芪桂益脈靈對大鼠心肌缺血再灌注損傷模型血清內皮素及降鈣素基因相關肽的影響

關鍵詞 心肌缺血再灌注 芪桂益脈靈 內皮素 降鈣素基因相關肽 大鼠

資料與方法

材料：普通Wister大鼠70只［SCXK(遼)2003-0012］，雌雄各半，200～250g，由沈陽市雙義實驗動物研究所提供。

藥品試劑:芪桂益脈靈由黃芪100g、桂枝20g、苦參20g、三七15g、黃連7.5g、龍齒20g、黨參50g、麥冬15g、五味子15g、炒棗仁20g十味中藥組成，經水煎濃縮；消心痛溶于生理鹽水，供實驗用。內皮素(ET)及降鈣素基因相關肽（CGRP）放射免疫分析藥盒均購自北京市。

動物模型制備：用20%烏拉坦(2ml/kg)腹腔麻醉大鼠。連接四道生理記錄儀，暴露左頸總動脈，插動脈套管以監測血壓。行氣管插管連接小動物呼吸機，頻率90次/分鐘，潮氣量12ml，呼∶吸為1∶1。沿胸骨左緣第3、4肋間逐層打開胸腔，輕壓暴露心臟，用穿有5-0縫合線的3/8彎針從左心耳下緣1mm處進針，鉤繞左冠狀動脈前降支主干，于肺動脈圓錐旁出針。兩線間放置一根聚乙烯小管，拉緊絲線形成閉環并用止血鉗固定即產生缺血，放松絲線即發生再灌注。心肌缺血依據心肌局部青紫、心電圖ST段上抬、放松絲線局部心肌反應性充血、ST段下移、出現心律失常，表明再灌注成功。

分組及處理：70只Wister大鼠隨機分為七組（每組10只），正常對照（Normal）組：灌服生理鹽水12ml/（kg·日），不造模；假手術（Sham）組：灌服生理鹽水12ml/（kg·日），造模時完成全部手術操作，只穿線不結扎；缺血再灌注（I/R）組：灌服生理鹽水12ml/（kg·日），造模時持續缺血30分鐘，再灌2小時；缺血預適應（IPC）組：灌服生理鹽水12ml/（kg·日），造模時先行3次缺血5分鐘，再灌5分鐘，然后缺血30分鐘，再灌2小時；消心痛（ID）組：灌服消心痛2.7mg/（kg·日），造模按I/R組操作；芪桂益脈靈低劑量（QGYMLL）組：灌服芪桂益脈靈10g/（kg·日），造模按I/R組操作；芪桂益脈靈高劑量（QGYMLH）組:灌服芪桂益脈靈20g/（kg·日），造模按I/R組操作。上述藥物在實驗前制成等體積(12ml/kg)混懸液備用，連續灌服7天。末次給藥后1小時，冠狀動脈結扎復制心肌缺血模型。

ET、CGRP的檢測：實驗結束后，動脈采血2ml，用于實驗。按照試劑盒操作說明，用放免法測定血清ET及CGRP。

統計學處理：所有數據以均數±標準差（X±S）表示，用SPSS13.0進行單因素方差分析，組間比較采用q檢驗。P＜0.05表示差異具有顯著性。

結 果

各組動物血清ET及CGRP含量變化（見表）。

結果表明：Normal組與Sham組相比，血清ET及CGRP均無顯著性差異（P>0.05）；I/R組、IPC組、ID組、QGYMLL組、QGYMLH組與Sham組相比血清ET均升高（P<0.01），血漿CGRP均降低（P<0.01）；IPC組、ID組、QGYMLL組、QGYMLH組與I/R組比較血清ET降低(P<0.01)，血漿CGRP升高(P<0.01)，而IPC組、ID組、QGYMLL組、QGYMLH組組間無顯著性差異(P>0.05)。

討 論

近年來的研究表明，心肌缺血再灌注時，冠狀動脈血管內皮細胞缺血、缺氧，直接或間接刺激ET前體原基因的轉錄，促進ET的釋放。ET是由血管內皮細胞釋放的人體內最強的縮血管活性肽，過量釋放可引起冠狀動脈強烈痙攣，心肌缺血壞死，并使梗死面積擴大，進一步加重血管內膜損傷。CGRP是目前已知的最強的舒血管活性多肽，有研究發現，一次短暫缺血發作就可引起CGRP的明顯釋放，提示CGRP可能是一種內源性心肌保護物質。

心肌缺血再灌注損傷的中醫病機以心氣虧虛為本，血脈瘀阻為標。本實驗選擇具有益氣養心、行氣活血、通調血脈的芪桂益脈靈，從中藥藥理性預適應的角度探討了其對心肌缺血再灌注損傷的保護作用，證實了缺血預適應和芪桂益脈靈預處理可以使血ET減少，血CGRP增加。

芪桂益脈靈是治療冠心病心絞痛的有效方劑。方中黃芪益氣補心，桂枝溫陽通經，二藥配合補心氣通心脈為主藥；黨參助黃芪補氣養心、行氣活血作用，三七有活血化瘀、養血行血通脈之功，故為臣藥。該方通補兼施，標本兼顧，恰中心肌缺血再灌注損傷的病機。另外，黃芪具有調節抗再灌注損傷的作用，這種作用很可能是其心肌保護效應的機制之一。黨參、麥冬、五味子能增加冠脈血流量，改善心肌供血，調整心肌代謝，降低心肌耗氧量，增強機體的抗缺氧能力，并能調節血壓，改善左室功能，增加左室射血分數，改善微循環，并使血漿纖維蛋白含量減少。目前藥物理預適應的研究主要集中在單味中藥或有效成分，探討復方藥理預適應是否可以通過多途徑、多機制模擬缺血預適應啟動心肌的內源性調控保護，具有深遠的意義。