石蠟切片脫蠟方式的比較

鄭燕璇 王曉鴻 茍新敏

【摘要】 石蠟切片進行染色時脫蠟是影響染色效果的重要原因,其中脫蠟的溫度及時間決定了脫蠟的效果,在實際工作中我們就這兩項進行了摸索,本研究就筆者的體會作個總結。

【關鍵詞】 病理學技術;石蠟切片;脫蠟

在病理技術工作中,石蠟切片無論是在進行常規HE染色或是其他特殊染色,首先都要進行脫蠟,脫蠟不凈是影響染色效果的重要原因之一。而切片脫蠟的好壞主要取決于二甲苯的新舊、溫度及時間,本科經多年實際操作,對后兩個條件進行了多次摸索比較,得出一個滿意的方法,現介紹如下。

1 資料與方法

1.1 材料 二甲苯,乙醇。

1.2 方法 石蠟切片入60℃烤箱烘烤,在烘烤切片的同時將無水酒精及少量二甲苯混合溶液放入烤箱中加熱,30 min后將烤熱的切片快速浸入二甲苯I中脫蠟1 min→二甲苯II脫蠟1 min→已加熱的無水酒精及少量二甲苯混合溶液1 min→無水酒精1 min→95%乙醇I 1 min→95%乙醇II 1 min→90%乙醇1min→85%乙醇1 min→自來水水洗。

2 結果

通過對二甲苯溫度及時間的改變,切片脫蠟更為徹底,(切片上除組織外原粘有蠟膜的位置已同玻片其他部位一樣透明,組織形狀清晰可見,將切片從水中提出時,水滴可以順暢的流下)。脫蠟后無論是進行HE染色、免疫組化染色或是其他特殊染色,染色效果均比傳統脫蠟方式達到的效果理想。

3 討論

二甲苯及酒精作為常用試劑大量應用于病理工作中,尤其是脫蠟方面。在以往臨床工作上,筆者普遍采取傳統的脫蠟方式,既將石蠟切片入60℃烤箱烘烤30 min后浸入二甲苯I中脫蠟10 min →二甲苯II脫蠟5 min→無水酒精洗去二甲苯5 min×2次→95%乙醇3 min→90%乙醇3 min→85%乙醇3 min→自來水水洗[1]。此方法不僅要求脫蠟時間長,導致組織易脫片,而且經常受外界溫度影響造成脫蠟不凈。本科在2003年通過對二甲苯溫度的改變,既在烘烤切片的同時將二甲苯I放入60℃烤箱加溫,30 min后將烤熱的切片浸入已加熱的二甲苯I中脫蠟1 min→二甲苯II脫蠟1 min→無水酒精I 1 min→無水酒精II 1 min→95%乙醇I 1 min→95%乙醇II 1 min→90%乙醇1 min→85%乙醇1 min→自來水水洗,使脫蠟時間大大縮短,但因該方法在操作過程中需要加熱二甲苯,而二甲苯受熱后極易揮發,對眼及上呼吸道有強烈的刺激作用,導致操作人員出現頭暈、頭痛等不適癥狀。為減少二甲苯對操作人員的傷害,本科從2003年年尾改用了現行脫蠟方式,通過對二甲苯溫度、濃度及時間的改變,不僅縮短了脫蠟時間,降低了切片因脫蠟時間過長導致掉片,而且還大大減少了二甲苯受熱揮發對操作人員的傷害。切片脫蠟后進行HE染色,核漿分明,染色清晰;進行特殊染色如肝穿標本做Masson染色,肝細胞呈玫瑰紅色,而膠原纖維等呈鮮藍色;而此類切片進行免疫組織化學染色時也可因脫蠟干凈而減少組織的非特異性染色。需要注意的是,在使用該方法進行脫蠟時,尤其是對已進行過防脫處理的切片進行脫蠟時,最好讓切片在各道試劑中進行多次涮洗,這樣出來的脫蠟效果會更理想。

參 考 文 獻

[1] 王伯沄,李玉松,黃高升.病理學技術.人民衛生出版社,2000,130,132.