甘肅產(chǎn)盤葉忍冬對小鼠鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究

李雪萍，高曉東，張永東，王蘭，李永輝，梁濤，胡清榮

（1.甘肅省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院，甘肅蘭州 730050；2.甘肅省疾病預(yù)防控制中心，甘肅蘭州 730030）

甘肅產(chǎn)盤葉忍冬對小鼠鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究

李雪萍1，高曉東2，張永東1，王蘭1，李永輝1，梁濤1，胡清榮1

（1.甘肅省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院，甘肅蘭州 730050；2.甘肅省疾病預(yù)防控制中心，甘肅蘭州 730030）

目的觀察甘肅產(chǎn)盤葉忍冬水提物對物理和化學(xué)刺激引起小鼠疼痛的影響。方法分別用熱板法和扭體法對小鼠致痛，然后觀察大（28.8 g/kg）、小（10.8 g/kg）2個劑量甘肅產(chǎn)盤葉忍冬水提物的鎮(zhèn)痛作用，并將其與陽性對照組比較。結(jié)果甘肅產(chǎn)盤葉忍冬大、小劑量組均有延長小鼠扭體潛伏期的作用，且與正常對照組比較有顯著性差異（P＜0.05）；在小鼠熱板實(shí)驗(yàn)中，給藥后3 h甘肅產(chǎn)盤葉忍冬水提物大、小劑量均有提高小鼠痛閾的作用，且與正常對照組相比有顯著性差異（P＜0.05）。

結(jié)論甘肅產(chǎn)盤葉忍冬水提物具有降低小鼠由物理和化學(xué)因素引起疼痛的作用。

甘肅產(chǎn)盤葉忍冬；鎮(zhèn)痛作用；實(shí)驗(yàn)研究

盤葉忍冬屬于忍冬科忍冬屬落葉藤本，別名大葉銀花（河南）、杜銀花、土銀花（四川峨眉）、葉藏花、金銀花，又名二花、雙花、金花、銀花和忍冬花。藥理實(shí)驗(yàn)表明，盤葉忍冬具有廣泛的抗菌作用，對痢疾桿菌、傷寒桿菌、大腸桿菌、百日咳桿菌、白喉?xiàng)U菌、綠膿桿菌、結(jié)核桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、肺炎雙球菌等均具有抑制作用[1～3]，其還有抗流感病毒的作用[4～5]。本文就甘肅產(chǎn)盤葉忍冬水提物的鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行研究。

1 材料

1.1 藥物與試劑

盤葉忍冬水提物：由甘肅省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院藥理毒理室提供；阿司匹林（200 g/kg），由河北東龍藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號為20020522；嗎啡，由沈陽第一制藥廠生產(chǎn)，批號為070707；醋酸（分析純），由西安化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號為780529。

1.2 儀器

1%電子天平（日本）；GJ-8402型熱板測痛儀（浙江）。

1.3 動物

昆明種小鼠，清潔級，體重18～22 g，雌雄兼有，由衛(wèi)生部蘭州生物所提供，合格證號為醫(yī)動字第14-001號。

2 方法及步驟

2.1 熱板法[6]

（1）動物篩選：昆明種雌性小鼠，于正式實(shí)驗(yàn)前用熱板測痛儀[溫度為（55±0.5）℃]進(jìn)行篩選，小鼠自放上熱板測痛儀至出現(xiàn)舔后足所需的時間為痛閾值（s），挑選5～30 s內(nèi)反應(yīng)穩(wěn)定、不跳躍的小鼠供實(shí)驗(yàn)用。（2）分組及給藥方法：將挑選合格的小鼠40只，按痛閾值隨機(jī)分為4組，每組10只，即正常對照組（NS）、盤葉忍冬小劑量組（10.8 g/kg）（簡稱小劑量組）、盤葉忍冬大劑量組（28.8 g/kg）（簡稱大劑量組）、嗎啡組（25 mg/kg）（陽性對照組），各組小鼠均按設(shè)計(jì)劑量灌胃給藥，1次/天，連續(xù)5天，末次給藥后于30 min、1 h、2 h、3 h、4 h分別測定2次各組小鼠的痛閾值，取平均值。如小鼠在熱板上60 s仍無痛反應(yīng)，按60 s計(jì)。

2.2 扭體法[6～7]

取昆明種小鼠40只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為4組，每組10只，即正常對照組（NS）、小劑量組（10.8 g/kg）、大劑量組（28.8 g/kg）、阿司匹林組（0.2 g/kg）。各組均灌胃給藥，1次/天，連續(xù)5天。末次給藥后于30 min給每只小鼠腹腔注射0.6%醋酸0.2 ml，觀察注射后各鼠的扭體潛伏期及20 min內(nèi)小鼠的扭體反應(yīng)次數(shù)（以腹腔內(nèi)凹，伸展后肢，臀部抬高為標(biāo)準(zhǔn))，計(jì)算扭體反應(yīng)抑制率。扭體反應(yīng)抑制率（%）=（正常對照組平均扭體次數(shù)-給藥組平均扭體次數(shù)）/正常對照組平均扭體次數(shù)×100%。

3 結(jié)果

3.1 熱板法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

給藥后2 h大劑量組小鼠的痛閾值與正常對照組比較，有顯著性差異（P＜0.05），給藥后3 h大、小劑量組及嗎啡組與正常對照組比較均有顯著性差異（P＜0.05），給藥后4 h各組與正常對照組比較，均無顯著性差異（P＞0.05），結(jié)果見表1。

表1 甘肅產(chǎn)盤葉忍冬對熱板實(shí)驗(yàn)中小鼠的鎮(zhèn)痛作用（）

表1 甘肅產(chǎn)盤葉忍冬對熱板實(shí)驗(yàn)中小鼠的鎮(zhèn)痛作用（）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05；表中數(shù)值為小鼠的痛閾值

組別給藥前給藥后30 min1 h2 h3 h4 h正常對照組小劑量組大劑量組嗎啡組15.6±2.5 15.7±3.3 15.5±3.2 15.8±2.9 16.1±2.6 15.7±2.4 15.8±3.2 23.0±3.2* 15.9±2.1 15.8±2.1 15.7±2.6 19.0±3.0* 15.9±2.2 16.1±2.1 18.0±2.1* 18.0±2.5* 15.6±2.6 18.0±2.1* 18.0±2.4* 18.0±2.1* 16.0±3.0 16.3±2.1 16.9±3.1 17.1±1.9

3.2 扭體法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

小鼠給予甘肅產(chǎn)盤葉忍冬水提物后，在醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)中，各給藥組與正常對照組比較，扭體潛伏期均延長，且對比有極顯著性差異（P＜0.01）。大劑量組、阿司匹林組在給藥后20 min內(nèi)的扭體次數(shù)明顯減少，有極顯著性差異（P＜0.01），說明該藥具有較好的鎮(zhèn)痛作用，結(jié)果見表2。

表2 甘肅產(chǎn)盤葉忍冬對小鼠扭體實(shí)驗(yàn)的鎮(zhèn)痛作用（）

表2 甘肅產(chǎn)盤葉忍冬對小鼠扭體實(shí)驗(yàn)的鎮(zhèn)痛作用（）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別劑量（g/kg）扭體潛伏期（s）20 min內(nèi)扭體次數(shù)（次）正常對照組小劑量組大劑量組阿司匹林組-10.8 28.8 0.2 150.6±37.7 229.9±58.4** 222.3±58.9** 343.1±65.6** 47.5±12.6 33.1±13.8* 29.0±12.2** 19.4±9.2**

4 結(jié)論與討論

由表1、表2可知，甘肅產(chǎn)盤葉忍冬具有較好的鎮(zhèn)痛作用，其中10.8 g/kg的劑量起效比較慢且藥效持續(xù)時間較短；28.8 g/kg的劑量起效較快且持續(xù)時間較長；甘肅產(chǎn)盤葉忍冬水提物能明顯延長小鼠的扭體潛伏期，其大劑量還可明顯減少20 min內(nèi)小鼠的扭體反應(yīng)次數(shù)，由此可見，甘肅產(chǎn)盤葉忍冬具有較好的鎮(zhèn)痛作用。

熱板法溫度刺激與腹腔注射有害化學(xué)品分別用于檢測中樞與外周鎮(zhèn)痛活性，由醋酸引起的疼痛與內(nèi)源性物質(zhì)釋放興奮痛覺神經(jīng)末梢有關(guān)。炎性物滲出、組織腫脹是炎癥早期的重要表現(xiàn)，因?yàn)闊岚宸y定的是中樞神經(jīng)的鎮(zhèn)痛活性，故陽性對照組選用中樞鎮(zhèn)痛藥嗎啡；扭體法測定的是外周鎮(zhèn)痛活性，故考慮選用外周鎮(zhèn)痛藥物阿司匹林作為陽性對照組。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以說明，甘肅產(chǎn)盤葉忍冬對中樞及外周神經(jīng)均具有鎮(zhèn)痛活性，但是其具體作用機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。

[1]馮延明，姜波，孫延波，等.金銀花對不同血清突變形鏈球菌的抑菌實(shí)驗(yàn)研究[J].白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1996，22（2）：150.

[2]中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會.中國植物志[M].北京:科學(xué)出版社，1988.

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[4]鄭漢臣，蔡少青.藥用植物學(xué)與生藥學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2005.

[5]孫延波，馮延明，趙玉春，等.金銀花對口腔病原微生物體外抑菌試驗(yàn)的研究[J].中國中藥雜志，1996，21（4）：242.

[6]許叔云，卞如廉，陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1991.

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1671-1246（2010）08-0139-02