宋 輝
摘要介紹了蔬菜上有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘毒的檢測原理,分析了在快速檢測過程中易出現的問題,并提出相應的對策,以加快蔬菜農藥殘留快速檢測方法的推廣應用。
關鍵詞蔬菜農藥殘毒;快速檢測;存在問題;對策
中圖分類號S481+.9文獻標識碼A文章編號 1007-5739(2009)03-0155-01
蔬菜農藥殘毒快速檢測技術是一種生化方法,以丁酰膽堿脂酶被抑制程度(抑制率)來檢測蔬菜上有機磷和氨基甲酸酯類的農藥殘毒。該方法可對含農藥殘留的蔬菜進行粗篩,將一部分含藥量較高的蔬菜控制在市場之外,避免農藥中毒事故發生,讓人們吃上相對放心的蔬菜。該方法適用于葉菜類、果菜類、豆菜類、瓜菜類、根菜類(除胡蘿卜、茭白等)中甲胺磷、氧化樂果、對硫磷、甲拌磷、久效磷、倍硫磷、殺撲磷、敵敵畏、克百威、涕滅威、滅多威、抗蚜威、丁硫克百威、甲萘威、丙硫克百威、速滅威、殘殺威、異丙威等的農藥殘毒快速檢測。
1農藥殘毒快速檢測原理
有機磷和氨基甲酸酯類農藥能抑制昆蟲中樞和周圍神經系統中乙酰膽堿酶的活性,造成神經傳導介質乙酰膽堿的積累,影響正常傳導,使昆蟲中毒致死,根據這一昆蟲毒理學原理,進行農藥殘留檢測。檢測過程為蔬菜樣本提取液加入反應試劑乙酰膽堿酯酶后,用分光光度計測定吸光值隨時間的變化,計算出抑制率,判斷蔬菜中有機磷或氨基甲酸酯類農藥的殘毒情況。操作流程見圖1。在分光光度計410nm處有最大吸收峰。根據3min前后吸光值之差可測得酶活性被抑制程度(用抑制率表示)。抑制率≥70%時,蔬菜中含有某種有機磷或氨基甲酸酯類農藥殘毒,抑制率<70%時,算合格。

2檢測過程中出現的問題與對策
2.1同批次蔬菜檢測結果重現性不同
因為此方法為快速檢測,所以每次檢測過程中使用的定量加液器的量及取樣量各有差異。另外,操作方法和儀器系統存在誤差等,致使同批次檢測結果重現性不同。
對策:①對同批次蔬菜抽樣要有公正性和代表性。要保證抽樣工具和容器潔凈、干燥、無異味,不會對樣品造成污染。并及時封存,保護樣品的待檢性狀。②取樣檢測時,樣品量要保證,葉菜類2g,非葉菜類4g;取樣部位均勻合理,多點混取,要有代表性,盡量取可食用部分。③定量加液器的量要均勻一致。④振蕩后要充分靜置,避免細小菜未被管嘴吸到比色皿中,影響吸光值。⑤定期對儀器進行自檢,嚴格按照操作規程操作,可減少誤差,有效避免結果重現性不同。
2.2抑制率偏小
試驗通過酶被抑制的程度(即抑制率)來反應農殘是否超標。抑制率的正常范圍是-10%~110%,對照組/樣本的吸光值在3min后與3min前的差值(ΔAc/ΔAs)范圍是0.3~0.8,當抑制率值偏小,即小于-10%時,原因:一是酶在參加反應之前就已部分失活,導致ΔAc<0.3。二是底物與酶未反應完全。
對策:①酶是生物催化劑,較其他催化劑更加脆弱,易失去活性,因此酶作用一般要求比較溫和的條件,如常溫、常壓、接近中性的酸堿度。在培養箱中酶的最適溫度是37.5~38.5℃,提取液的pH值控制在8.0。在試驗過程中,酶液可暫時置于室內的冰盒上,做完試驗后,酶液應儲存在0~5℃的冷藏室內。②取底物時,用移液槍直接加到比色杯內,盡量不要濺到壁上,加完底物后快速搖晃比色皿,再將比色皿放入儀器內立即進行比色。
2.3抑制率偏大
當抑制率出現不正常偏大時,主要原因是在上機比色前酶就已與底物發生反應或底物已經分解失活,致使ΔAs<0.4。
對策:從樣本培養結束到上機比色速度要快,盡量在1min內完成,而且培養時間要準確把握,不能超過15min,或換底物重新做空白。
3其他注意事項
①儀器應置于干燥、通風的環境中,儀器工作以前,應預熱5~10min,使儀器狀態穩定。在測量的過程中不要打開儀器樣品室蓋,以免影響測量結果。②在制備待測液過程中,加入提取液后需震蕩1~2min,并保證上清液靜置3~5min,使殘留物浸提完全。且酶液、顯色劑不能漏加或多加。③注意手不要摸比色皿的光面,要拿毛面,光面對準光路,里面的液體要超過2/3,且不得溢出,以保持光面外側的潔凈。④對蔥、大蒜等辛辣味較濃的蔬菜,采用酶抑制法速測,出現假陽性的可能性極大,如果要驗證結果是否正確,必須重新取樣重新做試驗。⑤生菜、小白菜、豆角、芹菜等為必檢項目,因為這幾類蔬菜或容易殘留農藥,或使用農藥次數多、密度大。⑥檢測結果僅起監督作用,且僅是對含有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留的粗篩,對其他農藥的檢測無作用。
4參考文獻
[1] 杜宗緒,孫竹生,楊連學.農產品農藥殘留分析技術進展[J].濰坊高等職業教育,2006(1):43-45.
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