人參果肉的氨基酸成分分析

，

(長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，吉林 長(zhǎng)春 130117)

人參果為五加科植物人參(PanaxgisengC.A.Meyer)的成熟果實(shí)。近年來(lái)，隨著人們對(duì)人參地上部分利用的研究進(jìn)展，人參果具有高含量的人參皂苷和顯著的生理活性，已引起國(guó)內(nèi)外學(xué)者的重視和研究。目前對(duì)人參果的化學(xué)成分研究報(bào)道較少[1-2]，吉林省為人參主產(chǎn)地，每年產(chǎn)參果幾百?lài)崳捎诖昶迫∽眩N子用于繁殖，大部分果肉都作為廢物被扔掉。而按干品計(jì)算其中所含人參皂苷含量是人參根的3～4倍，極有開(kāi)發(fā)利用價(jià)值。因此，為了給系統(tǒng)研究人參增添新的內(nèi)容，擴(kuò)大人參的藥用范圍，給正確評(píng)價(jià)人參果的質(zhì)量提供理論依據(jù)，我們對(duì)人參果的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究[3-6]，本文應(yīng)用日立-835-50型氨基酸自動(dòng)分析儀對(duì)人參果肉中氨基酸種類(lèi)及其含量進(jìn)行了測(cè)定分析研究。為人參果的研究及綜合利用提供了初步的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器 日本日立公司835-50型氨基酸自動(dòng)分析儀。離子交換樹(shù)脂層析柱(2.6 mm×150 mm)填料為2619型磺酸型強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂(日立株式會(huì)社)。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料 人參果肉多采于長(zhǎng)白縣人參(PanaxginsengC.A.Meyer)新鮮成熟果實(shí),去籽得果肉，經(jīng)凍干，粉碎(60目)所得。

1.3 試劑 標(biāo)準(zhǔn)品溶液：17種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品混合溶液；6 mol/L鹽酸:取優(yōu)級(jí)純鹽酸用去離子水稀釋定容制成。1%巰基乙醇：取巰基乙醇用去離子水稀釋定容制成。高純氮?dú)猓汉?9.99%。其它試劑均為分析純。

2 方法

2.1 樣品液的制備 精密稱(chēng)取人參果肉干燥粉末15.0 mg，置于水解管底部，用注射器注入6 mol/L鹽酸15 mL和1%的巰基乙醇1 mL，然后將水解管接通真空泵，抽至真空，迅速在噴燈上封口，置干燥箱內(nèi)于110℃±1℃水解24 h，取出放冷至室溫，打開(kāi)瓶口，將水解液過(guò)濾至50 mL容量瓶中，用去離子水沖洗水解安瓶及濾紙，繼而用去離子水定容至刻度，取此稀釋的水解液1 mL置小燒杯中，在水浴上蒸干，殘?jiān)萌ルx子水約1 mL溶解并蒸干，如此反復(fù)操作2～3次，揮盡氯化氫氣體，然后準(zhǔn)確加入0.02 mol/L鹽酸1 mL溶解殘?jiān)瑐溆谩?/p>

2.2 氨基酸自動(dòng)分析儀測(cè)試條件 層析柱：2.6mm×150 mm (內(nèi)徑×柱高)；柱填料：2619型磺酸型的強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂(日立株式會(huì)社)；緩沖液流速：0.225 mL/min；茚三酮流速:0.30 mL/min；柱壓：80～130 kg/cm2；茚三酮泵壓：15～35 kg/cm2；緩沖液改變次數(shù)：5；柱溫：53℃；氮?dú)鈮毫Γ?.28 kg/cm2；分析時(shí)間：50 min。

2.3 測(cè)定分析 取樣品液50 μL，按上述測(cè)試條件上機(jī)測(cè)定。人參果肉中的總氨基酸的分離是采用上述測(cè)試條件進(jìn)行，用樣品色譜圖與已知的混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)色譜圖核對(duì)進(jìn)行定性；根據(jù)已知濃度的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)樣的色譜圖峰面積與樣品色譜圖峰面積的比，計(jì)算出樣品中各氨基酸的量，再根據(jù)樣品的重量和水分，求出樣品中所含氨基酸的百分含量。

3 結(jié)果與討論

人參果肉中的氨基酸測(cè)定結(jié)果：見(jiàn)表1。

表1 人參果肉中總氨基的測(cè)定結(jié)果

表1結(jié)果表明,人參果肉含有16種以上氨基酸。人參果肉中的總氨基酸含量為10.423%。人參果肉中精氨酸含量最高(1.815%)，天門(mén)冬氨酸次之(1.748%)，谷氨酸居第三位(1.329%)；其中酸性氨基酸、堿性氨基酸、中性氨基酸和必需氨基酸占總氨基酸的比例為中性氨基酸>必需氨基酸>酸性氨基酸>堿性氨基酸。

同植物體內(nèi)其它的化學(xué)成分一樣，由于植物的生長(zhǎng)周期不同，其各生長(zhǎng)部位的體內(nèi)生理代謝也有所不同，因而體內(nèi)的化學(xué)成分積累也有所差別，在不同的生態(tài)環(huán)境條件下，因植物的生長(zhǎng)不同，形成了體內(nèi)化學(xué)成分積累的差別，植物體內(nèi)化學(xué)成分的積累是一個(gè)隨時(shí)間和空間的變動(dòng)，而呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)變化的過(guò)程。由于時(shí)間和條件的限制，本實(shí)驗(yàn)對(duì)人參果氨基酸的種類(lèi)及含量只初步進(jìn)行了分析，為人參果的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供初步的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。結(jié)果不夠全面和充分。因此，要全面了解和掌握人參果化學(xué)成分的積累變化規(guī)律，科學(xué)準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)其質(zhì)量，需有待今后進(jìn)一步深入研究。

[1]王鐵生.中國(guó)人參[M].沈陽(yáng):遼寧科學(xué)技術(shù)出版社,2001:12.

[2]于 明,趙余慶.人參果中三萜類(lèi)成分的化學(xué)研究[J].中草藥,2004,35(11):25-27.

[3]Ji-Yan Wang,Xiang-Gao Li,Yi-Nan Zheng,et al.Isoginsenoside-Rh3,a NEW Triterpenoid Saponin from the FruIts of Panax ginseng C.A.Mey[J].Journal of Asian Natural products Research,2004,6(4):289-293.

[4]王繼彥,孫光芝,李向高.人參果的化學(xué)、藥理研究進(jìn)展[J].吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2005,27(1):71-75.

[5]J.-Y.WANG,X.-G.Li,X.-W.Yang.Ginsenine,a new alkaloid from the berry of Panax ginseng C.A.Meyer.[J].Journal of Asian Natural Products Research,2006,8(7):605-608.

[6]王繼彥,李向高,楊秀偉.人參果中化合物K的HPLC法測(cè)定[J].中草藥,2008,39(2):225-226.