四種蛇葡萄根類化學成分比較研究

摘 要：對蛇葡萄屬4種植物根的化學成分進行了薄層色譜比較，發現它們的部分化學成分較為相似，而且均含有羽扇豆醇、β-谷甾醇、胡蘿卜甙和兒茶素等。用薄層掃描法測定了它們的主要活性成分兒茶素的含量，其中異葉蛇葡萄根含量較高。

關鍵詞：蛇葡萄；光葉蛇葡萄；三裂葉蛇葡萄；異葉蛇葡萄；兒茶素

中圖分類號：R931.6 文獻標識碼：A 文章編號：1673-2197(2007)10-055-02

蛇葡萄[Ampe1opsis sinica (Miq.)W.T.Wang]是葡萄科蛇葡萄屬(Ampe1opsis)植物，民間用其根治療慢性骨髓炎、無名腫毒、淋病等多種疾病^[1]，但該屬多種植物的根與蛇葡萄根的性狀十分相似，存在混用現象。據筆者調察，湖北麻城地區用蛇葡萄、三裂葉蛇葡萄、光葉蛇葡萄、異葉蛇葡萄等4種植物的根作為蛇葡萄根，用以治療急慢性骨髓炎^[2]。為了解這些品種之間的相關性，本文對上述4種蛇葡萄屬植物根的已知成分對照進行了薄層色譜比較，用薄層掃描儀法對這些根中的兒茶素含量進行了測定。茲報道如下。

1 材料、儀器和藥品

實驗材料見表1，2003年7~9月采集于湖北麻城。原植物經湖北中醫學院陳科力教授鑒定，憑證標本留存于湖北中醫學院標本室。

對照品羽扇豆醇(Lupeol)、β-谷甾醇(β-Sitosterol)、胡蘿卜甙 (Daucosterol)、兒茶素(Catechin)等系作者從蛇葡萄根中提取分離，并經結構鑒定^[3，4]、含量測定，用兒茶素經重結晶多次，經HPLC測定含量高于98%。

儀器：CS-9000型日本島津薄層掃描儀。試劑：硅膠GF-254化學純，其它試劑為分析純。

2 方法和結果

2.1 薄層色譜比較

2.1.1 樣品溶液的制備 精密稱取上述各種植物材料于60℃干燥，取恒重的粉末(60目)2.50g，分置于索氏提取器中，用丙酮提取12小時，回收丙酮，將丙酮轉移至5ml容量瓶中，加丙酮至刻度。

2.1.2 對照品溶液的制備 分別稱取2.0mg羽扇豆醇、β-谷甾醇、胡蘿卜甙于2ml容量中，加氯仿至刻度，胡蘿卜甙瓶中加氯仿-甲醇(1：1)至刻度。精密稱取4.0mg兒茶素置于5ml容量瓶中加丙酮至刻度。

2.1.3 方法 吸附劑用硅膠GF254十0.5%CMC-Na，厚0.5mm，110℃活化30分鐘。樣品液點樣各15μl，對照品溶液各4μl。展開劑I：甲苯-丁酮-甲酸乙酯-甲醇-甲酸(7∶1∶1∶1∶0.5)；Ⅱ：甲苯-丁酮-甲酸乙酯(6∶2∶2∶0.5)。展距14cm。置于365nm波長紫外分析儀下觀察熒光；或噴2%香草醛濃硫酸試液，105℃烘烤約1分鐘，兒茶素斑點顯紅色，其它斑點呈紫色。

經兩種溶劑系統展開后所得的薄層色譜圖與對照品比較發現：4種蛇葡萄根中所含化學成分較為相似，且均含有羽扇豆醇、β-谷甾醇、胡蘿卜甙、兒茶素等。

2.2 含量測定

2.2.1 色譜條件 樣品液、標準品溶液、薄層板制備同上。以氯仿-丙酮-甲酸(5∶4∶1)上行展開l3cm，于254nm紫外光下確定兒茶素紫色斑點(RE≈0.7)，測定波長275nm，參比波長315nm。

2.2.2 標準曲線的制定 分別吸取lμl、2μl、3μl、6μl、8μl兒茶素對照品溶液各2份，點樣，掃描測定，得峰面積與濃度關系曲線：y=6.74×103X - 3.46×103，r=0.999，兒茶素在1.6~4.8μg范圍與峰面積呈良好線性關系，兒茶素展開后在2小時內較穩定，RSD=3.70%，n=10。

2.2.3 精密度、回收率測定 分別在同一薄層板測定同一份樣品以及不同薄層板測定同一份樣品的兒茶素含量，變異系數分別為2.81%和4.50% ，n=5。取同一種植物的6個不同樣品用加樣回收法測定，回收率為90.1±1.26%，n=6。

2.2.4 樣品測定 取各種樣品液2份，每份吸取6μl點樣，另取兒茶素標準液2μl、4μl各2份，點樣于同一薄層板上，展開后測定3次，用外標兩點法計算含量，結果見表1。

3 討論

經兩種不同溶劑系統展開的薄層色譜圖譜可見，4種蛇葡萄屬植物根中所含化學成分較為相似，均含有羽扇豆醇、β-谷甾醇、胡蘿卜甙、兒茶素等成分。筆者用其它多種薄層色譜溶劑系統比較亦證實了這一點。說明這幾種植物根在化學成分上有一定相似性。

薄層色譜圖譜顯示，幾種蛇葡萄根的熒光有一定的差異，其中以異葉蛇葡萄根的差別較大。這種差別是否因不同地區、不同時間采集而變化需要進一步研究。

參考文獻：

[1] 湖北中藥資源普查辦公室.湖北中藥資源目錄[M].北京：科學出版社，1990.

[2] 陳科力，羅毅，陳遠彬. 野葡萄根原植物的調查研究[J].中藥材，1996，19(4)：176-177.

[3] 陳科力. 蛇葡萄根化學成分的研究[J]. 中國中藥雜志，1996，21(5)：294-295.

[4] 張瓊光，譚文界，陳科力.異葉蛇葡萄根化學成分研究[J].中藥材，2003，26(9)：636-637.