PLGA桑枝多糖納米粒預防脂多糖誘導小鼠十二指腸炎癥的作用

圖分類號：S853.74 文獻標識碼：A 文章編號： 1000-4440（2025）07-1350-09

Preventive effects of PLGA Ramulus Mori polysaccharide nanoparticles on lipopolysaccharide-induced duodenal inflammation in mice

ZHANG Bin¹ ， MAO Ningning2， YU Yaming2， LIU Peng'， WU Caihong1，LU Hui1（1.Jiangsulsdrali；alUesi）

Abstract：Inorderto investigate the preventiveefectof polylacticacid-glycolicacid Ramulus Mori polysaccharide（PR） anoparticlesonlipopolysaccaride（LPS）-inducedduodenalinflammation，6Oeight-week-oldICRmicewereusedasxperimental materials，and normal saline gavage and intraperitoneal injection were used as controls（CON）.Themice were treated with normal saline gavage + LPS intraperitoneal injection（LPS），dexamethasone intraperitoneal injection + LPS intraperitoneal injection（DEX），poly（lactic-co-glycolic acid）（PLGA）Ramulus Mori polysaccharide nanoparticles gavage +LPS intraperitoneal injection（PR），RamulusMori polysaccharidegavage + LPSintraperitoneal injection （RMP），poly（lactic-co-glycolic acid） gavage + LPS intraperitoneal injection（PLGA），respectively.Aftersix hoursof treatment，thebody weightchanges of mice wererecordedandthe diseaseactivity index（ DAI ）scorewasperformed.Thelevels of inflammatory factorsinterleukin- 1β （IL- 1β ），tumor necrosis factor- α （TNF- α ），total antioxidant capacity（ T-AOC ），and superoxidedismutase（ SOD ）activity，nitricoxide（NO）contentand malondialdehyde（MDA）content inserumand duodenum were detected.Thechangesof intestinal morphologyand intestinalbarrier were observed，andthemRNArelative expresionlevelsof mucin2（MUC2）andoccludinwere detected tocomprehensively evaluate thepreventiveefectofPRnanoparticlesagainstLPS-inducedduodenalinflammation.Theresultsshowedthatompared with the control（CON），the diarrhea of LPS-treated mice were obvious，the DAI indexwas extremely significantly increased， and the body weight of mice was extremely significantly decreased.The contents of IL- 1β ，TNF- α and NO in serum and duodenumofmiceincreased extremelysignificantly，the T_-AOC and SOD activityin serumdecreasedextremelysignificantly，andthe contentfMDAincreasedextremelysignificantly.Themorphologicaltructureofduodenuminmicewasabnormal，thelengthof intestinalviliandthedepthofcryptweredecreased，andthenumberofgobletcellsasalsodecreased.TherelativemRAexpresionlevelsof MUC2and Occudinintheduodenumofmice were extremelysignificantlydecreased.ComparedwithLPS treatment，theclinicalsymptomsofPRnanoparticletreatmentandRMPtreatmentweresignificantlyalleviated，theintestialtissue structuredisorder wassignificantlyimproved，thescretionofiflammatorycytoineswasrduced，theantioxidantcapacityofthe serumwa improved，theelativeexpresionlevelsofintestialMUC2andOccudinmAwereincreased，ndtheduodealinflammationinducedbyLPSwasaleviated.TheefectofPRnanoparticletreatmentwasbeterthanthatofRMPtreatment.Inconclusion，PLGARamulus Mori polysaccaridenanoparticles haveagood preventivefectonLPS-inducedenteritisandcanbe used as acandidate drug for anti-enteritis.

Key words： PLGA；Ramulus Mori polysaccharide； lipopolysaccharide （LPS）；duodenum；enteritis

革蘭氏陰性菌主要通過侵襲腸道黏膜、產生毒素，進而引起動物腸道炎癥，造成動物出現腹瀉、免疫力下降、營養不良等癥狀，嚴重者甚至死亡，是引發腸炎的重要病原菌[1-2]。脂多糖（LPS）是革蘭氏陰性菌感染時釋放到宿主動物體內的主要毒性因子。LPS可介導免疫反應，引發腸道炎癥[3-4]。腹腔注射LPS可有效誘導小鼠（或其他動物）模型發生腸道炎癥反應，該過程不僅可以模擬革蘭氏陰性菌入侵腸道固有層后造成的腸炎，同時還可模擬由于機體自身免疫調節紊亂導致的免疫應激造成的炎癥反應[5]。因此，腹腔注射LPS是模擬動物腸炎的理想造模方法。

桑枝多糖作為桑枝的主要有效活性成分，具有調控免疫、抗炎、抗腫瘤及保護腎臟等多種活性功能[。但桑枝多糖是一種非淀粉類多糖，在動物體內的吸收利用率較低。為提高桑枝多糖在動物體內的吸收利用效率，使用納米粒載藥是一種有效策略。近年來，聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）因其優異的生物相容性、可降解性及緩釋性能，成為藥物遞送系統的常用載體，廣泛用于小分子藥物、核酸及天然活性成分的包載[7-8]。使用PLGA作為藥物載體包載桑枝多糖構建新型口服藥劑，不僅可以解決桑枝多糖在體內吸收利用率差和生物活性低等問題，還可以提高桑枝多糖在體內靶向性，增強其療效[9]。PLGA封裝桑枝多糖可提高桑枝多糖在動物腸道中的吸收效率，延長桑枝多糖在腸道的滯留時間，并借助腸道黏膜對PLGA的黏附性促進桑枝多糖在腸道病灶部位的富集[10-I1]。PLGA封裝桑枝多糖還可顯著提升桑枝多糖的生物利用度和抗炎效果，有效抑制促炎因子并調節免疫細胞功能，展現其作為新型抗炎納米藥物的治療潛力[12]。PLGA與桑枝多糖聯合策略為天然多糖的高效利用和疾病防治提供了新思路，但其在臨床上的應用尚需進一步的藥效學和安全性評估。

本研究通過腹腔注射LPS建立小鼠腸炎模型，采用PLGA桑枝多糖（PR）納米粒預防性灌胃的措施，根據小鼠的疾病活動指數（DAI）、病理生理學分析及腸道蛋白表達水平等指標評估PR納米粒對LPS誘導的小鼠腸炎的緩解作用及預防機制，為PR納米粒緩解腸炎的應用提供理論基礎。

1材料與方法

1.1 主要試劑

96.5% 桑枝多糖購自楊凌慈緣生物技術有限公司，批號CY200704；相對分子量18000的聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA，乳酸與羥基乙酸按摩爾比3：1 配制）購自濟南岱罡生物科技有限公司，批號2020061709；泊洛沙姆188購自上海源葉生物科技有限公司，批號S30691；LPS（批號S1732）、NO檢測試劑盒（批號S0021S）購自碧云天生物技術有限公司；蘇木精-伊紅（HE）染色試劑盒（BH0001）、過碘酸-希夫（PAS）染色試劑盒（ BH0003 ）購自武漢博爾夫生物技術有限公司；白細胞介素- 1β （IL- 1β ）（EK201B）、腫瘤壞死因子 ?α （TNF- α ）（EK282）ELISA檢測試劑盒購自杭州聯科生物技術股份有限公司；總抗氧化能力（T-AOC）檢測試劑盒（A015-2-1）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）測定試劑盒（A001-3-2）丙二醛（MDA）含量測定試劑盒（A003-1-2）購自南京建成生物工程研究所；RT-qPCR試劑盒（AUQ-01）購自北京全式金生物技術股份有限公司。其余試劑均為分析純。

1.2 主要儀器

ATPIO-3000D超聲波細胞破碎儀購自南京先歐儀器制造有限公司；LR4000旋轉蒸發儀購自德國海道爾夫公司；BioMate3S分光光度計和NanoDropND-1000分光光度計購自美國賽默飛公司；Hydrc 2000Mu 型粒徑分析儀和ZETASIZERNano-ZS90激光粒度分析儀購自英國馬爾文公司；85-1型磁力攪拌器購自上海志威電器有限公司；TDL-880-2B型離心機購自上海安亭科學儀器廠；UV-2450紫外可見分光光度計購自日本島津公司。

1.3PLGA桑枝多糖（PR）納米粒的制備

參照文獻[12]的方法制備PR納米粒。稱取50mg 桑枝多糖溶解于 1mL 超純水中，充分溶解；量取 100μL 桑枝多糖溶液，加入含有 50mg PLGA的 1.25mL 二氯甲烷中；冰浴條件下，利用超聲探頭超聲處理 1min ，以生成穩定的初乳；將獲得的穩定初乳注入含有 88mg 丙二醇嵌段聚醚（F68）的10mL超純水中，冰浴條件下超聲 5min ，以形成復乳；室溫條件下利用磁力攪拌的方式攪拌復乳，至復乳中的二氯甲烷完全揮發，得到穩定的乳液，凍干后即得PR納米粒。

1.4 動物分組與試驗設計

60只購自揚州大學比較醫學研究院的8周齡ICR小鼠[（ 28±2 ） g] 適應性喂養7d后，稱重并隨機分為6組，每組8～12只，分別進行生理鹽水、0.18mg/mL 地塞米松（DEX） .1.8mg/mL PLGA桑枝多糖（PR） .1.8mg/mL 桑枝多糖（RMP） .1.8mg/mL PLGA（PLGA）灌胃處理。其中，2組為生理鹽水灌胃。每天灌胃1次，灌胃量均為 0.5mL ，連續 7d 。第8d稱量小鼠體重，記為 W1 。稱重后，2個生理鹽水灌胃處理組小鼠分別進行 0.5mL 生理鹽水腹腔注射（CON）和 0.5mL 0.6mg/mL LPS腹腔注射（LPS），其他灌胃處理小鼠統一進行 0.5mL 0.6 mg/mL LPS腹腔注射。注射后 6h 對所有小鼠進行稱重，記為W2，同時記錄各組小鼠的臨床表現和糞便情況。稱重并記錄后，采集各處理小鼠眼球血液，分離血清后置于 -20^°C 備用；處死小鼠，采集各處理小鼠十二指腸，一部分于 -20^°C 凍存，用于炎性因子檢測；另一部分置于 4% 多聚甲醛固定液中固定，用于制作組織切片。

1.5 腸炎疾病活動指數評分

參照文獻［13]的方法進行各處理小鼠疾病活動指數（Diseaseactivityindex，DAI）評分。評分內容包括體重減輕評分、糞便狀態評分和糞便隱血評分。其中，體重無減輕，計0分，體重減輕 0.1%～5.0% 、5.1%～10.0%.10.1%～15.0%.15.1% 及以上分別計1分、2分、3分、4分；糞便正常顆粒狀，計0分，糞便稍松軟、中度松軟、不成形、水樣分別計1分、2分、3分、4分。糞便隱血陰性，計0分，糞便隱血弱陽性、陽性、強陽性、肉眼可見分別計1分、2分、3分、4分。3者相加即為DAI評分結果。

1.6十二指腸組織病理學檢測

十二指腸組織經 4% 多聚甲醛固定液固定后，用石蠟包埋，制作 5μm 厚切片，進行蘇木精-伊紅（Hematoxylin-eosin，HE）及過碘酸雪夫氏（Periodicacid-Schiff，PAS）染色，采用TS-100倒置顯微鏡（日本尼康公司產品））進行十二指腸組織病理學觀察，并根據結腸水腫程度、損傷程度及隱窩膿腫程度進行組織病理學評分和計算。

1.7小鼠十二指腸腸道組織及血清炎性因子檢測

將凍存的十二指腸組織取出，迅速切下約 0.1g 組織并稱重，加入 500μL1% 苯甲基磺酰氟（PMSF）溶液，充分研磨至無肉眼可見沉淀。收集液體，3000r/min 離心 10min ，取上清液于 -80^°C 冰箱保存。采集小鼠血液， ，3 000r/min 離心 10min ，收集上清液于 -20^°C 冰箱保存。用ELISA法檢測冰箱保存的十二指腸組織上清液中 TNF- ?α 質量濃度、IL- ^1β 質量濃度、NO濃度及血清上清液中TNF- ?α 質量濃度 ?IL-1β 質量濃度。

1.8小鼠血清氧化應激水平檢測

參照超氧化物歧化酶（SOD）、總抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）試劑盒說明書，采用Multi-skanFC多功能酶標儀［賽默飛世爾（上海）儀器有限公司產品]檢測小鼠血清抗氧化應激水平，

1.9小鼠十二指腸緊密連接蛋白表達水平檢測

取 50mg 十二指腸組織，加入 1mL Trizol試劑研磨完全，離心取上清液;加入 200μL 三氯甲烷，快速振蕩 15s 混勻，室溫靜置 5min ， 12 000r/min 4 C 離心 15min ;將上層水相轉移至微量離心管（德國Eppendorf公司產品），加入等體積異丙醇，-20^°C 靜置 ^2h ;再次離心 15min ，棄上清后加 1mL 75% 乙醇，溫和振蕩懸浮沉淀， 8000r/min4‰ 離心5min ，洗滌2次，棄上清，室溫干燥后加入 100μL 焦碳酸二乙酯（Diethylpyrocarbonate，DEPC）水解得到小鼠十二指腸RNA。取少量RNA樣品用Nano-DropND-1000分光光度計檢測RNA濃度和純度。參照RNA反轉錄試劑盒HiScript@ⅡI RTSuperMix（南京諾唯贊生物科技股份有限公司產品）說明書進行反轉錄。將反轉錄得到的cDNA樣品稀釋5倍，然后，參照qPCR試劑盒ChanmQTMSYBR °ledast qPCRMasterMix（南京諾唯贊生物科技股份有限公司產品）說明書進行加樣，檢測黏蛋白2（MUC2）和閉合蛋白（Occludin）的mRNA表達水平。

1.10 數據統計與分析

利用SPSS18.0進行處理間差異顯著性分析，在0.05、0.01和0.001水平上分析處理間的差異顯著性。利用GraphPadPrism9.O軟件作圖。

2 結果與分析

2.1 不同處理對小鼠臨床表現及腹瀉的影響

不同處理小鼠臨床表現及腹瀉情況如圖1所示。從圖中可以看出，CON處理小鼠糞便成形且濕度適中，小鼠反應敏捷，背毛光澤，活動狀態正常。與CON處理相比，LPS處理小鼠腹瀉癥狀明顯，糞便增多且多呈稀糊狀，多數小鼠背腰弓起，背毛蓬亂，反應遲鈍。與LPS處理相比，DEX、PR、RMP處理小鼠腹瀉程度較輕，可觀察到部分成形的糞便，糞便量較少，小鼠背毛比LPS處理平順光滑，反應敏捷，呈弓背狀小鼠數量減少。PLGA處理小鼠腹瀉減輕，但其糞便仍然呈稀糊狀。

CON：灌胃 0.5mL 生理鹽水 ^7d+ 腹腔注射 0.5mL 生理鹽水；LPS：灌胃 0.5mL 生理鹽水 ^7d+ 腹腔注射 0.5mL0.6mg/mI 脂多糖（LPS）；DEX：腹腔注射 0.5mL0.18mg/mL 地塞米松 ^7d+ 腹腔注射 0.5mL0.6mg/mL LPS;PR：灌胃 聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）桑枝多糖 ⁷d+ 腹腔注射 0.5mL0.6mg/mL LPS;RMP：灌胃 0.5mL1.8mg/mL 桑枝多糖 ^7d+ 腹腔注射 0.5mL0.6mg/mL LPS;PLGA：灌胃 0.5mL1.8mg/mL PLGA ^7d+ 腹腔注射 0.5mL0.6mg/mL LPS。

圖1不同處理小鼠臨床表現和腹瀉程度

Fig.1 Clinical manifestationsand degree of diarrhea of mice ineach grouj

2.2不同處理對小鼠體重和疾病活動指數 （DAI） 的影響

不同處理對小鼠體重及DAI的影響如圖2所示。LPS注射前各處理小鼠體重無顯著性差異（圖2A）。如圖2B、圖2C所示，LPS注射 6h ，LPS處理小鼠體重極顯著低于CON，DAI極顯著升高。DEX、PR、RMP處理小鼠體重顯著或極顯著高于LPS處理，分別比LPS處理增加 6.7% 、5.0%.3.3% ;DEX、PR、RMP處理小鼠 DAI 極顯著低于LPS處理。PR處理與DEX處理小鼠體重和 DAI 無顯著差異，說明這2個處理的預防效果一致。

圖2不同處理小鼠體重和疾病活動指數 （DAI） 變化

2.3不同處理對小鼠十二指腸形態的影響

不同處理小鼠十二指腸形態如圖3所示。從圖中可以看出，對照（CON）小鼠十二指腸黏膜絨毛密集且排列整齊，形態結構正常（圖3A1和圖3A2）；LPS處理十二指腸出現明顯損傷，腸絨毛斷裂與脫落、隱窩結構破壞，炎性細胞浸潤（圖3B1和圖3B2）；DEX、RMP處理十二指腸形態趨于完整（圖3C1、圖3C2、圖3E1、圖3E2）；PR處理小鼠十二指腸黏膜層結構完整，腸絨毛整齊排列，未見絨毛脫落，炎性細胞浸潤減少（圖3D1、圖3D2）；PLGA處理小鼠十二指腸損傷明顯（圖3F1和圖3F2）。由圖3G、圖3H可以看出，LPS處理小鼠絨毛長度和隱窩深度均極顯著低于CON;DEX處理、PR處理、RMP處理小鼠十二指腸絨毛長度顯著或極顯著高于LPS處理；DEX處理、PR處理、RMP處理小鼠十二指腸隱窩深度顯著或極顯著高于LPS處理，其中，PR處理與LPS處理的隱窩深度差異極顯著。上述結果表明，PR可緩解LPS誘導的小鼠十二指腸損傷。

圖3不同處理小鼠十二指腸形態學特征

Fig.3Morphologicalcharacteristicsof duodenuminmicewithdifferent treatments

CON、LPS、DEX、PR、RMP、PLGA見圖1注。*、**、***分別表示處理在 0.05，0.01，0.001 水平上差異顯著。

2.4不同處理對小鼠十二指腸和血清炎性因子的影響

不同處理對小鼠十二指腸和血清中炎性因子的影響如圖4所示。從圖中可以看出，與CON相比，LPS處理小鼠十二指腸和血清中IL- 1β 質量濃度和TNF- ?α 質量濃度均極顯著升高，十二指腸中NO濃度亦極顯著上升，說明LPS能誘導小鼠十二指腸炎癥；DEX、PR、RMP處理十二指腸中TNF- ?α 質量濃度和NO濃度及血清中IL- 1β 質量濃度與TNF- ?α 質量濃度顯著或極顯著低于LPS處理，PR、RMP處理十二指腸中 IL-1β 質量濃度亦顯著或極顯著低于LPS處理。上述結果說明，RMP處理可降低機體炎性因子含量，經PLGA包封后的RMP可進一步降低十二指腸及血清中炎性因子水平，發揮明顯的抗炎作用。

圖4不同處理小鼠十二指腸和血清炎性因子變化

Fig.4Changesof inflammatoryfactors induodenumandserumofmicewithdifferent treatment：

2.5 不同處理對小鼠血清氧化應激指標的影響

不同處理小鼠血清氧化應激指標的變化如圖5所示。與CON相比，LPS處理小鼠血清中T-AOC和SOD活性極顯著降低，而MDA含量極顯著增加，說明LPS能誘導小鼠機體氧化應激的發生。與LPS處理相比，PR處理和RMP處理T-AOC和SOD活性顯著或極顯著增加，MDA含量極顯著降低，而DEX處理T-AOC、SOD活性及MDA含量與LPS處理均無顯著差異。上述結果表明，RMP處理和PR處理均可發揮抗氧化作用，防止機體氧化應激，其中PR處理效果更好。

2.6不同處理對小鼠十二指腸腸道屏障功能的影響

杯狀細胞可分泌黏蛋白以阻止病原微生物侵入腸道，杯狀細胞的富集說明腸屏障功能完整。不同處理小鼠十二指腸PAS染色結果如圖6所示。十二指腸中杯狀細胞陽性區域經PAS染色后呈紫紅色，CON處理小鼠腸道黏膜上皮層可見大量杯狀細胞，且排列整齊（圖6A）；LPS處理腸道黏膜層結構被破壞（圖6B），杯狀細胞數量和陽性細胞區域面積占比均極顯著低于CON處理，表明LPS處理能誘導十二指腸的腸道屏障功能損傷。DEX、PR、RMP處理黏膜上皮層杯狀細胞數量和陽性細胞區域面積占比均極顯著高于LPS處理，說明DEX、PR、RMP處理可減輕LPS誘導的十二指腸腸道屏障功能的損傷，其中PR處理的預防效果最好。

圖5不同處理小鼠血清氧化應激指標變化Fig.5Changesof mouse serum oxidativestressindiceswith different treatments

CON、LPS、DEX、PR、RMP、PLGA見圖1注。 T_-AOC ：總抗氧化能力； soD ：超氧化物歧化酶；MDA：丙二醛。*、**、***分別表示處理間在0.05、0.01、0.001水平上差異顯著。

CON、LPS、DEX、PR、RMP、PLGA見圖1注。**、***分別表示處理間在 0.01、0.001 水平上差異顯著。

圖6不同處理小鼠十二指腸PAS染色結果

Fig.6Results ofPAS staining of duodenum inmicewithdifferenttreatments

2.7不同處理對小鼠十二指腸黏蛋白及緊密連接蛋白表達水平的影響

不同處理小鼠十二指腸黏蛋白MUC2及緊密連接蛋白Occludin的mRNA相對表達水平如圖7所示。LPS處理黏蛋白2（Mucin2，MUC2）和閉合蛋白（Occludin，OCLN）的mRNA相對表達水平極顯著低于CON，說明LPS處理破壞了腸道黏膜屏障；DEX、PR、RMP處理十二指腸MUC2的mRNA相對表達水平顯著或極顯著高于LPS處理。PR處理Occludin的mRNA相對表達水平總體上高于DEX、RMP、PLGA處理，表明PR處理能更有效地預防LPS誘導的腸屏障損傷。

CON、LPS、DEX、PR、RMP、PLGA見圖1注。*、**、***分別表示處理間在0.05、0.01、0.001水平上差異顯著。

圖７不同處理小鼠十二指腸MUC2蛋白和Occludin蛋白的mRNA相對表達水平 Fig.7Relative mRNA expresson levels ofMUC2 protein and Occludin protein in duodenum of mice with diferent treatment

3討論

桑枝多糖是從桑樹枝干中提取的一種多糖類化合物，主要由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等單糖組成，具有抗氧化、抗炎、降血糖、降血脂、增強免疫力等作用[14]。作為一種大分子多糖，桑枝多糖經口服給藥后的生物利用率通常較低，且易受到腸道內酶的影響而分解，因此攝入的多糖僅有少部分可被機體吸收利用，影響其藥效。藥物遞送系統通過改善藥物溶解度和穩定性，可提高藥物生物利用率。PLGA納米粒是一種生物可降解的共聚物和重要的藥物遞送載體系統，具有良好的生物相容性和可降解性，因而被廣泛應用于藥物遞送領域[7-8]。Morelli等[10]研究證實，PLGA納米?？韶撦d桑枝多糖，所制備的PR納米粒在體外LPS誘導的巨噬細胞炎癥模型中表現出良好的抗炎作用?；赑R納米粒的抗炎作用，本研究采用溶劑揮發法制備獲得PR納米粒，并利用LPS構建小鼠十二指腸炎癥模型，研究發現LPS誘導的小鼠出現明顯的弓背、體重下降、腹瀉等癥狀，DAI顯著升高，這符合腸炎模型的臨床表現；PR納米粒預處理可減輕LPS所致的小鼠體重降低和DAI升高，改善腹瀉癥狀，說明PR納米粒具有預防十二指腸炎癥作用。

LPS是一種具有強烈炎性刺激作用的物質，可激活腸道黏膜炎性細胞，如單核細胞和巨噬細胞，并促使其釋放IL- 1β 和TNF- ?α 等炎性細胞因子，進而引發炎癥[15]。McGarry等[16]的研究結果表明，炎性介質可促進組織中過氧化物和氧自由基集聚，過多的氧自由基又可攻擊細胞，誘導氧化應激，進一步介導炎性介質釋放，從而導致炎癥反應惡性循環。本研究結果顯示，與CON相比，LPS組小鼠血清和十二指腸中 IL-1β 質量濃度、TNF- ?α 質量濃度及十二指腸中NO濃度極顯著升高，T-AOC含量和 SOD 活性極顯著降低，MDA含量極顯著升高；PR納米粒預處理可降低LPS誘導的炎性細胞因子含量，提升血清總抗氧化水平和 SOD 活性，降低血清的MDA含量，這可能是PR納米粒緩解十二指腸炎癥的主要途徑。

Vancamelbeke等[17]研究發現，腸道持續處于炎性細胞浸潤的狀態可導致腸通透性增加，進一步破壞腸道形態和屏障功能。腸屏障功能的完整性對阻止病原微生物入侵、預防腸道感染至關重要。腸屏障主要包括黏液屏障和機械屏障。MUC2是杯狀細胞的主要分泌物，與杯狀細胞共同構成腸道黏液屏障，是抵御病原微生物入侵的首要防線；以Occludin蛋白為主的緊密連接蛋白構成了腸道機械屏障，通過連接腸道上皮細胞，形成緊密連接，防止有害物質通過細胞間隙進入腸道黏膜[18-19]。He等[20]的研究結果表明，LPS處理可降低十二指腸腸絨毛長度和隱窩深度，減少杯狀細胞數量，并下調緊密連接蛋白表達量，從而導致腸屏障功能受損。本研究結果同樣表明，經LPS處理后，小鼠十二指腸腸絨毛長度和隱窩深度降低，杯狀細胞數量極顯著降低，且MUC2蛋白和Occludin蛋白的mRNA相對表達水平均極顯著低于對照（CON）；PR和RMP預處理均可減輕LPS引起的腸屏障功能損傷，其中PR處理的預防效果更好。

4結論

PR納米?？赏ㄟ^降低炎性細胞因子分泌量和減少氧化應激發生，從而保護十二指腸屏障功能，進而緩解腸炎癥狀。PR納米?？勺鳛橐环N有效藥物預防和緩解LPS所致的腸道炎癥。

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（責任編輯：石春林）

收稿日期：2024-11-09

基金項目：國家自然科學基金項目（31702286）；2023年江蘇省職業院校學生創新創業培育計劃項目（GG-2023-0725）；泰州市科技支撐計劃（農業）項目（TN202119）；農牧產業核心技術創新項目（NSF2023ZR01）

作者簡介：張斌（1975-），男，山西大同人，碩士，教授，研究方向為動物疾病防控。（E-mail）binzhang021@126.com

通訊作者：武彩紅，（E-mail） caihongwu616@aliyun.com;陸輝，（E-mail） jsmytg@126.com