槐花炮制品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

陳 林，何秀麗，朱海濤，王 剛，袁勝浩

（鄖陽醫(yī)學(xué)院附屬太和醫(yī)院藥學(xué)部，十堰市 442000）

槐花為豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥花，具有涼血止血、清肝瀉火之功效[1]，用于治療便血、痔血、血痢、崩漏、吐血、肝熱目赤、頭痛眩暈、癰疽瘡毒。槐花成分主要為蘆丁，有少量的槲皮素、山柰酚[2]。筆者參照2005年版《中國藥典》（一部）“槐花”項下方法，對湖北省市售的槐花炮制品進行全面研究，擬建立湖北省槐花炮制品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，保證臨床用藥的質(zhì)量。

1 儀器與試藥

U3000型高效液相色譜（HPLC）儀（美國戴安公司）；FA2004型電子天平（上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司）；TU-1901型雙光束紫外-分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；UP5200H型超聲提取儀（熊貓集團南京電子計量有限公司）。

甲醇為色譜純，水為純化水，其它試劑均為分析純；蘆丁對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：100080-200707）；槐花炮制品（均由湖北省十堰市藥品檢驗所提供，經(jīng)鄖陽醫(yī)學(xué)院生藥學(xué)教研室陳吉炎教授鑒定為豆科植物槐S.japonica L.的干燥花）；槐花對照藥材（中國藥品生物制品檢定所，批號：1063-9801）。

2 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[1]

2.1 性狀

槐花：皺縮而卷曲，花瓣多散落。完整者花萼鐘狀，黃綠色，先端5淺裂；花瓣5，黃色或黃白色，1片較大，近圓形，先端微凹，其余4片長圓形。雄蕊10，其中9個基部聯(lián)合，花絲細長。雌蕊圓柱形，彎曲。體輕。氣微，味微苦。

2.2 鑒別[3]

2.2.1 顯微鑒別：槐花、炒槐花、槐花炭粉末分別呈黃綠色、棕黃色、褐色，粉末特征一致。花粉粒類球形，直徑約15 μm，具3個萌發(fā)孔。非腺毛黃或無色，1～3個細胞，長20～500 μm，直徑7～20 μm。氣孔長圓形、不定式，副衛(wèi)細胞4～8個。草酸鈣方晶存在于萼片薄壁細胞中，呈長方形，常2個相連，長5～10 μm，寬4～7 μm，少見。槐花炮制品粉末顯微圖見圖1。

圖1 槐花炮制品粉末顯微圖A～C.非腺毛；D.草酸鈣方晶；E.花粉粒；F.氣孔Fig 1 Microgram for S.japonica decoction pieces powderA～C.non-glandular hairs；D.calcium oxalate trigonal；E.pollen；F.pore

2.2.2 薄層色譜（TLC）鑒別：取3種炮制品和槐花對照藥材粉末各約0.2 g，分別加甲醇5 mL，密塞，振搖10 min，濾過，濾液分別作為供試品溶液和對照藥材溶液；另取蘆丁對照品，加甲醇制成每1 mL含4 mg的溶液，作為對照品溶液。照TLC法[1]試驗，吸取上述5種溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水（8∶1∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，待乙醇揮干后置紫外光燈（365 nm）下檢視。結(jié)果，供試品色譜中，在與對照品及對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；槐花炭樣品在TLC上看不到蘆丁的斑點，說明槐花炭中蘆丁已經(jīng)分解。槐花的TLC見圖2。

圖2 槐花的TLC1.槐花對照藥材；2.槐花飲片；3、4.炒槐花；5.槐花炭；6.蘆丁對照品Fig 2 TLC of S.japonica1.Folos Sophorae；2.S.japonica decoction pieces；3，4.stir-baked S.japonica；5.S.japonica carbon；6.rutin reference substance

2.3 檢查

2.3.1 水分：參照2005年版《中國藥典》（一部）附錄水分測定法第一法對不同批次的槐花炮制品進行測定。水分測定結(jié)果見表1。

根據(jù)表1結(jié)果，并參照2005年版《中國藥典》（一部）“槐花”項下的規(guī)定，規(guī)定槐花飲片水分為不超過11.0%；炒槐花水分為不超過9.0%；槐花炭水分為不超過9.0%。

2.3.2 總灰分：參照2005年版《中國藥典》（一部）附錄總灰分測定法對不同批次的槐花炮制品進行測定。總灰分測定結(jié)果見表2。

表1 水分測定結(jié)果Tab 1 Results of determination of moisture

表2 總灰分測定結(jié)果Tab 2 Results of determination of total ash

根據(jù)表2結(jié)果，并參照《中國藥典》2005年版（一部）“槐花”項下的規(guī)定，規(guī)定槐花飲片總灰分為不超過14%；炒槐花總灰分為不超過12.0%；槐花炭總灰分為不超過16.0%。

2.3.3 酸不溶性灰分：參照2005年版《中國藥典》（一部）附錄酸不溶性灰分測定法對不同批次的槐花炮制品進行測定。酸不溶性灰分測定結(jié)果見表3。

根據(jù)表3結(jié)果，并參照2005年版《中國藥典》（一部）“槐花”項下的規(guī)定，規(guī)定槐花飲片酸不溶性灰分為不超過8.0%；炒槐花酸不溶灰分為不超過6.0%；槐花炭總灰分為不超過8.0%。

2.3.4 浸出物：參照2005年版《中國藥典》（一部）醇溶性浸出物測定法項下的熱浸法對不同批次的槐花炮制品進行測定。浸出物測定結(jié)果見表4。

根據(jù)表4結(jié)果，并參照2005年版《中國藥典》（一部）“槐花”項下的規(guī)定，槐花、炒槐花浸出物的限度定為不得少于37.0%；槐花炭浸出物的限度為不得少于35.0%。

表3 酸不溶性灰分測定結(jié)果Tab 3 Results of determination of acid insoluble ash

2.4 含量測定

槐花主要成分為黃酮類成分蘆丁，故在進行含量測定時，選取測定蘆丁的含量作為該品種的含量控制指標(biāo)。2005年版《中國藥典》（一部）收載“槐花”含量測定項通過紫外-可見分光光度法測定總黃酮的含量，以蘆丁計，故以此法對不同批次的槐花炮制品進行測定，結(jié)果見表5。通過超聲提取的方法制備供試品溶液，采用HPLC法測定蘆丁的含量[4]，對不同批次的槐花炮制品進行測定，結(jié)果見表6；色譜見圖3。

根據(jù)表5結(jié)果，規(guī)定槐花、炒槐花中總黃酮含量為按干燥品計算，含總黃酮以無水蘆丁（C27H30O16）計，不得少于7.0%；槐花炭含蘆丁不得少于5.0%。

根據(jù)表6結(jié)果，并參照2005年版《中國藥典》（一部）相關(guān)規(guī)定，規(guī)定槐花、炒槐花中蘆丁含量按干燥品計算，含無水蘆丁（C27H30O16）不得少于8.0%；槐花炭含蘆丁不得少于4.0%。

3 討論

目前，我國中藥材炮制品質(zhì)量參差不齊，規(guī)范化管理勢在必行。《中國藥典》只有槐花的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，而沒有炒槐花、槐花炭的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。本研究根據(jù)《中國藥典》相關(guān)項下要求，通過對湖北省出售的槐花炮制品的檢測，制定了炒槐花、槐花炭質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，不但對湖北省中藥材炮制品質(zhì)量控制有實際意義，同時對其他地區(qū)中藥材炮制品質(zhì)量控制也有一定借鑒作用。

表4 浸出物測定結(jié)果Tab 4 Results of determination of extractive

表5 總黃酮含量測定結(jié)果Tab 5 Content determination of total flavonoids

表6 蘆丁含量測定結(jié)果Tab 6 Content determination of rutin

圖3 高效液相色譜圖A.蘆丁對照品；B.供試品Fig 3 HPLC chromatogramsA.rutin reference substance；B.test sample

2005年版《中國藥典》（一部）“槐花”項下蘆丁的含量采用甲醇-1%冰醋酸（32∶68）為流動相進行洗脫，發(fā)現(xiàn)出峰時間較長，調(diào)為甲醇-1%冰醋酸（40∶60）作為流動相后，色譜峰的分離度較好，出峰時間縮短。

本研究根據(jù)實際檢測數(shù)值，并參照2005年版《中國藥典》（一部）“槐花”項下水分、總灰分、浸出物、含量等規(guī)定值，分別確定了槐花、炒槐花、槐花炭項下各數(shù)值。

在浸出物測定、總黃酮含量測定、蘆丁含量測定中，批號080701的槐花炭測得數(shù)值很小，表明該批槐花炭炭化程度大，不符合《中國藥典》關(guān)于槐花炒炭的要求。

[1]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（一部）[S].2005年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：246、247、附錄31.

[2]吳虹霽，蘭昌云，陳 媛.槐花的研究進展[J].廣東微量元素科學(xué)，2006，13（6）：1.

[3]朱婕妤，鄭繼民.葛花、扁豆花和槐花3種易混淆花類中藥的鑒別[J].中國藥房，2005，16（15）：1195.

[4]楊美華，陳小榮，鄭俊華.高效液相色譜法測定槐花藥材中蘆丁的含量[J].中國藥事，2000，14（1）：34.