牙齦卟啉菌陽性個體Ｔ細胞系細胞因子研究

摘 要 目的：研究健康者和成人牙周炎患者牙周組織中牙齦卟啉菌陽性個體T細胞系中白細胞介素-4、白細胞介素-10及γ-干擾素的比例。方法：Elisa法檢測牙齦卟啉菌陽性個體T細胞系中CD4⁺、CD8⁺T細胞所占比例，流式細胞儀檢測三種細胞因子數量。結果：兩組間3種細胞因子表達無顯著差異，但部分個體γ-干擾素表達高于其他兩種細胞因子的表達。結論：牙齦卟啉菌陽性個體易患牙周疾病者，γ-干擾素表達增高。

關鍵詞 細胞因子 T細胞 牙齦卟啉菌 牙周疾病

材料和方法

選取7例成人牙周炎患者，指標：至少4個位點上牙周袋>5mm，骨吸收>6mm，年齡47±3.35歲；10例健康或牙周僅有輕度炎癥者，炎癥位點不超過4個，骨吸收<3.5mm，年齡44.14±2.46歲。

牙齦卟啉菌(Pg)［1］及Pg血清學檢測；牙周探針深入牙周袋或齦溝內，取出后放入1mlPBS中，Elisa法進行Pg及Pg血清學檢測。

Pg培養(yǎng)：Pg ATCC33277，常規(guī)培養(yǎng)，提取其外膜物質，顯微鏡下觀察菌體。

T細胞系的制備：每例個體抽取5ml外周血，高密離心法獲取單個核細胞，37℃孵化14天，加入Pg抗體1周后，PBS洗細胞，靜置1周；加入IL-2，28天后Pg陽性T細胞系制備完成。

流式細胞儀檢測：PBS加0.1%鹽酸緩沖液沖洗T細胞以獲取其外膜物質，加入鼠抗人CD4或CD8抗體，4℃孵化30分鐘，分別加入IL-4，IFN-γ、IL-10抗體，選流式細胞儀檢測。進行統(tǒng)計學分析。

結 果

成人牙周炎、健康組兩組間CD4⁺、CD8⁺T細胞中IFN-γ與IL-4比值、IFN-γ與IL-10比值無顯著差異。

兩組間CD4⁺，CD8⁺T細胞IFN-7表達量高于IL-4、IL-10表達量。健康個體B的CD4⁺ T細胞中IL-4、IL-10表達高于IFN-γ；個體C的IL-10表達高于IFN-γ；CD8⁺T細胞中F、G個體IL-4或IL-10表達高于IFN-γ；成人牙周炎個體CD4⁺T細胞中，F(xiàn)、G個體IL-4表達高于IL-10，IL-10高于IFN-γ。其余個體均為IFN-γ表達量最高，成人牙周炎個體CD4⁺T細胞中，I、H、O、P、Q5例個體中IL-4和（或）IL-10表達高于或近似于IFN-γ；CD8⁺T細胞中，I、H、O、P、q、K6例個體中IL-4和（或）1L-10高于IFN-γ表達。

討 論

健康牙齦組織中T細胞記憶細胞不表達IL-4，成人牙周炎牙齦位點用Pg抗體刺激后表達高IL-4。這些研究結果表明，牙周疾病中IL-4的高表達可能打破了其他細胞因子間的平衡。

實驗證明，在牙周疾病中牙齦組織中IFN-γ表達顯著，本實驗中CD4⁺、CD8⁺T細胞系中IFN-γ表達量均高于IL-4、IL-10。根據以上數據推測，在牙周疾病過程中，牙齦牙周組織的破壞可能經由IFN-γ產生以及巨噬細胞等的潛在刺激引起［2］。Stein等已證實，成人牙周炎患者牙齦組織中IL-10表達量遠高于非炎性牙齦組織。同時IL-l0抗原可誘導膠原纖維減少［3］。

本研究結果表明，研究健康者和成人牙周炎患者間，牙周組織中牙齦卟啉菌陽性個體T細胞系中白細胞介素-4、白細胞介素-10及γ-干擾素表達無顯著差異，但部分個體γ-干擾素表達高于其他兩種細胞因子的表達，證實牙齦卟啉菌陽性個體易患牙周疾病者，γ-干擾素表達增高。

參考文獻

1 路寶風.牙齦卟啉茵的研究進展.臨析醫(yī)學專科學校學報，2002，24(1)：66-68.

2 楊瓊，王雷，房金波.牙齦卟啉菌表面蛋白的生物活性和免疫原性研究.分子科學學報，2003，19（3）：151-155.

3 謝紅帽，李昂，茍建重，等.牙齦卟啉菌菌毛的研究進展.陜西醫(yī)學雜志，2006，35(1)：89-91.