常組大鼠每天自由飲水，模型制備組大鼠則飲用5%DSS 溶液[8]。1周后，隨機(jī)挑選正常組和模型制備組各3 只大鼠處死，若模型制備組大鼠結(jié)腸組織可見(jiàn)潰瘍、黏膜糜爛、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、腺體減少或消失等病理改變，而正常組大鼠結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)基本正常，則提示UC模型復(fù)制成功。

造模結(jié)束后，將模型制備組剩余的27 只大鼠隨機(jī)分為模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、復(fù)方芩柏顆粒組，每組9 只。正常組（該組剩余的9 只）和模型組大鼠灌胃生理鹽水，各藥物組大鼠每天行2 次灌胃相應(yīng)藥液，灌胃總體積均為20 mL/（kg·d），連續(xù)3 周。根據(jù)成年UC患者急性活動(dòng)期美沙拉秦腸溶片的劑量（3 g/d），按《動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》[9]的方法換算，得陽(yáng)性對(duì)照組大鼠灌胃的等效總劑量為270 mg/（kg·d）；根據(jù)前期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果，復(fù)方芩柏顆粒的最佳有效總劑量為2.52 g/（kg·d）[10]，本研究繼續(xù)使用該劑量。給藥過(guò)程中，各組大鼠均自由飲水、攝食。

2.2 大鼠疾病活動(dòng)性指數(shù)評(píng)分與取樣

開(kāi)始灌胃后，每天記錄大鼠的體重變化、糞便性狀及帶血狀況，并在末次給藥完成后進(jìn)行疾病活動(dòng)性指數(shù)（disease activity index，DAI）評(píng)分（具體標(biāo)準(zhǔn)[11]見(jiàn)表1），以評(píng)估大鼠腸道疾病的嚴(yán)重程度。DAI評(píng)分＝（體重下降評(píng)分+糞便性狀評(píng)分+血便評(píng)分）/3。

DAI 評(píng)分后，以腹部按摩法收集各組大鼠糞便，備測(cè)；隨后，予大鼠禁食、不禁水24 h，將其固定，腹腔注射2% 戊巴比妥使其深度麻醉，剖開(kāi)胸腔并暴露心臟，將針頭刺入心室，取血樣適量，于－80 ℃下保存，備測(cè)；取血后，以頸椎脫臼法將其處死，剖開(kāi)腹腔，取結(jié)腸組織，一部分以4% 多聚甲醛溶液固定，另一部分凍存，備測(cè)。

2.3 大鼠血清炎癥因子檢測(cè)

取“2.2”項(xiàng)下各組大鼠血樣適量，于4 ℃下以3 000r/min 離心20 min，取上層血清，按相應(yīng)試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，采用ELISA 法以酶標(biāo)儀檢測(cè)其血清促炎因子（TNF-α、IL-6）和抑炎因子（TGF-β1、IL-10）水平。

2.4 大鼠結(jié)腸組織病理變化觀察

取“2.2”項(xiàng)下各組大鼠固定24 h 的結(jié)腸組織，制作石蠟切片；取切片，經(jīng)脫水、脫蠟、HE染色、封片后，使用顯微鏡觀測(cè)大鼠結(jié)腸組織的病理改變并進(jìn)行病理學(xué)評(píng)分（具體標(biāo)準(zhǔn)[12]見(jiàn)表2），以評(píng)估其結(jié)腸組織的病理?yè)p傷程度。病理學(xué)評(píng)分＝（隱窩破壞程度評(píng)分+炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)累及范圍評(píng)分+病變范圍評(píng)分）/3。

2.5 大鼠糞便中SCFA含量測(cè)定

取“2.2”項(xiàng)下各組大鼠的糞便樣品0.2 g，置于1.5mL 離心管中，用水500 μL 勻漿1 min 后，再以3 000r/min 離心10 min；取上清液200 μL，分別加入15% 磷酸溶液100 μL、375 μg/mL 的內(nèi)標(biāo)溶液（以乙醇為溶劑）20μL、乙醚280 μL，勻漿1 min，再于4 ℃下以12 000 r/min離心10 min，取乙醚層，即得供試品溶液。取上述供試品溶液，采用GC-MS 技術(shù)以內(nèi)標(biāo)法檢測(cè)其中乙酸、丙酸、丁酸的含量。GC-MS 條件如下：色譜柱為RestekRxi-5MS 毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm）；進(jìn)樣口溫度為270 ℃；載氣為氦氣，流速為1.0 mL/min；頂空進(jìn)樣，進(jìn)樣量為1 μL；程序升溫，45 ℃保持1 min，以20 ℃/min 升至250 ℃并保持2 min。離子源為電子轟擊離子源，電子轟擊能量為70 eV；離子源溫度為220 ℃；檢測(cè)器溫度為250 ℃；檢測(cè)電壓為1 450 V；質(zhì)譜信息采集頻率為每秒20 次，掃描范圍為m/z 38～550。以待測(cè)成分與內(nèi)標(biāo)的峰面積比值為縱坐標(biāo)（y）、待測(cè)成分質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（x）繪制的乙酸、丙酸、丁酸回歸方程分別為y＝0.015 8x+0.001 2、y＝0.010 8x+0.001 5、y＝0.030 2x+0.010 8（R 2＞0.999），三者檢測(cè)質(zhì)量濃度的線性范圍分別為1～100、1～100、0.5～50 mg/L。該法精密度、重復(fù)性等方法學(xué)考察均符合2020 年版《中國(guó)藥典》（四部）的相關(guān)要求。

2.6 大鼠結(jié)腸組織中GPR41、GPR43、GPR109A 蛋白表達(dá)檢測(cè)

采用Western blot 法檢測(cè)。取“2.2”項(xiàng)下凍存的各組大鼠的結(jié)腸組織適量，用RIPA 裂解液于冰上裂解，于4 ℃下以12 000 r/min 離心4 min，取上清液，以BCA 法檢測(cè)總蛋白含量后，煮沸5 min 使變性。取變性蛋白適量，進(jìn)行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離并轉(zhuǎn)移到聚偏二氟乙烯膜上，于室溫下以5% 脫脂牛奶封閉1 h；洗膜2 min，加入GPR41、GPR43、GPR109A、β-actin 一抗（稀釋比例分別為1∶1 000、1∶1 000、1∶1 000、1∶20 000），于4 ℃下孵育過(guò)夜；洗膜10 min×3 次，加入相應(yīng)二抗（稀釋比例為1∶1 000），于室溫下孵育1 h；洗膜后，以發(fā)光試劑顯色，并于凝膠成像系統(tǒng)下成像。以β-actin 為內(nèi)參，計(jì)算各目的蛋白的相對(duì)表達(dá)量（即目的蛋白與內(nèi)參蛋白的條帶灰度值比值）。

2.7 大鼠結(jié)腸組織中GPR41、GPR43、GPR109AmRNA表達(dá)檢測(cè)

采用實(shí)時(shí)PCR（real-time PCR，RT-PCR）法檢測(cè)。取“2.2”項(xiàng)下凍存的各組大鼠的結(jié)腸組織適量，以TsingZol總RNA廣譜型提取試劑提取其中的總RNA，檢測(cè)純度、濃度后，將其逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，再以此cDNA為模板進(jìn)行擴(kuò)增。PCR 反應(yīng)體系（共10 μL）包括cDNA模板1 μL、10 μmol/L 正/反向引物（具體序列及產(chǎn)物長(zhǎng)度見(jiàn)表3）各0.4 μL、2×TSINGKE? Master qPCR 混合液（SYBRGreen Ⅰ）5 μL、50×ROX 參考染料Ⅱ 0.2 μL、ddH2O 3μL。反應(yīng)條件為95 ℃預(yù)變性30 s；95 ℃變性10 s，60 ℃退火延伸30 s，共循環(huán)40 次。以β-actin 為內(nèi)參，采用2－ΔΔCt法計(jì)算GPR41、GPR43、GPR109A mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 26.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果以x±s 表示，多組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用LSD-t 檢驗(yàn)（方差齊時(shí)）或Dunnett’s T3 法（方差不齊時(shí)）。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05。

3 結(jié)果

3.1 復(fù)方芩柏顆粒對(duì)大鼠DAI評(píng)分的影響

實(shí)驗(yàn)期間，無(wú)大鼠死亡。正常組大鼠精神狀態(tài)良好，飲食活動(dòng)正常，隱血實(shí)驗(yàn)為陰性；模型組大鼠精神萎靡，嗜睡，進(jìn)食/水量下降，糞便可見(jiàn)鮮紅血液；陽(yáng)性對(duì)照組和復(fù)方芩柏顆粒組大鼠精神狀況、進(jìn)食/水量、糞便帶血情況明顯好于模型組。與正常組[（0.07±0.05）分]比較，模型組大鼠的DAI 評(píng)分[（3.14±0.29）分]顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，陽(yáng)性對(duì)照組、復(fù)方芩柏顆粒組大鼠的DAI 評(píng)分[（1.44±0.33）、（1.70±0.35）分]均顯著降低（P＜0.01）。

3.2 復(fù)方芩柏顆粒對(duì)大鼠血清炎癥因子水平的影響

與正常組比較，模型組大鼠血清促炎因子TNF-α、IL-6 水平均顯著升高，抑炎因子TGF-β1、IL-10 水平均顯著降低（P＜0.01）；與模型組比較，各藥物組大鼠血清促炎因子水平均顯著降低，抑炎因子水平均顯著升高（P＜0.01）。結(jié)果見(jiàn)表4。

3.3 復(fù)方芩柏顆粒對(duì)大鼠結(jié)腸組織病理形態(tài)的影響

正常組大鼠結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)完整，腺體排列規(guī)整，隱窩正常，黏膜無(wú)損傷，無(wú)明顯中性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和細(xì)胞損傷，其病理學(xué)評(píng)分為0 分；模型組大鼠結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)受損嚴(yán)重，黏膜層變薄，腺體缺失或排列不整齊，隱窩畸形，杯狀細(xì)胞明顯減少，組織間隙水腫，可見(jiàn)炎癥細(xì)胞彌散分布，潰瘍侵及肌層，出現(xiàn)細(xì)胞水腫及壞死，其病理學(xué)評(píng)分[（3.67±0.50）分]較正常組顯著升高（P＜0.01）；陽(yáng)性對(duì)照組和復(fù)方芩柏顆粒組大鼠結(jié)腸組織整體結(jié)構(gòu)基本完整，腺體排列基本整齊，腸黏膜輕度水腫，可見(jiàn)較多正常杯狀細(xì)胞及腸隱窩，炎癥細(xì)胞明顯減少，細(xì)胞損傷均好轉(zhuǎn)，其病理學(xué)評(píng)分[（1.44±0.53）、（1.56±0.53）分]較模型組顯著降低（P＜0.01）。結(jié)果見(jiàn)圖1。

3.4 復(fù)方芩柏顆粒對(duì)大鼠糞便中SCFA含量的影響

與正常組比較，模型組大鼠糞便中乙酸、丙酸、丁酸含量均顯著降低（P＜0.01）。與模型組比較，各藥物組大鼠糞便中乙酸、丙酸、丁酸含量均顯著升高（P＜0.05或P＜0.01）。結(jié)果見(jiàn)表5。

3.5 復(fù)方芩柏顆粒對(duì)大鼠結(jié)腸組織中GPR41、GPR43、GPR109A蛋白表達(dá)的影響

與正常組比較，模型組大鼠結(jié)腸組織中GPR41、GPR43、GPR109A蛋白的表達(dá)均顯著下調(diào)（P＜0.01）；與模型組比較，各藥物組大鼠結(jié)腸組織中GPR41、GPR43、GPR109A蛋白的表達(dá)均顯著上調(diào)（P＜0.01）。結(jié)果見(jiàn)表6、圖2。

3.6 復(fù)方芩柏顆粒對(duì)大鼠結(jié)腸組織中GPR41、GPR43、GPR109A mRNA的表達(dá)影響

與正常組比較，模型組大鼠結(jié)腸組織中GPR41、GPR43、GPR109A mRNA的表達(dá)均顯著下調(diào)（P＜0.01）；與模型組比較，各藥物組大鼠結(jié)腸組織中GPR41、GPR43、GPR109A mRNA的表達(dá)均顯著上調(diào)（P＜0.01）。結(jié)果見(jiàn)表7。

4 討論

UC是炎癥性腸病的一種亞型，因腸道長(zhǎng)期遭受炎癥刺激而出現(xiàn)腸道屏障功能受損，導(dǎo)致TNF-α、IL-6 等炎癥介質(zhì)釋放增加，從而促進(jìn)炎癥細(xì)胞在腸道組織中的滲透，進(jìn)一步加劇炎癥反應(yīng)，破壞腸黏膜，最終形成惡性循環(huán)[13]。本研究結(jié)果顯示，復(fù)方芩柏顆粒可有效降低UC大鼠血清中促炎因子TNF-α、IL-6 水平，升高抗炎因子TGF-β1、IL-10 水平，從而緩解腸道炎癥反應(yīng)。

SCFA是腸道細(xì)菌消化膳食纖維而生成的產(chǎn)物，因具有較強(qiáng)的抗炎、抗癌作用而備受學(xué)者關(guān)注[14]。研究指出，乙酸、丙酸和丁酸是最重要的SCFA，在腸道總SCFA中的占比高達(dá)95%[15]。一項(xiàng)薈萃分析顯示，與健康受試者相比，UC患者的總SCFA、乙酸、丙酸和戊酸含量均明顯下降[16]。SCFA可誘導(dǎo)先天性淋巴細(xì)胞和CD4+ T細(xì)胞分泌IL-22，對(duì)維持腸道黏膜免疫功能至關(guān)重要[17]；此外，SCFA還能上調(diào)緊密結(jié)合蛋白的表達(dá)，從而維持腸道屏障的完整性[18]。其中，乙酸可通過(guò)調(diào)控GPR43 信號(hào)通路來(lái)介導(dǎo)抗炎作用的發(fā)揮；丙酸可通過(guò)抑制組蛋白脫乙酰酶的活性來(lái)抑制相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)，從而抑制樹(shù)突狀細(xì)胞的分化和功能[15]；丁酸是主要的四碳SCFA之一，是結(jié)腸細(xì)胞的主要能量來(lái)源，可通過(guò)抑制核因子κB途徑和減少促炎基因表達(dá)來(lái)發(fā)揮抗炎作用[19]。研究證實(shí)，結(jié)腸組織中SCFA含量的降低與炎癥性腸病、轉(zhuǎn)移性結(jié)腸炎和抗生素相關(guān)性腹瀉的發(fā)生關(guān)聯(lián)密切[20]；同時(shí)，UC患者體內(nèi)SCFA含量的變化還與疾病活動(dòng)有關(guān)，緩解期患者體內(nèi)的丁酸含量明顯高于活動(dòng)性疾病患者[16]。本研究結(jié)果顯示，UC大鼠糞便樣品中乙酸、丙酸和丁酸含量均顯著低于正常組，而復(fù)方芩柏顆粒和美沙拉秦腸溶片均能明顯回調(diào)其糞便樣品中乙酸、丙酸和丁酸的含量。

GPR（如GPR41、GPR43、GPR109A）是SCFA的作用靶點(diǎn)，也是其受體，GPR可識(shí)別腸道中的SCFA，并通過(guò)與其結(jié)合而啟動(dòng)一系列信號(hào)通路，調(diào)節(jié)腸道功能。研究表明，SCFA/GPR信號(hào)通路與免疫細(xì)胞活性有關(guān)，其被激活后可抑制促炎因子（TNF-α、IL-6）的產(chǎn)生，并促進(jìn)抗炎因子（TGF-β1、IL-10）的分泌；同時(shí)，該通路可通過(guò)調(diào)節(jié)腸道上皮細(xì)胞的緊密連接蛋白來(lái)維持腸道屏障的完整性，并可促進(jìn)腸黏膜分泌相關(guān)物質(zhì)來(lái)抵御各類(lèi)病原微生物的入侵[21]。本研究結(jié)果顯示，與正常組比較，UC大鼠結(jié)腸組織中GPR41、GPR43、GPR109A蛋白及mRNA的表達(dá)均顯著下調(diào)；而復(fù)方芩柏顆粒和美沙拉秦腸溶片均可顯著上調(diào)UC 大鼠結(jié)腸組織中GPR41、GPR43、GPR109A蛋白及mRNA的表達(dá)，提示復(fù)方芩柏顆粒抗UC作用的發(fā)揮可能與激活SCFA/GPR信號(hào)通路有關(guān)。

綜上所述，復(fù)方芩柏顆粒能減輕UC大鼠的腸道炎癥及腸道黏膜病理?yè)p傷，上述作用可能與恢復(fù)腸道SCFA的含量及其作用靶點(diǎn)GPR的表達(dá)有關(guān)，但關(guān)于該藥的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及具體機(jī)制仍有待進(jìn)一步探索。

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（收稿日期：2024-08-12 修回日期：2025-01-03）

（編輯：張?jiān)拢?/p>