乙醇測定及臨床分析

摘 要 非飲酒者可以從食物中吸收少量乙醇，包括代謝轉化的醇類物質，但含量≤5mmol/L。乙醇的定量測定對診斷和鑒別診斷急癥、搶救乙醇中毒十分重要，為交通肇事處理提供科學依據，對當前社會人群飲酒影響健康的調研及食品乙醇含量測定均有重要意義。

關鍵詞 乙醇 乙醇脫氫酶 NAD

乙醇測定方法及原理

乙醇+NAD，乙醇脫氫酶乙醇+NADH，在340nm波長下測定，測定每分鐘NADH吸光度的增加值，其測定值(△A/分)大小與血乙醇含量成正比。方法為兩點法，溫度37℃，波長340nm，儀器為全自動或半自動生化分析儀，樣品量50μl，試劑量600μl，反應方向為正反應。檢查樣本要求新鮮血清或EDTA抗凝血漿，新鮮尿液或組織液。

△A樣本/分

計算公式：C樣本= ×C標準(標準值：10mmol/L)

△A標準/分

試劑：ADH凍干酶粉，緩沖液

正常參考值：<5mmol/L(23mg/dl)

乙醇在體內的代謝：攝入體內的乙醇除小部分在胃內代謝外，絕大部分在肝臟內代謝，僅有2%～10%的乙醇通過腎臟、肺和汗以原形排出體外。在體內，乙醇有三種主要的代謝途徑，分別在不同的肝細胞器中進行：①胞漿中的乙醇脫氫酶（ADH）途徑；②內質網的微粒體乙醇氧化系統（MEOS）途徑；③過氧化體的過氧化氫酶途徑。乙醇在體內代謝所具有的相對器官特異性、所產生的高熱量（產熱29.7kJ/g）以及機體缺乏有效的反饋機制對其在肝臟內代謝速率進行調控，可造成乙醇大量置換肝臟代謝的正常底物（最高可達90%），從而導致肝臟代謝嚴重紊亂。

在ADH介導的乙醇氧化為乙醛的過程中，氫離子從底物上轉移到NAD（氧化型輔酶Ｉ），使其轉變為NADH（還原型輔酶Ｉ），于是NAD減少，NADH增多，使胞漿中氧化還原狀態（redox）發生變化，表現為乳酸/丙酮酸比值的增高，從而導致一系列的代謝紊亂，如高乳酸血癥、酸中毒、高尿酸血癥及脂肪肝等。通常，乙醇在肝臟中的代謝大部分是通過細胞漿ADH途徑，但肝細胞的微粒體內還存在著一種微粒體乙醇氧化系統（MEOS），亦可使乙醇轉化為乙醛。長期飲酒，可誘導該系統P450ⅡE1的產生，使其活性增加4～10倍。它不僅增加乙醛的產生，也產生自由基，導致脂質過氧化作用；更重要的是，P450ⅡE1活化許多異源性物質，產生有毒代謝產物。這些異源性物質包括工業中常用的溶劑、麻醉劑、異煙肼、止痛藥、毒品（可卡因）、化學致癌劑、甚至維生素Ａ。在生理條件下，經過氧化體的過氧化氫途徑代謝的乙醇只占很小部分。

乙醇及代謝產物的毒性作用機制: 酒精在肝臟中的代謝需多種酶的參與，經若干反應而最后被氧化為二氧化碳及水。在此代謝過程中任一環節出現障礙（如酶的缺乏）均可導致代謝停滯，其中間代謝產物的蓄積可對肝臟造成毒性作用，乙醇本身也對肝細胞有明顯的毒性作用。酒精對肝臟的損害除與飲酒量和時間長短有關外，與飲酒的方式也有關，如一次大量飲酒比小量分次飲酒危害性更大。

乙醇對肝臟的損傷：乙醇在肝細胞內代謝產生的毒性代謝產物及其引起的代謝紊亂是導致乙醇性肝損傷的主要原因。乙醇代謝產物損傷作用，除乙醛的化學性損害外，還可引起氧化還原反應的改變、線粒體損害、鐵負荷所致肝損害等。乙醇在代謝過程產生大量自由基已明確有兩種危害，一是引發肝細胞脂質過氧化反應，造成肝細胞損傷；二是誘導肝臟竇周儲脂細胞產生轉化生長因子，進而使細胞外基質產生增加，形成肝臟纖維化。此外，乙醇通過細胞色素P450ⅡE1(CYP2E1)、鐵、腫瘤壞死因子(TNF)和TNF受體、氧應激、肌纖維母細胞和轉化生長因子β1(TGFβ1)的作用誘發肝細胞凋亡。

乙醛對肝臟的損傷：機體攝入的乙醇90%以上在肝臟代謝， 乙醇在體內的代謝過程主要為乙醇-乙醛-乙酸。乙醛已被證實有明顯的致癌作用。肝細胞中的乙醛脫氫酶2(ALDH2)的功能是將乙醛氧化成無致癌作用的乙酸，但當其突變后產生變異基因型，就會使該酶失去活性，導致飲酒后乙醛在血液中蓄積。國外研究表明，在東方人中ALDH2活性普遍缺失。吳氏等對 273例正常人進行流行病學調查研究也認為，中國人ALDH2酶的活性普遍缺乏。乙醛可損害各種細胞器和酶的結構功能；又能刺激免疫系統，誘發免疫反應性肝損害；損害線粒體脂肪酸的β氧化，引起脂質過氧化反應，抑制谷胱甘肽(GSH)的生物合成，減弱超過氧化物酶等抗氧化功能，還可延長細胞的增殖周期，并且誘發細胞的凋亡。

急性酒精中毒的臨床表現與飲酒量及個體敏感性有關，大致分為三期：①興奮期：出現頭昏，自控力喪失，言語增多，高度興奮，粗魯無禮，易感情用事沖動，顏面潮紅或蒼白。②共濟失調期：出現動作不協調，步態蹣跚，語無倫次，眼球震顫，情緒躁動，處于此期的司機易出現幻覺造成車禍。③昏睡期：患者沉睡，顏面蒼白，皮膚濕冷，口唇微紺，嚴重者出現陳氏呼吸，心跳加快，大小便失禁，嚴重者可以呼吸衰竭而死亡。

結果分析

樣本中乙醇含量在13.02～17.36mmol/L時身體有異常變化，樣本中乙醇含量<21.7mmol/L為亞臨床中毒水平，樣本中乙醇含量在26.04～32.55mmol/L時木僵，樣本中乙醇含量>35.56mmol/L時沉醉，樣本中乙醇含量在44.45～88.9mmol/L時嚴重中毒，樣本中乙醇含量>88.9mmol/L時死亡。

由此可見，乙醇測定對當前人群飲酒影響健康和對社會造成不良危害具有重要意義。

參考文獻

1 崔賢維，趙煒，主編.急診檢驗與臨床.北京：人民軍醫出版社，2001，10.

2 吳建中，丁建華，高長明，等.江蘇漢族人乙醛脫氫酶2基因型分布及其與飲酒習慣的關系.癌變畸變突變，2002，14(2):90.