未刺激的未成熟卵體外培養在多囊卵巢綜合征患者中的應用

趙彩巖　梅　麗　劉　麗

【摘要】 目的 探討未刺激的未成熟卵體外培養成熟(IVM)治療難治性多囊卵巢綜合征(PCOS)患者的療效。方法 2005年10月至2006年10月本中心對50例難治性PCOS患者65個周期的IVM治療。結果 9個周期取消，取消率為13.85%；65個周期共獲卵1 338枚，平均每周期20.6枚，培養48 h后總成熟率為68.5%。正常受精率為70.2%，卵裂率為91.1%，每穿刺周期和移植周期的臨床妊娠率分別為37.5%和40.6%，28例臨床妊娠中，6例多胎，多胎妊娠率為21.4%。結論 未經刺激的IVM技術用于難治性PCOS是一種有效的方法，可獲得與常規體外受精-胚胎移植(IVF-ET)相似的臨床妊娠率。

【關鍵詞】多囊卵巢綜合征；未成熟卵體外培養成熟；體外受精-胚胎移植

In vitro maturation and fertilization of unstimulated inmature oocyte for treatment of infertility women withpoly cystic ovary syndrome

ZHAO Cai-yan,MEI Li，LIU Li.

Shenyang No.204 Hospital,Liaoning 110043,China

【Abstract】 Objective To evaluate the clinical application of in vitro maturation(IVM)of unstimulated inmature oocytein the treatment of infertility women with polycystic ovary syndrome.Methods Between Oct.2005 and Oct.2006,65 cycles of IVM in 50 infertility women with obstinate polycystic otaty syndrome(PCOS)were carried out.Results 9 cycles were cancelled and cancellation rate was 13.85%；a total of 1338 inmature oocytes were obtained in 65 cycles with the average number of 20.6 per cycle.A total of 643 oocytes were normally fertilized by ICSI 70.2%，with a cleavage rate of 91.1%.28 clinicat pregnancies were obtaind.Pregnancy rate was 37.3%per puncture and 40.6%per transfer.Among the 28 cases 6 cases were multipregnancy.The multipregnancy rate were 21.4%.Conclusion Our results shows that IVM of unstimulated in mature oocytes is an effective method for the treatment of infertility women with obstinate PCOS which maybe offered as an altimative to conventiona lVF.

【Key words】Polycystic ovary syndrome;In vitro maturation;In vitro fertilization

1 資料與方法

1.1 一般資料 從2005年10月至2006年10月本中心對50例難治性PCOS患者65個周期的IVM治療。PCOS診斷標準為：①長期無排卵;②臨床和生化指標提示有高雄激素血癥存在，并排除其他可致高雄激素血癥的疾病。

1.2 方法

1.2.1 未成熟卵的采集 自然月經周期或撤退性出血的第3~5天行陰道超聲檢查，由專人測量子宮內膜厚度及記錄兩側卵巢的竇卵泡數。未經刺激，于周期的第10~12天，行陰道B超監測，如雙側卵巢中無直徑大于8 mm的卵泡，即肌內注射人絨毛膜促性腺激素(HCG)10 000 U，并于36 h后在丙泊酚靜脈注射下經陰道超聲引導行卵泡穿刺獲卵。

1.2.2 IVM和胚胎培養 把抽到的血性卵泡液的1 ml平鋪放在拾卵皿(FocoB003)，顯微鏡下觀察拾卵，將卵子放入體外成熟培養體系，即為TCM-199培養液(美國Sigma公司產品)+20%胎中血清(杭州四季青公司產品)+0.075 n/ml FSH+0.1 U/ml 人絨毛膜促性腺激素(HCG，瑞士Serono公司產品)中，于體外培養24~48 h，待極體沾液后，行ICSI，之后將部分卵母細胞移入CM(Ceunin公司產品)中培養液，18 h后觀察受精情況，繼續培養24~48 h，直至胚胎移植，移植前常規行激光輔助孵化。

1.2.3 子宮內膜的準備 于IVM周期第3~5天戊酸雌二醇(補佳樂、德國先靈公司)2 mg/d,如取卵第8天內膜厚度小于7 mm，則增至6~10 mg/d,于移植日減為4 mg/d;如取卵日內膜厚度大于7 mm,增至4 mg/d; ICSI當天開始肌內注射黃體酮80 mg/d,連續兩周。

1.2.4 胚胎移植及黃體支持 于ICSI受精后的第2~3天實行宮腔內胚胎移植(ET)，ET后2周行尿妊娠試驗，若陽性繼續服用戊酸雌二醇4 mg/d 和肌注黃體酮80 mg連續2周，ET后4周行超聲檢查確定胎囊及胚胎發育情況，若情況良好，黃體酮減為60 mg，否則維持原劑量直至90 d停藥。

2 結果

2.1 IVM的實驗室結果 50例患者共進行65個周期，其中4例患者因獲卵母細胞少而放棄，4例患者獲得的未成熟卵母細胞培養48 h后不成熟，一例患者獲卵母細胞30個，有受精但無裂卵。因此9例取消，取消率為13.85%(9/65)，其余41例患者共移植56個周期，獲得未成熟卵母細胞851個，平均每周期15.2個，體外培養48 h后，卵母細胞成熟620個，成熟率為72.9%，行ICSI后卵母細胞正常受精640個，受精率為75.2%，卵裂582個，卵裂率為90.9%。 2.2 IVM的臨床結果 移植56年IVM周期中，共移植202個胚胎，平均3.78個(2~6個)，50例患者中，1例生化妊娠，22例獲得臨床妊娠,每取卵周期的臨床妊娠率為40%(22/56)，2例3胎妊娠，于妊娠8周成功減為雙胎，6例雙胎妊娠，多胎妊娠率為36.4%。

3 討論

目前對難治性PCOS不孕患者尚無有效的治療方法，而IVM技術主要針對一些卵子成熟障礙的不孕患者，尤其對于PCOS無排卵者已有較多研究且獲得了較高的臨床妊娠率^[2]對于應用促性腺日后是否真正有益于IVM結構，存有爭議^[3-5]。本生殖中心采用未經刺激的IVM技術可獲得與常規IVF或ICSI相媲美的臨床妊娠率，其優勢在于：①未用任何促排卵藥，節約近一半的費用；②監測過程簡單，減輕患者的日程負擔；③由于未用藥物刺激，治療周期縮短，且可繼續進行；④避免其他輔助生殖技術中使用促性腺激素超促排卵的近期并發癥及遠期并發癥；⑤即使本周期未成功，但穿刺本身可改善PC0S患者體內的不良的分泌環境，對于不伴其他因素的PCOS患者，IVM后可自然恢復排卵并妊娠；⑥穿刺簡便安全。由于IVM在PCOS的應用中，具有很大的優勢，關于PCOS患者采取前是否需要用少量的促性腺激素，爭取獲得最好質量和最多數目的不成熟卵母細胞，提高IVM成熟的卵母細胞質量，進而提高臨床的妊娠率，將是IVM在PCOS中應用研究的熱點。

參 考 文 獻

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