牡丹皮水提取物及乙醇提取物的抗菌作用研究

傅若秋，孟德勝，胡大強(qiáng)，龍世林

(第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所藥劑科，重慶 400042)

牡丹皮為毛茛科植物牡丹 Paeonia suffruticosa Andr.的干燥根皮，具有清熱涼血、活血化瘀功效，主治濕毒發(fā)斑、癰腫瘡毒、吐血衄血、夜熱早涼等癥[1]。筆者研究了牡丹皮水提取物及不同濃度乙醇提取物對(duì)金黃色葡萄糖球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌的抑制作用，報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

牡丹皮500 g(本院中藥房提供)。供試菌種為金黃色葡萄糖球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌(本院檢驗(yàn)科提供)。普通瓊脂平板、肉湯培養(yǎng)基、葡萄糖酚紅肉湯培養(yǎng)基(本院藥檢室提供)。

1.2 方法

1.2.1 提取方法

取牡丹皮100 g，碾碎，加100 mL蒸餾水浸泡10 min，然后煎煮30 min及20 min各1次，合并煎液，過(guò)濾，濃縮至濃度100%(即1 mL藥液含生藥量為1 g)，作為水提取物，備用。

取牡丹皮100 g，共4份，碾碎，分別加50%，70%，85%，95%的藥用乙醇100 mL，回流提取2 h及1 h各1次，合并煎液，過(guò)濾，回收乙醇，制成干膏，用無(wú)菌蒸餾水調(diào)濃度至100%(即1 mL藥液含生藥量為1 g)，滅菌，冷藏，作為乙醇提取物，備用。

1.2.2 供試菌懸液制備[2-3]

將供試菌種接種于普通瓊脂平板，置37℃恒溫箱中培養(yǎng)24 h，用接種環(huán)挑取少許供試菌，置肉湯培養(yǎng)管中，37℃培養(yǎng)6 h，再用肉湯調(diào)細(xì)菌濃度，使之含菌量約為0.5麥?zhǔn)蠁挝唬吹霉┰嚲鷳乙骸?/p>

1.2.3 最低抑菌濃度(MIC)測(cè)定

采用二倍稀釋法，取13 mm×100 mm滅菌具棉塞的試管9支，編號(hào)，在每管中加無(wú)菌肉湯培養(yǎng)基2.0 mL，于第1管中加牡丹皮水或乙醇提取物2.0 mL，混勻后取出2.0 mL放入第2管，依此類(lèi)推，至第9管取出2.0 mL棄去，即牡丹皮提取物被逐步稀釋成1∶2，1∶4，1∶8，1 ∶16，1 ∶32，1 ∶64，1 ∶128，1 ∶256，1 ∶512，往管中加供試菌懸液0.1 mL。每濃度做3個(gè)復(fù)管。置37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～36 h，肉眼觀察結(jié)果。試管中液體顏色變成黃色為陽(yáng)性，試管中液體顏色仍呈紅色為陰性。

1.2.4 最低殺菌濃度(MBC)的測(cè)定

從上述肉眼觀察的 MIC陰性管中取培養(yǎng)液轉(zhuǎn)種到瓊脂平板上，置37℃恒溫箱中培養(yǎng)24 h，觀察結(jié)果。培養(yǎng)基中無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)的最低濃度即為牡丹皮試液的 MBC。

2 結(jié)果

牡丹皮不同提取物的 MIC和 MBC測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。可見(jiàn)，牡丹皮水提取物及乙醇提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌具有較強(qiáng)的抑制作用和一定的殺滅作用，其中對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制和殺滅作用較強(qiáng)。綜合分析抑菌效果，強(qiáng)度大小順序大致為水提取物、50%乙醇提取物、70%乙醇提取物、85%乙醇提取物、95%乙醇提取物。

表1 牡丹皮不同提取物抗菌作用測(cè)定結(jié)果[MIC/MBC]

3 討論

結(jié)果顯示，牡丹皮水提取物及各濃度乙醇提取物對(duì)3種常見(jiàn)致病菌均有不同程度的抗菌作用。已有研究表明[1]，丹皮酚可能為牡丹皮抗菌的主要成分。本研究為牡丹皮在臨床細(xì)菌感染治療中的應(yīng)用提供了一定依據(jù)。

[1]陰 健，郭力弓.中藥現(xiàn)代研究與應(yīng)用[M].北京:學(xué)苑出版社，1993:363-369.

[2]梁 薇，梁 瑩，應(yīng)惠芳.桑葉水提物及醇提物抗菌作用的研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2005，1(8):753.

[3]胡功允，張琪霞，謝旭一.比濁法測(cè)定抗生素微生物檢定試驗(yàn)菌菌液濃度[J]. 西北藥學(xué)雜志，1997，12(3):104.