ＴＮＦ－α測定對結核性胸膜炎的診斷價值

摘 要 目的：探討腫瘤壞死因子（TNF-α）測定對診斷結核性胸液的價值。方法：采用雙抗體夾心ELISA法對結核性及癌性胸液TNF-α測定。結果：結核性胸膜炎組TNF-α與惡性胸腔積液組差異有顯著性（P＜0.01）。對診斷結核性胸膜炎的敏感性是85.3%，特異度是83.3%。結論：TNF-α測定對結核性胸膜炎的診斷具有一定臨床意義。

關鍵詞 結核性 胸液 診斷

資料及方法

2006年12月～2007年12月的64例胸液標本為吉林大學第一醫院呼吸科、腫瘤科及長春市傳染病醫院住院患者標本，并明確診斷。64例病例隨機分為兩組。結核性胸膜炎組34例，其中男20例，女14例，年齡18～67歲。診斷標準：①有結核中毒癥狀；②伴有肺部結核病灶；③胸水為滲出性改變；④抗結核治療2～4周有效，且胸水吸收快；⑤痰涂片或痰培養找到結核桿菌；⑥胸水中找到抗酸桿菌；⑦胸膜活組織檢查病理有典型的結核改變。惡性胸腔積液組30例，其中男23例，女7例，年齡47～73歲，均經病理學或細胞學檢查明確。健康對照組20例，均系健康工作人員。

檢測方法：采用酶聯免疫吸附法（ELISA），嚴格按試劑盒所附說明進行操作。具體步驟：①設標準曲線的TNF-α標準濃度（500、250、125、62.5、31.25、15.60pg/ml）；②加入已按要求倍數稀釋的TNF-α標準液和標本100μl至相應孔內，用封板膠紙封住反應孔。室溫（20～25℃）120分鐘；③按洗滌方法洗板；④除空白孔外，每孔加按說明要求稀釋的生物素標注的二抗100μl，封住板孔。室溫（20～25℃）90分鐘；⑤按洗滌方法洗板；⑥除空白孔外，每孔加已按要求稀釋的酶聯物100μl，封住板孔。室溫（20～25℃）30分鐘；⑦按洗滌方法洗板；⑧每孔加底物A、B（各1滴或50μl/孔）避光10～30分鐘，視顯色情況靈活掌握；⑨每孔加終止液50μl，即刻在450nm酶標儀測定標本的吸光度，畫出標準曲線，由標準曲線算出標本的TNF-α水平。

統計學處理；實驗結果用pg/ml表示，先行方差分析，然后兩樣本均數比較用t檢驗。

結 果

結核性胸膜炎組血清和胸腔液TNF-α（303.7±79.9pg/ml）明顯高于惡性胸腔積液組（56.7±36.3pg/ml），經統計學處理，P＜0.01。兩組血清TNF-α含量（48.2±8.9pg/ml、47.3±6.5pg/ml）比較無顯著差異（P＞0.05）。結核性胸膜炎TNF-α水平明顯高于血清含量（P＜0.01），可見兩者之間無相關性。結核性胸液TNF-α＞75pg/ml［1］29例。惡性組5例陽性。

胸液和血清TNF-α水平（X±S）：結核組胸液303.7±79.9 pg/ml，血清48.2±8.9pg/ml；惡性組胸液56.7±36.3pg/ml，血清47.3±6.5pg/ml；健康對照組血清40.2±2.1pg/ml。見表1。

討 論

胸膜炎是胸膜的炎癥，可由于感染（細菌、病毒、霉菌、阿米巴、肺吸蟲等）、腫瘤、變態反應、化學性和創傷性等多種疾病所引起。結核性胸膜炎，屬于肺結核病5大類型的V型，其雖非肺部病變，但在臨床上與肺結核有密切關系。TNF-α是結核性胸膜炎局部免疫應答產物，從20世紀80年代開始受到國外學者的注意，結核性胸膜炎胸水中TNF-α等細胞因子濃度增高，提示結核性胸膜炎局部免疫功能增強，其診斷結核性胸膜炎的敏感性和特異性分別可達到100%和93%，因此有一定局限性。TNF-α［2］是由單核細胞和巨噬細胞產生的一種多肽類細胞因子，介導多向炎癥反應和免疫調節反應，具有抗感染和抗腫瘤等多種生物學活性，結核性胸水中巨噬細胞功能十分活躍，在結核桿菌細胞壁的蛋白-肽多糖復合物和阿拉伯聚糖酯刺激下激發胸液單核細胞引起依賴性腫瘤壞死因子釋放。本研究表明結核性胸膜炎組胸液中TNF-α水平均明顯高于惡性胸腔積液組（P＜0.01），且結核性胸液與血清中二者含量無相關性，進一步說明其局部細胞免疫功能增強。本研究結果顯示惡性胸腔積液組TNF-α含量顯著低于結核性胸膜炎組。結核性胸膜炎組TNF-α含量是惡性胸腔積液組的2～ 5倍，與文獻報道基本一致［3］。以胸液TNF-α＞75pg/ml作為臨界值，其診斷結核性胸膜炎的敏感性、特異性分別為85.3%、83.3%。通過對結核性胸腔積液和惡性胸腔積液TNF-α含量測定研究，我們認為：①TNF-α在結核性胸膜炎和惡性胸腔積液的發生、發展、病理生理改變起著重要作用；②結核性胸腔積液中TNF-α含量明顯高于惡性胸腔積液組，具有顯著差異，有助于結核性和惡性胸腔積液的鑒別。③胸液中TNF-α的檢測為結核性胸膜炎的診斷提供了一項輔助手段，具有一定的臨床意義。

參考文獻

1 Miyazaki Y，Koga H， Kohno S，et al.Nested，poly merasechain re-action for detection of mycobactenium.tuberculo-sisin chinica/sampiest clin microbio，1993，31:2228.

2 LshiiYuChiYama Y，Heasegwa S.Detection of tumornecro-sis factor/ca checitin pieura/eff usion of patients with lung cancer.Cancer Clin EXPImmunol，1990，80:350.

3 Luisvalase Estner san Joes De Via Aivar ez，et al.Diangnosis of Tuberculous pieurisy using the Biologie Parameters Aaeno-sine Deaninase Lysotyme and Inte feron Gamma.Chest，1993，103:458.