通心絡膠囊對糖尿病合并動脈粥樣硬化大鼠內皮素、血管緊張素Ⅱ的影響

韓景輝 李 真△ 楊海燕 符 宇

通心絡膠囊對糖尿病合并動脈粥樣硬化大鼠內皮素、血管緊張素Ⅱ的影響

韓景輝1李 真1△楊海燕1符 宇2

目的探尋通心絡膠囊對2型糖尿病合并動脈粥樣硬化病變的作用機理。方法將SD大鼠制備糖尿病合并動脈粥樣硬化模型，隨機分為空白組、模型組、對照組(貝那普利)和治療組(通心絡膠囊)。分別予相應藥物灌胃8周后取材，放免法檢測血清內皮素(ET)和血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)含量。結果治療組大鼠的血清ET、AngⅡ水平較模型組降低，差異有統計學意義;同對照組相近。結論通心絡膠囊具有改善糖尿病合并動脈粥樣硬化病變內皮功能的作用，其機制可能與降低ET、AngⅡ水平有關。

通心絡膠囊 糖尿病合并動脈粥樣硬化 內皮素 血管緊張素Ⅱ

1河南中醫學院第一附屬醫院(鄭州450000)

2河南中醫學院(鄭州450000)

△通信作者

血管內皮功能受損是糖尿病血管并發癥發生的基礎之一，亦是動脈粥樣硬化(AS)重要的始動因素，貫穿于糖尿病發展的始終。因而保護內皮功能己成為糖尿病合并動脈粥樣硬化疾病預防及治療的重要目標之一。不少實驗和臨床研究證實，內皮功能障礙可以通過藥物和非藥物性的干預被逆轉或者較大程度上得以糾正。本研究旨在觀察通心絡膠囊對糖尿病合并動脈粥樣硬化大鼠血清內皮素(ET)、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)的影響。現報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 (1)實驗動物:SD大鼠90只，均為清潔級，雄性、1月齡，體質量90～120g，由河南省實驗動物中心提供。(2)主要儀器:γ－放射免疫計數器(GC－911型，中國科學技術大學科技實業總公司生產)。(2)藥物與試劑:鏈脲佐菌素(STZ，美國Sigma公司產)，ET試劑盒 (北京普爾偉業生物科技有限公司產)，AngⅡ試劑盒(北京北方生物技術研究所提供)，鹽酸貝那普利片(北京諾華制藥有限公司生產)，通心絡膠囊(河北以嶺制藥有限公司生產)。

1.2 方法 (1)造模:實驗大鼠每籠4只，飼養于河南中醫學院第一附屬醫院動物實驗室，飼養溫度(22±1)℃，濕度:59% ～61%，每天光照與黑暗時間各12h。所有籠具、飼料、墊料、飲水均高壓滅菌。實驗期間的灌胃、換水、添加飼料等操作均在超凈工作臺內進行，由專人管理。實驗期間動物自由進食、飲水。參照文獻[1－2]方法制備糖尿病大鼠模型。喂食高脂高糖飼料(由基礎飼料加入脂肪15%、蔗糖20%、蛋黃粉5%、膽固醇1%、食鹽0.1%，經輻照處理)共4周，誘導胰島素抵抗。大鼠隔夜空腹12h后右側腹腔注射2%STZ 40mg/kg(未成模者在注射后1周再注射1次)，并在此期間繼續喂以高糖高脂飼料。空白組大鼠右側腹腔注射檸檬酸－檸檬酸鈉緩沖液0.1mmol/L(pH4.2)，并喂以普通顆粒飼料。糖尿病合并動脈粥樣硬化大鼠模型的制備:糖尿病模型成功大鼠，繼續喂食高脂高糖飼料，共12周。(2)造模標準:糖尿病判定標準:注射后第7、14日測定血糖，如隨機血糖≥16.9mmol/L，或出現多飲、多尿、消瘦、乏力、懶動等糖尿病癥狀且連續2次隨機血糖＞11.1mmol/L，即視為糖尿病建模成功。(3)分組及治療:糖尿病合并動脈粥樣硬化模型成功大鼠(不成功模型棄用)，按照隨機數字表法分為模型組、對照組和治療組各9只。對照組按1.6mg/(kg·d)灌胃貝那普利懸液(質量濃度為0.16mg/mL)，治療組按1g/(kg·d)灌胃通心絡膠囊懸液 (質量濃度為0.1g/mL)，模型組按10mL/(kg·d)灌胃生理鹽水。另設同周齡SD大鼠作為空白對照組，按10mL/(kg·d)灌胃生理鹽水。各組均每日灌胃1次，連續8周。(4)標本采集:大鼠在實驗8周后處死，處死前禁食不禁水12h，按2mL/kg腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉，取腹部正中切口，分離腹主動脈采血，備測 ET、AngⅡ。

1.3 統計學處理 應用SPSS 13.0統計分析軟件。計量資料以(±s)表示，首先進行方差齊性檢驗，方差齊時對多個樣本均數間的多重比較應用SNK－q檢驗;方差不齊時應用Tamhane’s T2進行檢驗。

2 結果

見表1。與空白組比較，模型組ET、AngⅡ增高(P ＜0.01);與模型組比較，對照組和治療組ET、AngⅡ均降低 (P ＜0.05)，治療組與對照組相近(P＞0.05)。結果 表明，貝那普利和通心絡膠囊可改善大鼠內皮因子水平。

表1 各組大鼠血清ET、AngⅡ比較 (pg/mL，±s)

與空白組比較，＊P ＜0.01;與模型組比較，△P ＜0.05

組別空白組模型組對照組治療組n9999 ET 323.05 ±17.83 496.24 ±16.35＊346.13 ±12.15△379.79 ±19.33△AngⅡ576.17 ±17.28 835.59 ±26.01＊663.43 ±17.90△736.07 ±20.45△

3 討論

內皮功能障礙是糖尿病合并動脈粥樣硬化發病的重要機制，血管內皮細胞結構和功能的改變是動脈粥樣硬化發生的始動環節，主要表現為縮血管因子如ET、AngⅡ等水平的升高及舒血管因子如一氧化氮(NO)、前列環素2等水平的降低。調節血管內皮因子水平是預防糖尿病合并動脈粥樣硬化疾病的關鍵。

通心絡膠囊為治療“脈絡－血管系統病”代表方藥，多用于冠心病心絞痛的治療。臨床報道其具有改善血管內皮的功能。尤士杰等[3]在通心絡膠囊用于急性心肌梗死血運重建后的有效性和安全性研究中，表明通心絡膠囊可明顯增加血清NO含量，降低血清ET水平，從而改善血管內皮功能。

本實驗結果表明，糖尿病合并動脈粥樣硬化病變模型大鼠存在ET、AngⅡ水平增高，考慮內皮功能異常同糖尿病合并動脈粥樣硬化并發癥密切相關。通心絡膠囊能夠降低ET、AngⅡ水平，同貝那普利作用相近，提示通心絡膠囊可能具有改善血管內皮功能、減緩或預防糖尿病血管并發癥發生的作用。

[1]張芳林，李果，劉優萍，等.2型糖尿病大鼠模型的建立及其糖代謝特征分析[J].中國實驗動物學報，2002，10(1):16－20.

[2]黃霖，李迎新，劉華.實驗性糖尿病大鼠動脈粥樣硬化模型的建立[J].中國中醫急癥，2007，16(9):1111 －1113.

[3]尤士杰，楊躍進，陳可冀，等.通心絡膠囊在急性心肌梗死血運重建后的有效性和安全性研究[J].疑難病雜志，2004，3(4):193－196.

Effect of Tongxinluo Capsule on the Expression of ET and AngⅡin Rats with Diabetic Atherosclerosis

HAN Jing-hui， LI Zhen， YANG Hai-yan， et al
The First Affiliated Hospital of Henan University of TCM(Zhengzhou 450000)

Objective:To study the mechanisms of Tongxinluo Capsule on diabetic atherosclerosis.MethodsThese male SD rat models were divided randomly into the normal group， the model group， the control group (with benazepril)， the treatment group(with Tongxinluo Capsule).With corresponding drug intragastric administration in each group for 8 weeks， the ET content and the AngⅡ level were detected by the radioimmunological method.ResultsThe ET and the AngⅡin the treatment group were lower than those in the model group.These levels were similar to those in the control group.ConclusionThe mechanism that the endothelial function of the diabetic atherosclerosis could be improved by the Tongxinluo Capsule might be related to the reduction the ET level and the AngⅡcontent.

Tongxinluo Capsule;Diabetic atherosclerosis;ET;AngⅡ

R285.5

A

1004－745X(2010)09－1553－02

2010－04－26)