通陽活血顆粒的薄層色譜鑒別

霍鉆云　陳淑映

【摘要】 目的 建立通陽活血顆粒中主要成分的定性鑒別方法，為制定其質量標準提供依據。方法 采用薄層色譜法(TLC法)對顆粒中的黃芪、紅花兩種有效成分進行定性分析。結果 供試品與對照品，對照藥材薄層圖譜斑點相同并清晰，均能鑒別出黃芪、紅花。結論 薄層色譜專屬性強，操作簡便，重現性好，可用于通陽活血顆粒的質量控制。

【關鍵詞】顆粒；薄層色譜；鑒別；黃芪；紅花

TLC identification of granular preparation of tongyanghuoxue

HUO Zuan-yun，CHEN Shu-ying.ChineseTraditionalMedicalHospitalofFoshan，Guangdong 528000,China

【Abstract】 Objective Providing scientific basis for quality standards established by establishing the qualitative analysis of the most effective composition in the granular preparation of Tongyanghuoxue.Methods Effective compositions of Flos Carthami and Radix Astragali were identified by TLC.Results In the TLC of the testing samples，same color spots were noted at the corresponding sites of the reference substances and effective compositions of Flos Carthami and Radix Astragali can be identified by TLC.Conclusion The reproducibility and the specialization of the TLC were good.The method was simple and convenient，which can be used for quality control of the granular preparation of Tongyanghuoxue.

【Key words】Granular preparation; TLC; Identification；Radix astragali；Flos carthami

通陽活血顆粒是本院的一種中藥制劑，由黃芪、紅花、地龍等中藥材制成，具有益氣活血，除痰通絡的功效。主要用于氣虛痰瘀證，如強直脊椎炎，風濕性關節(jié)炎，類風濕關節(jié)炎，增生性骨關節(jié)炎及坐骨神經痛。癥見疼痛日久，肢體麻木，骨節(jié)僵硬等，亦用于中風之半身不遂，口眼歪斜等。經過長時間的臨床應用，通陽活血顆粒對上述癥狀有明顯的療效，為了更好地保證該制劑的質量，對顆粒中的君藥黃芪、紅花進行薄層色譜鑒別，為制定其質量標準提供理論依據。

1 實驗儀器、原料與試劑

ZF-90型電暗箱式紫外線燈投射儀(上海顧村電光儀器廠)；超聲波清洗器；萃取裝置；回流提取裝置；硅膠G(青島海洋化工有限公司)；玻璃點樣毛細管(華西醫(yī)科大學儀器廠)；黃芪對照藥材(批號：20080110)；紅花對照藥材(批號： 20080221)；黃芪甲苷標準品、對照品均

購自中國藥品生物制品檢定所；所用中藥材由廣州致信藥業(yè)有限公司提供；試劑均為分析純。

2 實驗方法與實驗結果

2.1 黃芪薄層色譜鑒別［1-2］

2.1.1 供試品制備 取本品3 g，研細，加甲醇40 ml，超聲處理20 min，放冷,濾過,濾液蒸干,殘渣加水15 ml,分次溶解,加乙醚提取2次,每次15 ml,棄去乙醚液,水液用水飽和的正丁醇振搖提取2次,每次15 ml,合并正丁醇提取液,加氨試液提取2次,每次20 ml,棄去氨液,將正丁醇水浴蒸干,殘渣加甲醇1 ml溶解,作為供試品溶液。

2.1.2 標準品制備方法 取黃芪甲苷對照品,加甲醇制成每1 ml含0.5 mg的溶液,作為對照品溶液。

2.1.3 對照藥材溶液制備 取黃芪對照藥材適量，加甲醇20 ml,加熱回流1 h，濾過，濾液加于中性氧化鋁柱(100~120目，5 g，內徑10~15 mm)上，用40%甲醇100 ml洗脫，收集洗脫夜，蒸干，殘渣加水30 ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20 ml，合并正丁醇液，用水洗滌2次，每次20 ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇0.5 ml使溶解，作為對照藥材溶液用。

2.1.4 陰性液制備 按通陽活血顆粒處方去除黃芪,其他按供試品制備方法制成陰性液。

2.1.5 薄層層析 照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄V IB)試驗,吸取上述四種溶液各10、 20 μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以正丁醇-醋酸乙酯-甲醇-水(4∶1∶1∶1)為展開劑,展開,取出,晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘約5 min,至斑點顯色清晰,取出。

2.1.6 測定結果 供試品色譜中,在與標準品、對照藥材色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點，陰性液無干擾(見圖1)。

2.2 紅花薄層色譜鑒別［3-4］

2.2.1 供試品制備 取本品適量，加80%丙酮溶液20 ml，密塞，超聲處理10 min，過濾，濾液作為供試品溶液。

2.2.2 對照藥材溶液的制備 取紅花適量，加水煎煮2次(1 h，0.5 h)，每次20 ml,過濾，合并濾液，加乙醇使之含醇70%，放置6 h，過濾，濾液回收乙醇至干，殘留物加20 ml水溶解后按供試品溶液制備項下方法制成紅花對照藥材溶液1 ml。

2.2.3 陰性對照品的制備 取不含紅花的通陽活血顆粒適量，溶解，再按供試品溶液制備項下方法制成空白對照液1 ml。

2.2.4 薄層層析 照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄V IB)實驗，吸取上述三種溶液各5 μl，分別點于同一以羧甲基纖維素為粘合劑的硅膠H薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇(7∶2∶3∶0.4)為展開劑，展開，取出，晾干。

2.2.5 測定結果 供試品色譜中與對照藥材色譜相應位置上，日光下顯相同紅褐色的斑點，陰性液無干擾 (見圖2)。

3 討論

3.1 用TLC法鑒別通陽活血顆粒，均能檢測到主藥黃芪和紅花的成分，色譜斑點清晰，附近無雜質斑點干擾，方法簡便、快速、可行性及重現性好，結果準確、可靠，可用于該制劑質量控制中的定性分析。

3.2 本實驗的關鍵是選擇適宜的試驗條件、合適的分離提純方法及展開條件。在對黃芪中有效成份黃芪甲苷的提取中選取合適的提取溶劑，以獲得純的黃芪甲苷成份。在測定黃芪甲苷含量過程中發(fā)現展開劑的選擇及配比對測定結果影響較大,傳統(tǒng)的氯仿∶甲醇∶水(13∶7∶2)和正丁醇∶冰醋酸∶水(4∶1∶1)對于本制劑的分離效果都不理想,在多次比較篩選后本實驗確定選用正丁醇∶醋酸乙酯∶甲醇∶水(4∶1∶1∶1)為展開劑。

3.3 通陽活血顆粒作為復方中藥制劑，原質量標準只是對某一類物質進行理化鑒別，專屬性不強，為了更準確地控制其質量標準，故在原質量標準基礎上增加了對制劑中黃芪、紅花的薄層色譜鑒別，為制定其質量標準提供理論依據，確保臨床用藥的安全和有效。

參考文獻

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［4］ 崔東煥，崔龍哲.康骨膠囊中紅花、三七的薄層色譜鑒別.中國醫(yī)藥出版社，2008,17(10):39.