檢測方法及正常參考值范圍
檢測PCT較特異與敏感的分析方法:雙抗夾心免疫化學發光法(雙抗夾心法)和放射免疫分析法(RIA)。
雙抗夾心法運用雙單克隆抗體,其一作為捕獲抗體,直接結合PCT96-106氨基酸殘基,即未成熟CT:CCP-1部分,另一作為示蹤抗體,直接結合PCT70~76氨基酸殘基,即未成熟CT分子,人工合成的PCT作為標準。該方法比較特異,無交叉反應,其檢測最低濃度為10pg/ml,標準曲線線性范圍為10~60pg/ml。批內、批間變異系數分別為7%和8%。該法已有相應商品試劑,所需時間較短,易自動化,但不能檢測到正常人血清中PCT。
RIA使用一種對人工合成的aminoPCT特異的多克隆抗體RIB7。RIB7直接作用PCT的aminoPCT部分,故RIA既能檢測游離的PCT,又能檢測結合型的PCT,也可檢測降鈣素基因相關前體(Pro-CGRP)。此法可信的敏感度為4pg/m[1]。線性范圍10~77pg/ml,50%的結合游離比為140pg/ml。該法能檢測正常人血清PCT,故較雙抗夾心法敏感;另一優點是RIA與病程呈正相關(r=0.47,P=0.071)。RIA缺點是所需時間較長。
PCT檢測的臨床應用
血液腫瘤科:PCT有助于對細菌和真菌引起的系統性感染作出明確診斷。即使是化療患者,PCT對是否有敗血癥感染也能作出可靠的檢測和評估。PCT在免疫抑制和中性粒細胞減少患者中的表現與無免疫抑制患者中觀察的結果相似,其診斷價值已明顯優于CRP和細胞因子。骨髓移植或造血干細胞移植患者,均存在體液和細胞免疫缺陷,可掩蓋因細菌、真菌、病毒及原蟲引起的嚴重系統性感染。PCT濃度的升高對細菌性全身感染有很高的診斷率。如果同種異體移植后出現敗血癥休克,血漿PCT濃度極度升高,表明預后不良。
麻醉科:中小手術血漿PCT濃度通常在正常范圍內;大手術如大的腹部手術或胸部手術,術后1~2天內PCT濃度常升高,通常為0.5~2.0ng/ml,偶爾超過5ng/ml(這種情況常以24小時為半衰期,幾天內降至正常水平)。因此術后因感染造成的PCT高濃度或持續高水平很容易鑒別。復合創傷后12~24小時,PCT中度升高,可達2.0ng/ml,嚴重的肺或胸部創傷,PCT可達5ng/ml,如沒有感染并發癥,一般以半衰期速度降至正常范圍[2]。
內科:PCT選擇性地對系統性細菌感染、相似菌感染及原蟲感染有反應,而對無菌性炎癥和病毒感染無反應或僅有輕度反應。因此,PCT適用于內科醫療中常見的疾病和綜合征的鑒別診斷,如:成人呼吸窘迫綜合征感染性和非感染性病因學的鑒別診斷;胰腺炎感染壞死和無菌性壞死的鑒別診斷;鑒定感染時發熱,如接受化療的腫瘤和血液病患者;在接受免疫抑制劑的患者中,鑒別診斷慢性自身免疫性疾病的急性惡化與風濕性疾病伴系統性細菌感染;鑒別診斷細菌性腦膜炎與病毒性腦膜炎;對接受化療的中性粒細胞低下癥患者,明確是否存在有生命危險的細菌和真菌感染;對接受免疫抑制療法的器官移植患者,明確是否存在嚴重的細菌和真菌感染,同時用于感染和移植排斥反應的鑒別診斷。
移植外科:器官移植患者使用PCT檢測,可早期引入治療從而提高生存率并縮短住院時間。PCT用于器官移植患者感染的診斷,免疫抑制療法嚴重削弱了器官移植患者的抗感染能力,而PCT可早在感染發生僅2小時即可提示有系統性感染的存在。感染早期PCT>0.1ng/ml,其靈敏度77%,特異性100%,逐月的PCT濃度監測可對抗微生物療法的療效作出可靠的評價[3]。PCT應用于器官排斥反應、器官移植后監測的主要任務之一,就是能明確區分感染與器官排斥。因為PCT的釋放不是由急性或慢性器官排斥反應刺激引起的,所以若存在高濃度的PCT即可認為有感染存在。如果PCT濃度超過10ng/ml,98%可能是感染而非器官排斥。
新生兒科:與其他炎癥診斷指標相比,PCT是一種改進的實驗室指標,它對新生兒出生后敗血癥的診斷具有高度的靈敏度和特異性。PCT也可用于對治療結果的評價。早產兒和新生兒PCT年齡依賴性正常值:PCT于出生后24~30小時達其生理性高峰21ng/ml,但平均值僅為2ng/ml。出生后第3天起,PCT正常參考值同成人。PCT是新生兒敗血癥高度特異性的指標:早產兒和新生兒敗血癥感染,PCT可作出較傳統方法更早、更特異性的診斷,它對新生兒診斷的靈敏度和特異性可達100%。
兒科:PCT對細菌和病毒感染的鑒別診斷有很高的靈敏度和特異性。由于細菌感染和病毒感染治療上存在本質性的差別,因此PCT對具有非特異性感染癥狀的患者的治療可提供有價值的信息。高濃度的PCT只出現于細菌性腦膜炎;而病毒性腦膜炎PCT仍保持在正常范圍內(腦脊液中檢測不到PCT)。每天按時對PCT濃度進行監測,可對治療結果作出可靠的評價。
外科:術后PCT的應用,PCT與嚴重細菌和敗血癥感染的發生及其過程有密切的關系,能準確反映引起病變(如腹膜炎)的感染源是否得到根除。每天對PCT濃度進行監測,可對治療結果做出可靠的評價。PCT可用于手術創傷或復合創傷的監測。PCT用于心臟手術患者,心臟手術使用心肺機,即使患者有白細胞增多癥、中性粒細胞增多癥、嗜酸性細胞減少癥或CRP升高不充分等疾病,PCT濃度通常不升高或僅有輕微升高,故PCT很適合用于敗血癥的檢測。
參考文獻
1 Oberhoffer M,Stonans I,Russwurm S,et al.Procalcitonin expression in Human PeriPheral blood mononuclear cells and its mudalution by lipopolysaccharides and sepsis related cytokines in vitro.J Lab Clin Med,1999,134:49.
2 Michael Meisner.Procalcitonin-A new marker of severe infection and sepsis.Thleme,2000,179.
3 Hergert M,Kestln HG,Scherkus,et al.Procalcitonin in patients with the ACCP/SCCM consensus definitions than other specific markers of the inflammatory polytrauma.Clin Lab,1998,44:659.