ＭＤＭ－２和ｂｃｌ－２在子宮頸癌中的表達及其意義

張　巍

宮頸癌是全球婦女惡性腫瘤中僅次于乳腺癌的第2個最常見惡性腫瘤。每年全世界新增病例大約500000例。在發(fā)展中國家婦女中發(fā)病率居第1位［1］。子宮頸癌的早期診斷是子宮頸癌防治的重要策略之一。子宮頸癌的發(fā)生涉及多因素、多基因、多環(huán)節(jié)。本研究采用免疫組化法，檢測了MDM-2和bcl-2在宮頸癌中的表達，旨在探討MDM-2和bcl-2在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展過程中的相互關系。

1 資料與方法

1.1 材料 選取子宮頸標本59例，其中子宮頸癌標本31例，自貢經(jīng)非典型性增生標本13例，正常子宮頸標本15例，標本取自河南省焦作市第二人民醫(yī)院病理科2002-2005年存檔蠟塊，所有病例術前均未行放化療和免疫治療。

1.2 方法 標本經(jīng)10%甲醛溶液固定，常規(guī)石蠟包埋，4 μm后連續(xù)切片，進行HE染色和免疫組化染色(SP法)，以PBS代替第一抗體作為陽性對照。根據(jù)FIGO1995進行子宮頸癌分性，根據(jù)方案進行臨床分期。

1.3 結果判定 MDM-2定位于細胞核，bcl-2定位于細胞漿。在切片中顯示細胞和或細胞漿為黃色或黃棕色者為陽性細胞標志。根據(jù)細胞中著色癌細胞占同類病變細胞數(shù)的10%以上為陽性表達，小于10%為陰性表達。陽性細胞必須具備：①細胞結構清晰；②陽性顆粒定位準確，必須定位于細胞膜/漿或細胞核；③細胞膜/漿或細胞核的著色明顯高于背景。

1.4 統(tǒng)計學方法 計數(shù)資料采用χ²檢驗和確切概率方法。

2 結果

2.1 一般資料 子宮頸癌標本31例，患者最大年齡69歲，最小27歲，平均48歲；子宮頸癌組織類型中鱗癌29例，腺癌2例。分化程度分為高分華(G1)3例，中分化(G2)16例，低分化(G3)12例，原位癌3例，其余全部為浸潤性癌。臨床分期為0期3例，Ⅰ期5例，Ⅱ期14例，Ⅲ期9例，Ⅳ期0例。對照組為因子宮頸非典型性增生性子宮頸切除術的宮頸非典型性增生組織13例，患者平均年齡45.60歲;因子宮體良性病變而宮頸無明顯增生病變行子宮切除的正常宮頸組織15例，患者平均年齡46.92歲。

2.2 MDM-2和bcl-2在宮頸癌中陽性表達與臨床病理特征的關系 子宮頸癌種MDM-2陽性11例,bcl-2陽性13例，陽性表達率分別為35.49%、41.93%，子宮頸非典型性增生陽性表達MDM-2 1例,bcl-2 1例，正常子宮頸陽性表達MDM-2 1例，bcl-2 1例，所以子宮頸癌組織與子宮頸非典型性增生和正常子宮頸組織相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。子宮頸非典型性增生和正常子宮頸相比差異無統(tǒng)計學意義 (P>0.05)。見表1。

經(jīng)確切概率法統(tǒng)計，31例子宮頸癌中，不同大體類型中具有不同的表達程度，MDM-2陽性率在子宮頸肥大組最高(χ²=3.91，P<0.05),bcl-2陽性率在子宮頸腫塊組最高(χ²=3.99，P<0.05),見表2。

從癌組織分化程度來看，低分化癌MDM-2、bcl-2染色陽性率高于中-高分化癌，經(jīng)統(tǒng)計學檢驗，均有統(tǒng)計學意義，見表3。

2.3 MDM-2和bcl-2染色的關系 在31例子宮頸癌組織中MDM-2和bcl-2共同陽性9例(29.03%)經(jīng)配對資料χ²檢驗，P<0.01，子宮頸癌中MDM-2與bcl-2陽性表達率存在正相關關系。

3 討論

子宮頸癌的發(fā)生是一個非常復雜的問題，從已有的研究來看涉及面很廣，以證明癌基因、抑癌基因及凋亡相關基因均與子宮頸癌的發(fā)生有關［2］。

MDM-2基因作為癌基因，涉及細胞分裂和凋亡的調(diào)解，其過度表達可知細胞生長轉化［3］。筆者研究比較MDM-2的陽性表達與子宮頸癌臨床特征、病理類型的關系發(fā)現(xiàn)：子宮頸癌患者MDM-2的表達與腫瘤的病理分級呈正相關，腫瘤的分化程度越低，MDM-2的表達越強，其他類型的腫瘤也有類似報道［4］，MDM-2陽性的腫瘤具有更強的分裂增殖活性，測定腫瘤細胞中MDM-2的表達可作為預測患者預后的一個指標。

bcl-2對程序性細胞死亡或凋亡的調(diào)控起重要作用［5-7］，研究結果顯示：bcl-2蛋白在子宮頸癌的表達率明顯高于正常對照組、子宮頸非典型增生組(P<0.05)，而bcl-2蛋白在子宮頸非典型性增生中的表達與在子宮頸癌間無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，檢測子宮頸癌細胞中bcl-2蛋白可作為早期診斷子宮頸癌變的重要參考指標之一。

MDM-2和bcl-2免疫組化染色陽性程度可反映子宮頸癌的臨床進程，陽性較高者分化程度低，細胞增殖快，更容易擴散進展。聯(lián)合檢測MDM-2和bcl-2在子宮頸癌中的表達，顯示二者具有明顯相關性，提示子宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展與多種基因改變相關，MDM-2和bcl-2共同陽性表達率隨著病變程度加重而增高，對預測子宮頸癌的治療效果和預后具有重要的參考價值。

參考文獻

［1］ Schoell WM,Janicek M,Mirhashemi R,et al.Epidemiolog and biology of cervical Cancer.Sem in Surg Oncol，1999,16(3):203-211.

［2］ 王曉麗，李明眾，尚菊戰(zhàn)，等.P53和bcl-2在子宮頸上皮內(nèi)瘤樣變及子宮頸癌中的表達.中國腫瘤臨床與康復，2002，9(2)：38-40.

［3］ Momand J,Zambetti GP.MDM-2:“Big brother”ofP53.J Cell Biochem,1997,64:343-352.

［4］ Bulz K,Shababeddin L,Geisen C,et al.Functional P53 protein in human papillomavirus-positove cancer cells.Oncogene,1995,10:927-936.

［5］ Liang XH,Mungal S,Ayscue A,et al.bcl-2 protooncogene expression in cervical carcinoma cell lines containing inactive P53.J Cell Biochem,1995,57(3):509-521.

［6］ Hockenberg D，Nunez G,Milliman C,et al.Bcl-2 is an inner mitochondrialmembrane protein that blocks programmed cell death.Nature,1990：348-334.

［7］ Graninger WB,SetoM,Boutain B,et al.Expression of Bcl-2 Ig fusion transxriptscripts in nomal and neoplastic cell.Clinic Inwers,1987,80:1512.