華蟾素調(diào)控結(jié)直腸癌腫瘤微環(huán)境的研究進(jìn)展

Research Progress of Cinobufagin in Regulating Tumor Microenvironment of Colorectal Cancer/ LIU Xinchen， ZHANG Zixuan， ZHOU Yajuan， LIU Xiaodong， YIN Maoxu， SUN Leiyu， YANG Lijuan. // Medical Innovation of China， 2025， 22（10）： 175-178

[Abstract]Colorectal cancer （CRC） is one of the most common malignant tumors in the digestive system. Its occurrence and development notonly dependon tumor parenchyma，but also is closelyrelated to itssurvival environment， the tumor microenvironment （TME）. With the deepening of anti-tumor research targeting TME， more and more studies have found that the treatmenttargeting TME has significant advantages，and Cinobufotalin can achieve anti-tumor effect by influencing TME.This article mainly reviews theeffects of common components of tumor associated macrophages （TAMs） and T cells in CRC TME and Cinobufotalin on CRC TME.

[Key words] Colorectal cancer Cinobufagin Tumor microenvironment

First-author's address： Department of Gastroenterology， Affiliated Hospital of Binzhou Medical Jniversity， Binzhou 256600， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2025.10.041

結(jié)直腸癌（colorectalcancer，CRC）是全球第三大常見惡性腫瘤，也是全球癌癥患者死亡的第二大原因，在世界范圍內(nèi)，每年大約有180萬新增CRC病例和90萬CRC死亡病例。隨著分子生物學(xué)和免疫學(xué)的發(fā)展，除常規(guī)的手術(shù)治療和放化療之外，生物治療越來越受到關(guān)注。針對CRC等實體瘤靶向腫瘤微環(huán)境（TME）的研究顯示了其顯著治療優(yōu)勢。TME是指腫瘤細(xì)胞及局部浸潤的免疫細(xì)胞、活性介質(zhì)等共同構(gòu)成的復(fù)雜內(nèi)環(huán)境，其中腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）、T細(xì)胞在TME中含量豐富，對TME形成具有重要作用。目前認(rèn)為TAMs對腫瘤具有促進(jìn)作用，而TME中的T細(xì)胞則具有抗腫瘤作用3。華蟾素（Cinobufagin）是一種中藥復(fù)方制劑，目前已有研究證明華蟾素對腫瘤細(xì)胞有殺傷作用，并被廣泛應(yīng)用于多種癌癥的臨床輔助治療4。目前國內(nèi)外許多研究都提示華蟾素可通過調(diào)控TME抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，然而華蟾素是如何調(diào)控TME來抑制CRC進(jìn)展，缺少中間的“關(guān)鍵角色”，故本文對華蟾素調(diào)控結(jié)CRCTME的研究進(jìn)行綜述。

1 TAMs

1.1 CRC組織中TAMs的形成

巨噬細(xì)胞有高度的可塑性，一般可根據(jù)活化狀態(tài)分為兩種類型：經(jīng)典活化的巨噬細(xì)胞（M1）和替代活化的巨噬細(xì)胞（M2），其中M2型巨噬細(xì)胞又可分為4種亞型： 、 M2b 、M2c和M2d，且M1型和M2型之間可以相互轉(zhuǎn)化[5。血液中骨髓單核系祖細(xì)胞被腫瘤細(xì)胞分泌的CSF-1和CCL-2等吸引到TME，隨后極化成為TAMs（見圖1）。在一項動物實驗中，清晰地觀察到小鼠腫瘤中TAMs的增殖，說明TAMs可能不是完全來自循環(huán)單核細(xì)胞的補(bǔ)充，其自身也存在一定的自我更新能力。CRC組織中的TAMs數(shù)量總是一個增加的趨勢，M2-TAMs數(shù)量最多。MCP-1/CCL-2趨化因子，在CRC患者特別是晚期患者的血液中明顯升高，可以誘導(dǎo)單核細(xì)胞移動到CRC的TME中并極化為TAMs。CHI3L1主要在CRC組織中表達(dá)，其過表達(dá)促進(jìn)人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480的增殖，并通過ERK和JNK信號通路介導(dǎo)IL-8和MCP-1/CCL-2分泌，從而誘導(dǎo)單核細(xì)胞移動到CRC 的 TME 中極化為TAMs。在CRC組織中，CLL20和相應(yīng)的受體CCR6結(jié)合具有與MCP-1/CCL-2相似的能力，同樣可以促進(jìn)單核細(xì)胞聚集到CRC的TME中9。在TME的形成過程中，M2-TAMs總會向CRC組織中心靠近，導(dǎo)致CRC組織中心的M2型巨噬細(xì)胞密度大于腫瘤邊緣和周圍組織[10]

1.2 CRC組織中TAMs的功能變化

極化的TAMs多表達(dá)CD163、CD206、CD200R等M2型巨噬細(xì)胞標(biāo)志物，被稱為M2-TAMs，表現(xiàn)為促腫瘤作用；少數(shù)表達(dá)CD40、CD80、CD86等M1型巨噬細(xì)胞標(biāo)志物，被稱為M1-TAMs，表現(xiàn)出抗腫瘤作用。兩者之間的代謝活動并不完全相同，M1-TAMs沒有完整的三羧酸循環(huán)體系，受到腫瘤壞死因子（TNF）的刺激誘導(dǎo)，顯著增強(qiáng)糖酵解代謝，產(chǎn)生更多的ATP以支持吞噬和殺菌功能，同時為中斷的線粒體三羧酸（TCA）循環(huán)提供營養(yǎng)；而M2-TAMs具有完整的TCA循環(huán)，其線粒體氧化磷酸化能力高，脂肪代謝能力強(qiáng)，而脂肪代謝的產(chǎn)物可以增強(qiáng)與組織重塑或傷口愈合有關(guān)的活動\"

在某些特定的條件下，M1和M2型可以轉(zhuǎn)化，P選擇素糖蛋白配體-1（P-selectin glycoproteinligand-1，PSGL-1）在TAMs中高表達(dá)，可以促進(jìn)M2-TAMs的極化，而抗PSGL1可以將M2型巨噬細(xì)胞復(fù)極為M1型2]。TAMs在CRC中的作用具有異質(zhì)性。研究表明，TAMs可以通過分泌的外泌體和炎癥因子，促進(jìn)CRC腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移和血管生成；也可以通過抑制T細(xì)胞的免疫應(yīng)答促進(jìn)CRCTME的形成；還可以通過多種代謝途徑和與微生物之間的串?dāng)_促進(jìn)CRC的進(jìn)展[3]。但也研究顯示，TAMs通過分泌相應(yīng)的細(xì)胞因子抑制CRC腫瘤細(xì)胞的生長；也可以參與細(xì)胞毒性作用消除腫瘤細(xì)胞4；還能通過脂肪代謝調(diào)節(jié)[15]和促進(jìn)腫瘤免疫應(yīng)答來抑制CRC腫瘤細(xì)胞的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移[]。基于TAMs作用的異質(zhì)性，可以考慮利用抗腫瘤作用或抑制促腫瘤作用，達(dá)到治療CRC的目的。

2 CRC微環(huán)境中的T細(xì)胞

T細(xì)胞是TME中為數(shù)不多的抗腫瘤因素，其包括 T細(xì)胞、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和輔助性T細(xì)胞17等。然而即使是活性較強(qiáng)的 細(xì)胞也顯示出明顯的異質(zhì)性，它們在腫瘤發(fā)生過程中可能變得疲憊，進(jìn)入低反應(yīng)狀態(tài)或變得功能失調(diào)，并表達(dá)高水平的檢查點分子，如PD-1等。最新研究發(fā)現(xiàn)CRC 患者尿素循環(huán)的失調(diào)導(dǎo)致了細(xì)胞外氨的積累，氨優(yōu)先抑制T細(xì)胞生長，誘導(dǎo)T細(xì)胞的耗竭和表達(dá)免疫抑制標(biāo)志物[8。CRC微環(huán)境的變化導(dǎo)致T細(xì)胞活性的降低，進(jìn)而進(jìn)一步促進(jìn)CRC的發(fā)生發(fā)展。

3華蟾素對腫瘤的影響

3.1華蟾素的抗腫瘤作用

華蟾素的有效成分復(fù)雜，這決定了其作用靶點較多，可能通過多種機(jī)制達(dá)到抗腫瘤作用。華蟾素對多種癌癥有抑制效果，可能通過多條信號通路影響腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[。華蟾素也可以減輕結(jié)CRC患者的耐藥性，研究人員發(fā)現(xiàn)華蟾素可以增強(qiáng)CRC患者對嘧啶類藥物的化療敏感性，可能與調(diào)節(jié)缺氧誘導(dǎo)因子和血管內(nèi)皮生長因子有關(guān)[20]。另外華蟾素可以明顯減輕癌癥患者的痛苦，研究發(fā)現(xiàn)其與止痛藥物聯(lián)用時，可以顯著減輕患者的疼痛，減少相關(guān)毒副作用[20]

但由于華蟾素本身有一定的毒性，目前臨床應(yīng)用劑量掌握較難。

3.2華蟾素對CRC微環(huán)境的影響

3.2.1華蟾素抑制TAMs的極化有研究證明CRC可以促進(jìn)微環(huán)境中的巨噬細(xì)胞向M2-TAMs極化形成免疫抑制微環(huán)境，而華蟾素可以通過抑制TAMs來抑制CRC的進(jìn)展21。但遺憾的是該研究并未進(jìn)一步探究其中的具體機(jī)制。另一項研究表明，華蟾素可以抑制小鼠結(jié)腸炎的進(jìn)展，實驗發(fā)現(xiàn)華蟾素顯著降低了 的浸潤，并且降低了M1型巨噬細(xì)胞的數(shù)量和促炎細(xì)胞因子的表達(dá)[22。基于上述兩項研究，可以發(fā)現(xiàn)華蟾素對于巨噬細(xì)胞的影響并非單一抑制某一類巨噬細(xì)胞的極化影響疾病的進(jìn)展，而是在不同疾病環(huán)境發(fā)揮不同的作用。因此猜測華蟾素對巨噬細(xì)胞的影響可能是通過保持巨噬細(xì)胞極化的平衡影響疾病的進(jìn)展。

3.2.2華蟾素對CRC微環(huán)境中T細(xì)胞的影響CRC微環(huán)境中的T細(xì)胞種類復(fù)雜，主要起到抑制腫瘤作用。但并非所有T細(xì)胞都是抗腫瘤作用，例如 、 T細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞可以通過 T細(xì)胞的免疫逃逸機(jī)制逃脫免疫細(xì)胞的識別及殺傷。有研究證明華蟾素可以清除TME中的 、 T細(xì)胞，從而改善 和 細(xì)胞數(shù)量及免疫狀態(tài)，提高細(xì)胞毒性T細(xì)胞的功能，抑制腫瘤細(xì)胞生長[23]。另外早期研究還發(fā)現(xiàn)華蟾素治療后的腫瘤組織，T細(xì)胞亞群總體數(shù)量和活性顯著升高[24]。

4總結(jié)與展望

雖然免疫治療是現(xiàn)階段治療晚期癌癥的有效方法，但部分CRC對其并不敏感，針對TME的研究可能會突破這一桔。TME在CRC中的作用是一個比較活躍的研究領(lǐng)域。CRC中的TME所表現(xiàn)出來的功能主要為促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。目前研究發(fā)現(xiàn)TME中各細(xì)胞促進(jìn)腫瘤進(jìn)展的機(jī)制比較復(fù)雜，進(jìn)一步的深入研究其作用機(jī)制，有利于挖掘出有效的治療策略，以改善CRC患者的預(yù)后。盡管華蟾素已被廣泛應(yīng)用于臨床腫瘤治療，但其分子靶標(biāo)尚不清楚，找到華蟾素影響CRC微環(huán)境和抗腫瘤的具體機(jī)制，可更好地指導(dǎo)臨床用藥。

參考文獻(xiàn)

[1] SEDLAK J C，YILMAZ OMER H，ROPER J.Metabolism and colorectal cancer[J].Annual Review of Pathology， 2023，18： 467-492.

[2] BRAY F， FERLAY J， SOERJOMATARAM I， et al.Globalcancer statistics 2018： GLOBOCAN estimates of incidence andmortality worldwide for 36 cancers in 185 countries[J）.CA Cancer JClin，2018，68（6）： 394-424.

[3]XIAO Y， YU D H.Tumor microenvironment as atherapeutic targetin cancer[J].Pharmacology Therapeutics，2021，221：107753.

[4]孟昭陽，趙娟，朱琴芳，等.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和細(xì)胞實驗探討華蟾素注射液抗結(jié)直腸癌的作用機(jī)制[中國中藥雜志，2024，49（17）：4755-4767.

[5] DULUC D， DELNESTE Y，TAN F， et al.Tumor-associatedleukemia inhibitory factor and IL-6 skew monocyte differentiationinto tumor-associated macrophage-like cells[J].Blood， 2007，110（13）： 4319-4330.

[6] MANTOVANI A， MARCHESI F， MALESCI A， et al.Tumour-associated macrophages as treatment targets in oncology[J].NatureReviews Clinical Oncology，2017，14（7）： 399-416.

[7] WANG X，WANG J， ZHAO J H， et al.HMGA2 facilitatescolorectal cancer progression via STAT3-mediated tumor-associated macrophage recruitment[J].Theranostics， 2022， 12（2）：963-975.

[8] KAWADA M， SENO H， KANDA K， et al.Chitinase 3-like 1promotes macrophage recruitment and angiogenesis in colorectalcancer[Jl.0ncogene，2012，31（26）： 3111-3123.

[9] NANDI B， SHAPIRO M， SAMUR M K， et al.Stromal CCR6drives tumor growth in a murine transplantable colon cancerthrough recruitment of tumor-promoting macrophages[J/OL].Oncoimmunology，2016，5（8）：e1189052（2016-05-24）[2024-07-10].https：//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27622061/.DOI： 10.1080/2162402X.2016.1189052.

[10] KHANDURI I， MARU D M， PARRA E R.Exploratory studyof macrophage polarization and spatial distribution in colorectalcancer liver metastasis： a pilot study[J].Frontiers in Immunology，2023，14：1223864.

[11] RUSSELL D G，HUANG L，VANDERVEN B C.Immunometabolism at the interface between macrophages andpathogens[J]Nat Rev Immunology，2019，19（5）：291-304.

[12] MANTOVANI A， ALLAVENA P， MARCHESI F， et al.Macrophages as tools and targets in cancer therapy[J].NatureReviews Drug Discovery，2022，21（11）： 799-820.

[13] WANG H， TIAN T， ZHANG J H.Tumor-associatedmacrophages （TAMs） in colorectal cancer （CRC）：frommechanism to therapy and prognosis[J].International Journal ofMolecular Sciences，2021，22（16）：8470.

[14] LARIONOVA I， TUGUZBAEVA G， PONOMARYOVA A， et al.Tumor-associated macrophages in human breast， colorectal， lung，ovarian and prostate cancers[J].Frontiers in Oncology， 2020，10：566511.

[15] SHANG S L，JI X R，ZHANG L L，et al.MacrophageABHD5 suppresses NF k B-dependent matrix metalloproteinaseexpression and cancer metastasis[J].Cancer Research， 2019，79（21）：5513-5526.

[16] ONG S M，TAN Y C，BERETTA O， et al.Macrophages inhuman colorectal cancer are pro-inflammatory and prime Tcells towards an anti-tumour type-1 inflammatory response[J].European Journal Immunology，2012，42（1）：89-100.

[17] ZHENG Z，WIEDER T，MAUERERB，et al.T cells incolorectal cancer： unravelling the function different T cellsubsets in the tumor microenvironment[J].International Journal Molecular Sciences，2023，24（14）：11673.

[18]BELL H N，HUBER A K，SINGHAL R，et al.Microenvironmental ammonia enhances T cell exhaustion incolorectalcancer[J].CellMetabolism，2023，35（1）：134-149.

[19]劉曉東，張子璇，劉新辰，等.華蟾素抗腫瘤信號通路研究進(jìn)展[J].光明中醫(yī)，2024，39（10）：2105-2108.

[20]方云.華蟾素膠囊聯(lián)合鹽酸羥考酮緩釋片治療癌性疼痛療效觀察[J].黑龍江中醫(yī)藥，2023，52（6）：103-105.

[21]尚靖，王云，陳進(jìn)寶，等.華蟾素通過調(diào)控M2型巨噬細(xì)胞極化抑制結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移[J]安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2024，59（2）：224-229.

[22]劉細(xì)細(xì)，黎陳，楊箐，等.華蟾素對巨噬細(xì)胞炎癥因子風(fēng)暴的抑制作用及其機(jī)制研究[J.中國實驗血液學(xué)雜志，2023，31（3）：880-888.

[23]李春青，牛思強(qiáng)，貴永賢.華蟾素聯(lián)合化療治療消化道腫瘤對""T細(xì)胞的影響[J].泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2015，36（7）：747-749.

[24]羅展雄，倪秉強(qiáng)，鄭青平，等.華蟾素注射液對晚期惡性腫瘤患者T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞的影響[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2009，17（2）：340-341.

（收稿日期：2024-07-29）（本文編輯：陳韻）