碧江區淡水魚類鏈球菌感染情況調查及耐藥性分析

中圖分類號：S941.42 文獻標識碼：A

文章編號：1006-3188（2025）03-036-03

魚肉因肉質鮮美、富含蛋白質且低膽固醇和脂肪而廣受消費者的喜愛，在魚類養殖、運輸、宰殺和售賣等環境容易被致病菌污染，且部分致病源可感染人，對公共健康具有潛在的威脅[1]。鏈球菌是一種廣泛存在于自然界的人畜共患細菌性病原，鏈球菌可感染多種經濟魚類，其中包括黃顙魚、羅非魚和銀鯧等[2-3]。此外，部分血清型的鏈球菌可通過黏膜或消化道感染人，并引起嚴重的臨床癥狀，其中包括新生幼兒的腦膜炎和妊娠孕婦的敗血癥等[4]。

為初步調查碧江區加工魚類鏈球菌攜帶情況，于2023年3月一2024年8月從碧江區超市、集貿市場和魚類養殖基地共收集312尾淡水魚，通過細菌分離和革蘭氏染色鑒定初步調查鏈球菌污染情況，同時對鏈球菌分離株進行耐藥性分析，旨在為該病的防控提供依據。

1材料與方法

1.1樣品來源

2023年3月一2024年8月，從碧江區川磵街道、滑石鄉、壩黃鎮和和平鄉的部分超市、集貿市場和漁場共收集312尾淡水魚。從超市、集貿市場和漁場采集淡水魚數量分別為83、109和120尾，其中鯉、羅非魚、草魚、黃顙魚和鯽數量分別為63、41、45、60和103尾/份。將活魚置于潔凈的封口袋內，標記相關信息后低溫送至病原檢測實驗室。

1.2病原分離與革蘭氏染色鑒定

在無菌操作臺下，用火焰灼燒過的滅菌環蘸取魚表面和深層組織樣品液體后在鮮血瓊脂固體培養基表面進行劃線。將瓊脂平板置于 37% 恒溫箱內18～24h，從平板上挑取表面光滑、濕潤且透明的單一菌落進行革蘭氏染色，其后根據分離菌的形態學特征對其進行鑒定，并統計被檢樣本鏈球菌檢出率。

1.3分離菌耐藥性試驗

用滅菌槍頭挑取單一菌落于增菌培養液中進行增菌，用滅菌生理鹽水將菌液適量稀釋配置為0.5麥氏濃度，取 100μL 稀釋液于 5% 鮮血瓊脂固體培養基表面進行涂布，待菌液稍干后貼上含抗生素的藥敏紙片，每個平皿放4種藥敏紙片。將平血置于 37% 恒溫箱 24h ，其后采用游標卡尺測定各藥敏紙片對應的抑菌圈直徑，根據直徑大小判斷分離菌對各種抗生素的

敏感性。

2結果與分析

2.1碧江區淡水魚類鏈球菌污染情況調查結果

收集的312尾淡水魚，共14尾淡水魚被鏈球菌污染，平均檢出率為 4.49% （14/312）。結果列表1。不同地區來源淡水魚鏈球菌檢出率差異較大，其中滑石鄉來源樣品檢出率最高（ 8.05% ，7/87），而壩黃鎮來源淡水魚檢出率最低，為 1.56% （1/64）；不同品種淡水魚鏈球菌檢出率為 0.97%～12.20% ，其中羅非魚鏈球菌檢出率最高，為 12.20% （5/41），黃顙魚、草魚和鯉次之，分別為 6.67% （ 4/60 ）、4.44% （2/45）和 3.17% 國 2/63 ，僅1條鯽檢測為鏈球菌陽性，陽性率為 0.97% （ 1/103 ）。

表1碧江區淡水魚類鏈球菌污染情況調查結果

2.2不同采樣地點和季節淡水魚鏈球菌污染情況調查結果

根據樣品采集時間分為春季（3—5月）、夏季（6—8月）、秋季（9—11月）和冬季（12月，1—2月），收集的淡水魚數量分別為63尾、104尾、77尾和68尾，對應的檢出率分別為 1.59% （1/63）、7.69% （8/104）、 6.49% （5/77）和 0.0% （ （0/68） 。根據采集地點可分為超市、集貿市場和漁場，其中陽性樣品數量分別為3尾、7尾和4尾，對應的樣品鏈球菌污染率分別為 3.61% （3/83）、 6.42% （7/109）和 3.33% （4/120），詳見表2。

表2不同季節和采樣地點淡水魚鏈球菌污染情況調查結果

2.3分離菌藥敏試驗結果

為分析碧江區淡水魚攜帶鏈球菌耐藥情況，采用紙片擴散法分析分離獲得的14株鏈球菌對常見抗生素的耐藥性。結果如表3所示，14株鏈球菌分離株對磺胺甲氧嘧啶、慶大霉素、鏈霉素、卡那霉素和多黏菌素耐藥性均超過 50% ，其中對慶大霉素和卡那霉素耐藥性超過 80% ；分離株對氟苯尼考、恩諾沙星、四環素、土霉素、克林霉素、環丙沙星、氨芐西林、阿莫西林和頭孢曲松耐藥率均低于 20% 。

表3分離菌對14種常見抗菌藥耐藥率統計結果

3討論

鏈球菌廣泛分布于自然界，是一種十分常見的食源性病原，且近年來多地暴發人感染鏈球菌病的事件 [5-7] ，提示鏈球菌的流行不僅影響我國養殖業的健康發展，同時也嚴重威脅公共衛生健康。在魚類養殖、運輸和售賣過程中容易被食源性細菌污染，其中淡水魚感染鏈球菌的案例經常被報道[2-4]。因此，調查淡水魚鏈球菌污染情況和分離株耐藥情況對該病的防控十分重要。

本研究調查結果發現，碧江區5種淡水魚鏈球菌攜帶率為 4.49% （14/312），其中被調查的4個鄉鎮淡水魚鏈球菌攜帶率為 1.56%～8.05% ，說明該地區淡水魚鏈球菌攜帶率相對較低，但不同鄉鎮均存在淡水魚鏈球菌污染情況。進一步分析發現，不同品種淡水魚鏈球菌攜帶率差異較大，其中羅非魚和黃顙魚攜帶該病原的風險較其他魚類更高，這可能是本研究采集不同品種淡水魚樣品數量偏少，但也有可能不同魚類對鏈球菌的易感性存在差異，這還需要進一步研究。

分析不同季節淡水魚鏈球菌檢出率差異，可見夏季和秋季淡水魚鏈球菌檢出率高于春季和冬季，這可能是由于夏季和秋季氣溫偏高且潮濕，這有利于鏈球菌在自然環境中生長繁殖；而春季和冬季氣溫較低且干燥，這不利于鏈球菌在自然環境中生長和繁殖。分析不同采樣地點淡水魚鏈球菌攜帶情況，可見集貿市場來源淡水魚鏈球菌檢出率最高，而超市和漁場來源的淡水魚檢出率稍低，這可能是由于集貿市場衛生管理情況稍差，導致魚類在運輸和銷售（甚至是分割）過程中容易被環境中鏈球菌污染，導致檢出率偏高；而大部分超市環境衛生管理情況相對嚴格，故而淡水魚鏈球菌檢出率偏低。

近年來，隨著抗菌藥廣泛應用于魚類疫病防控，魚源鏈球菌對部分抗菌藥出現了較強的耐藥性，因此調查鏈球菌對常見抗菌藥的耐藥性對于該病的防控十分重要[4]。本研究調查結果發現，14株鏈球菌對磺胺甲氧嘧啶、鏈霉素、慶大霉素和卡那霉素等耐藥率高，這是由于近年來以上幾種抗生素廣泛應用于魚類疫病防控，導致相應的耐藥菌株出現與流行，這可能使得臨床上這幾種抗菌藥治療鏈球菌感染效果差；而本文分離獲得的14株鏈球菌對環丙沙星、氨芐西林、土霉素和四環素等耐藥率低，由于環丙沙星屬于禁用抗生素，故在養殖過程中可選用土霉素防控鏈球菌感染，同時嚴格遵守抗菌藥的休藥期，以期達到治療效果的同時減少耐藥菌株的出現。

除了使用抗生素防控淡水魚鏈球菌病，還可以采用中草藥和疫苗免疫用于防控該病。此外，通過健康養殖和強化管理來科學防控魚鏈球菌病，如通過控制養殖密度、改善水質和提供優質飼料來改善養殖環境；定期進行水質和病原監測，根據監測結果及時采取相應的防控措施。

參考文獻

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