血清LncRNA ZFAS1和LncRNA TUG1對老年慢性心力衰竭病人預后的評估價值

摘要""目的：探討血清長非編碼RNA鋅指NFX1反義RNA1（LncRNA ZFAS1）和長非編碼RNA牛磺酸上調基因1（LncRNA TUG1）對老年慢性心力衰竭（CHF）病人預后的評估價值。方法：選取2019年1月—2020年5月濟南市第四人民醫院心血管內科收治的207例老年CHF病人（CHF組），同期在醫院的56名體檢健康者（對照組）；根據老年CHF病人預后分為預后不良組（76例）和預后良好組（131例）。采用定量逆轉錄聚合酶鏈式反應（qRT-PCR）檢測血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平。通過老年CHF病人預后不良的影響因素及血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平評估老年CHF病人預后不良的價值，分別采用多因素非條件Logistic回歸分析和受試者工作特征（ROC）曲線分析。結果：與對照組比較，CHF組血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平更高（P＜0.001）。與預后良好組比較，預后不良組血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平更高（P＜0.001）。LncRNA ZFAS1［OR＝1.232，95%CI（1.093，1.390）］、LncRNA TUG1［OR＝1.062，95%CI（1.024，1.102）］升高為老年CHF病人預后不良的獨立危險因素（P＜0.05）。ROC曲線分析顯示，血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1單獨與聯合評估老年CHF病人預后不良的ROC曲線下面積分別為0.784，0.777，0.863。結論：血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平升高是老年CHF病人預后不良的獨立危險因素，二者聯合對老年CHF病人預后不良的輔助預測價值較高，可能成為老年CHF病人預后不良的輔助預測指標。

關鍵詞""慢性心力衰竭；老年人；長非編碼RNA 鋅指NFX1反義RNA1；長非編碼RNA牛磺酸上調基因1；預后

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2025.06.005

Prognostic Value of Serum LncRNA ZFAS1 and LncRNA TUG1 for Prognosis in Elderly Patients with Chronic Heart Failure

LIU Xiaolin， MA Wenhui， ZHANG Yujie， YU Huapeng， MA Shengting

The Fourth People's Hospital of Jinan， Jinan 250031， Shandong， China

Corresponding Author "MA Shengting， E-mail： mstlhy@163.com

Abstract Objective：To observe the prognostic value of serum long non-coding RNA zinc finger NFX1 antisense RNA1（LncRNA ZFAS1） and long non-coding RNA taurine up-regulated gene 1（LncRNA TUG1） in elderly patients with chronic heart failure（CHF）.Methods：Two hundred and seven elderly CHF patients were selected（CHF group），and 56 healthy subjects（control group） were selected.According to the prognosis of elderly CHF patients，they were divided into poor prognosis group（76 cases） and better prognosis group（131 cases）.The levels of serum LncRNA ZFAS1 and LncRNA TUG1 were detected by quantitative reverse transcription polymerase chain reaction（qRT-PCR）.The value of evaluating prognosis based on serum LncRNA ZFAS1 and LncRNA TUG1 levels analyzed by multivariate unconditional Logistic regression analysis and receiver operating characteristic（ROC） curve analysis，respectively.Results：The levels of serum LncRNA ZFAS1 and LncRNA TUG1 in the CHF group were higher than those in the control group（P＜0.001）.The levels of serum LncRNA ZFAS1 and LncRNA TUG1 in the poor prognosis group were higher than those in the better prognosis group（P＜0.001）.LncRNA ZFAS1（OR＝1.232，95%CI 1.093-1.390） and LncRNA TUG1（OR＝1.062，95%CI 1.024-1.102） were independent risk factors for poor prognosis in elderly patients with CHF（P＜0.05）.ROC curve analysis showed that the area under ROC curve of serum LncRNA ZFAS1 and LncRNA TUG1 for poor prognosis in elderly patients with CHF were 0.784，0.777，and 0.863，respectively.Conclusion：Elevated levels of serum LncRNA ZFAS1 and LncRNA TUG1 in elderly patients with CHF were independent risk factors for poor prognosis.The combination of serum LncRNA ZFAS1 and LncRNA TUG1 showed a higher auxiliary prediction of poor prognosis in elderly patients with CHF，and might be an auxiliary predictor of poor prognosis in elderly patients with CHF.

Keywords""chronic heart failure; elderly; long non-coding RNA zinc finger NFX1 antisense RNA1; long non-coding RNA taurine up-regulated gene 1; prognosis

慢性心力衰竭（chronic heart failure，CHF）是常見的臨床綜合征，我國≥60歲CHF人群年患病率為2 375/10萬，嚴重威脅老年人生命健康并造成了沉重的醫療負擔^［1-2］。長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，LncRNA）通過炎癥反應、細胞凋亡、心肌纖維化、氧化應激等機制參與CHF發生發展^［3］。鋅指NFX1反義RNA1（zinc finger NFX1 antisense RNA 1，ZFAS1）和牛磺酸上調基因1（taurine up-regulated gene 1，TUG1）是近年來新近發現的LncRNAs。相關研究顯示，LncRNA ZFAS1通過誘導心臟組織膠原沉積導致心肌纖維化^［4］，LncRNA TUG1可促進缺氧復氧大鼠心肌細胞凋亡^［5］。臨床研究報道，LncRNA ZFAS1與心肌梗死病人介入術后心力衰竭發生有關^［6］，LncRNA TUG1與老年高血壓病人并發心力衰竭有關^［7］。然而關于二者與老年CHF病人預后關系的研究報道較少，基于此本研究通過檢測血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平，探討血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1與老年CHF病人預后的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1月—2020年5月濟南市第四人民醫院心血管內科收治的老年CHF病人207例（CHF組），男139例，女68例；年齡60～91（71.98±6.88）歲；體質指數17.83～29.85（22.60±1.95）kg/m²；病程3～24［16.00（13.00，20.00）］年。另選取醫院同期體檢健康者56名（對照組），男39名，女17名；年齡60～87（70.18±5.17）歲；體質指數18.68～27.68（22.74±1.83）kg/m²。兩組性別、年齡、體質指數比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。本研究病人及家屬均知情并簽署同意書，并經醫院倫理委員會批準（編號：LL20250006）。

納入標準：年齡≥60歲；符合CHF相關診斷標準^［8］。排除標準：先天性心臟疾病；院內死亡；急性心力衰竭；惡性腫瘤；資料不完整或不能接受隨訪；妊娠期或哺乳期婦女；嚴重肝腎功能不全。

1.2 方法

采集CHF組入院次日和對照組體檢時空腹靜脈血3 mL，以3 000 r/min離心15 min（半徑15 cm），取上層血清，采用Trizol法提取總RNA后反轉錄為cDNA，按照SYBR^?"Premix Ex Taq^TM試劑盒（上海赫果生物科技有限公司，編號：DRR820A）說明書進行檢測，引物設計和合成由武漢天一華煜基因科技有限公司完成。采用2^－△△CT法計算血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1表達水平。LncRNA ZFAS1正向引物：5′-GCCGAGGTCCAGTTTTCCCA-3′，反向引物：5′-"CTCAACTGGTGTCGTGGA-3′；LncRNA TUG1正向引物：5′-TAGCAGTTCCCCAATCCTTG-3′，反向引物：5′-CACAAATTCCCATCATTCCC-3′；內參甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）正向引物：5′-"CAAGGTCATCCATGACAACTTTG-3′，反向引物：5′-"GTCCACCACCCTGTTGCTGTAG-3′。反應條件：95 ℃"90 s，95 ℃"30 s，63 ℃"30 s，72 ℃"15 s，循環40次。

1.3 隨訪和分組

CHF病人病情穩定出院后隨訪2年，根據預后分為預后不良（再發心力衰竭入院和心源性死亡）組和預后良好組。

1.4 統計學處理

采用SPSS 28.0統計軟件進行數據分析。符合正態分布和方差齊性的定量資料以均數±標準差（x±s）表示，采用Student′s t檢驗；不符合正態分布的定量資料采用非參數檢驗。定性資料以例數、百分比（%）表示，采用χ²檢驗。老年CHF病人預后不良的影響因素及血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平評估老年CHF病人預后不良的價值分別采用多因素非條件Logistic回歸分析和受試者工作特征（ROC）曲線分析。檢驗水準α＝0.05。

2 結果

2.1 CHF組與對照組血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平比較

CHF組血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平高于對照組，差異均有統計學意義（P＜0.001）。詳見表1。

2.2 單因素分析

207例老年CHF病人隨訪2年，預后不良發生率為36.71%（76/207）。與預后良好組比較，預后不良組年齡更大，病程更長，紐約心臟病協會（NYHA）分級≥Ⅲ級比例和B型腦利鈉肽（B-type brain natriuretic peptide，BNP）、左室射血分數（left ventricular ejection fraction，LVEF）、LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平更高（P＜0.001）。詳見表2。

2.3 多因素分析

以LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1為自變量，年齡、病程、NYHA分級（≥Ⅲ級＝1，＜Ⅲ級＝0）、BNP、LVEF為協變量，預后（不良＝1，良好＝0）為因變量進行多因素Logistic回歸分析。調整其他因素后，LncRNA ZFAS1升高、LncRNA TUG1升高為預后不良的獨立危險因素（P＜0.01）。詳見表3。

2.4 血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平對老年CHF病人預后不良的評估價值

ROC曲線顯示，血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平聯合評估老年CHF病人預后不良的ROC曲線下面積（AUC）較單一指標評估價值更大。詳見表4和圖1。

3 討論

老年CHF病人由于機能自然減退、多重用藥、多種合并癥、多種心血管危險因素等，病情復雜且易進展為重癥CHF，盡管相關治療措施取得一定進展，但病人預后不理想^［9］。本研究中76例（36.71%）老年CHF病人出現不良預后，高于國內研究報道的30.77%^［10］，提示老年CHF病人預后更差。目前，主要采用BNP和LVEF評估CHF病人預后，BNP受非心源性因素影響因素較多，LVEF受到不同CHF類型影響^［8，11］。

新近研究表明，表觀遺傳學在CHF中發揮著重要作用，LncRNA作為表觀遺傳學的研究熱點，通過直接或海綿微小RNA（microRNA，miRNA）間接調節調控基因，進而參與CHF發生發展^［12］。LncRNA ZFAS1定位于人染色體20q13.13，在心臟、大腦、肺臟、腎臟等多個組織器官中穩定表達，既往研究報道，LncRNA ZFAS1與惡性腫瘤有關，LncRNA ZFAS1還與心臟疾病密切相關。Ni等^［13］研究顯示，LncRNA ZFAS1在糖尿病心肌病小鼠心肌細胞中高度表達，抑制LncRNA ZFAS1可靶向miR-150-5p/細胞周期蛋白D2抑制心肌細胞凋亡。Chen等^［14］研究報道，LncRNA ZFAS1在膿毒癥心肌病大鼠中高度表達，抑制LncRNA ZFAS1可靶向miR-34b-5p/沉默信息調節因子2相關酶1，進而減輕心肌細胞炎癥反應，抑制心肌細胞凋亡。上述研究說明LncRNA ZFAS1與心肌損傷密切相關，臨床研究指出LncRNA ZFAS1升高可能增加心肌梗死病人介入術后心力衰竭風險^［5］。但關于LncRNA ZFAS1與老年CHF病人預后的關系尚未明確。本研究結果顯示，老年CHF病人血清LncRNA ZFAS1顯著升高，考慮與老年CHF病人心肌細胞受損后LncRNA ZFAS1釋放進入血液有關。進一步本研究分析發現，預后不良組血清LncRNA ZFAS1升高，與預后不良獨立相關，分析原因LncRNA ZFAS1升高可進一步促進心肌炎癥反應和凋亡，導致心功能持續惡化，進而增加病人預后不良風險^［15］。

LncRNA TUG1定位于人染色體22q12.2，最初因其在新生小鼠視網膜細胞中隨著牛磺酸加入表達上調故稱為LncRNA TUG1。有研究發現，LncRNA TUG1通過促進核因子-κB通路活化參與炎癥反應過程，在炎癥性疾病中發揮重要作用^［16］。炎癥反應是心肌細胞損傷和凋亡的重要機制，有研究指出，LncRNA TUG1可激活核因子-κB通路，加重心肌細胞炎癥級聯損害^［17］。下調LncRNA TUG1可抑制膿毒癥心肌病心肌細胞凋亡^［18］。LncRNA TUG1高表達加重小鼠缺血/再灌后心肌細胞凋亡^［19］。上述研究說明LncRNA TUG1也與心肌損傷有關。臨床研究顯示，LncRNA TUG1有助于預測老年高血壓病人并發心力衰竭^［7］。本研究結果顯示，老年CHF病人血清LncRNA TUG1升高，考慮與老年CHF病人心肌細胞受損后LncRNA TUG1釋放進入血液有關；進一步分析發現，預后不良組血清LncRNA TUG1顯著升高，與預后不良獨立相關。分析原因是LncRNA TUG1升高激活核因子-κB信號通路，促使炎癥介質、黏附分子、趨化因子等炎性相關酶聚集于心肌細胞，引起心肌細胞持續炎癥反應，加重心肌細胞損害，促進凋亡，導致預后不良風險增加^［20］。本研究分析結果還顯示，除BNP和LVEF外，年齡增加和NYHA分級≥Ⅲ級可獨立影響老年CHF病人預后，分析原因是年齡更高的病人身體狀況更差，合并重癥CHF概率越大，因此預后不良風險更高；NYHA分級≥Ⅲ級病人由于心功能嚴重受損，因此存在更高的預后不良風險。本研究ROC曲線評估老年CHF病人預后發現，血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平分別為2.17，1.18時，評估的AUC為0.784，0.777，血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平聯合評估老年CHF病人預后不良的AUC為0.863，說明血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平聯合對其預后有較高的評估價值，可較好地指導臨床治療。

綜上所述，血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平升高與老年CHF病人預后不良密切相關，可能成為老年CHF病人預后不良的輔助預測指標，且血清LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1水平聯合評估老年CHF病人預后不良的價值較高。本研究結果仍需多中心研究驗證，進一步探討LncRNA ZFAS1、LncRNA TUG1影響老年CHF病人預后的具體機制。

參考文獻：

［1］ 中華醫學會老年醫學分會心血管疾病學組，《老年慢性心力衰竭診治中國專家共識》編寫組.老年人慢性心力衰竭診治中國專家共識（2021）［J］.中華老年醫學雜志，2021，40（5）：550-561.

［2］ WANG H，CHAI K，DU M H，et al.Prevalence and incidence of heart failure among urban patients in China：a national population-based analysis［J］.Circulation Heart Failure，2021，14（10）：e008406.

［3］ 黃思，張圳，萬靜靜，等.長鏈非編碼RNA在心力衰竭中的作用及臨床意義［J］.第二軍醫大學學報，2021，42（4）：411-419.

［4］ 焦磊，宮熳鈺，張瑩.LncRNA-ZFAS1對心肌纖維化調控作用研究［J］.中國藥理學通報，2021，37（1）：38-42.

［5］ 梁海軍，顏文華，梁宇晨.ST段抬高型心肌梗死患者lncRNA-ZFAS1/Caspase-3軸的變化及其與急診PCI預后的關系［J］.中國動脈硬化雜志，2021，29（7）：611-616.

［6］ 龍琴，肖小培，方凱.LncRNA TUG1/miR-525-5p/NLRC5在缺氧復氧大鼠心肌細胞中的作用機制研究［J］.解剖科學進展，2020，26（3）：284-287;291.

［7］ ZHANG S，JIN R Z，LI B.Serum NT-proBNP and TUG1 as novel biomarkers for elderly hypertensive patients with heart failure with preserved ejection fraction［J］.Experimental and Therapeutic Medicine，2021，21（5）：446.

［8］ 中華醫學會心血管病學分會心力衰竭學組，中國醫師協會心力衰竭專業委員會，中華心血管病雜志編輯委員會.中國心力衰竭診斷和治療指南2018［J］.中華心血管病雜志，2018，46（10）：760-789.

［9］ 中國老年醫學學會心電及心功能分會，中國醫師協會心血管內科分會，中國心衰中心聯盟專家委員會.慢性心力衰竭加重患者的綜合管理中國專家共識2022［J］.中國循環雜志，2022，37（3）：215-225.

［10］ 張海平，趙靜敏，屠艷輝，等.慢性心力衰竭患者血清SDC4、CatS水平與心室重構及預后的關系［J］.疑難病雜志，2022，21（7）：700-705;710.

［11］ 中國醫療保健國際交流促進會循證醫學分會，海峽兩岸醫藥衛生交流協會老年醫學專業委員會.心力衰竭生物標志物中國專家共識［J］.中華檢驗醫學雜志，2020，43（2）：130-141.

［12］ 訾杰，田孝祥，成小麗，等.長鏈非編碼RNA在心室重構中作用的研究進展［J］.廣西醫學，2021，43（24）：2977-2980.

［13］ NI T J，HUANG X X，PAN S L，et al.Inhibition of the long non-coding RNA ZFAS1 attenuates ferroptosis by sponging miR-150-5p and activates CCND2 against diabetic cardiomyopathy［J］.Journal of Cellular and Molecular Medicine，2021，25（21）：9995-10007.

［14］ CHEN D D，WANG H W，CAI X J.Long non-coding RNA ZFAS1 alleviates sepsis-induced myocardial injury via target miR-34b-5p/SIRT1［J］.Innate Immunity，2021，27（5）：377-387.

［15］ CAO M Y，LUO H S，LI D N，et al.Research advances on circulating long noncoding RNAs as biomarkers of cardiovascular diseases［J］.International Journal of Cardiology，2022，353：109-117.

［16］ 王月霞，馬媛，底煜.長鏈非編碼RNA TUG1在血管相關疾病中的研究進展［J］.醫學綜述，2021，27（21）：4171-4176.

［17］ 高小燕，陳雪英，魏廣和.長鏈非編碼核糖核酸牛磺酸上調基因1調控急性心肌梗死的研究進展［J］.中國醫師進修雜志，2021，44（8）：760-763.

［18］ XU Z W，LIN X Y，ZHU J F，et al.Long noncoding RNAs colorectal neoplasia differentially expressed and taurine-upregulated gene 1 are downregulated in sepsis and positively regulate each other to suppress the apoptosis of cardiomyocytes［J］.Bioengineered，2021，12（2）：11369-11375.

［19］ FU D L，GAO T，LIU M R，et al.LncRNA TUG1 aggravates cardiomyocyte apoptosis and myocardial ischemia/reperfusion injury［J］.Histology and Histopathology，2021，36（12）：1261-1272.

［20］ YUAN M，ZHANG L W，YOU F，et al.miR-145-5p regulates hypoxia-induced inflammatory response and apoptosis in cardiomyocytes by targeting CD40［J］.Molecular and Cellular Biochemistry，2017，431（1/2）：123-131.

（收稿日期：2023-07-14）

（本文編輯"薛妮）