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桃葉鴉蔥抗炎鎮痛作用的實驗研究

2010-11-29 00:48:40曾春萍
天津中醫藥 2010年6期
關鍵詞:小鼠劑量

曾春萍

(張家口市藥品檢驗所化學組,張家口 075000)

桃葉鴉蔥是菊科植物桃葉鴉蔥(Scorzonera sinensis Lipsch)的干燥全草。主要分布在河北、內蒙等地。民間使用療效確切,具清熱解毒、解毒療瘡之功效,且有飼用價值。筆者研究了桃葉鴉蔥對實驗性炎癥的影響,為臨床用藥提供了一定的實驗依據。

1 實驗材料

1.1 儀器 ZW358十萬分之一電子天平(日本島津公司);UV-2100紫外可見分光光度計(北京萊伯泰科儀器有限公司);3k30超速冷凍離心機(美國Sigma公司)。

1.2 藥物 桃葉鴉蔥,采自河北省沽源縣,經河北北方學院中藥鑒定室趙恒成教授鑒定為正品。桃葉鴉蔥浸膏的制備:桃葉鴉蔥2.5 kg,用75%乙醇回流提取制備,生藥含量為1.0 kg/L。消炎痛(山西三晉藥業有限公司,批號067243)。伊文思藍(成都貝斯特試劑有限公司,批號65535)。冰醋酸(張家口化學試劑廠,批號051125)。

1.3 動物 昆明種小鼠,雌雄各半,體質量18~22 g;SD大鼠,雄性,體質量180~220 g,均購于河北醫科大學實驗動物中心。

2 統計學處理方法

采用SPSS 17.0 for Windows軟件處理。數據用均數±標準差(±s)表示,采用單因素方差分析,P<0.05表示有統計學意義。

3 方法

3.1 對醋酸誘發小鼠毛細血管通透性增高的作用[1]取小鼠50只,隨機分為5組。實驗前禁食不禁水15 h,高、中、低劑量組分別按 0.04,0.02,0.01 mL/g體質量灌胃,對照組給生理鹽水,陽性組給消炎痛(0.01 mg/g)。給藥30 min后,小鼠尾靜脈注射2%伊文思藍生理鹽水溶液0.01 mL/g,30 min后,腹部注射0.3%醋酸溶液0.02 mL/g,20 min后,脫頸處死小鼠,剪開腹部皮膚,用10 mL生理鹽水反復沖洗腹腔,收集洗滌液,以吸管吸出洗滌液5mL,3000 r/min離心15 min,取上清液用UV-2100紫外可見分光光度計在590 nm處比色,測定吸光度,與標準曲線比較,得到染料滲出量,比較組間差異。

3.2 對棉球所致肉芽組織增生的作用[2]取大鼠40只,分組及劑量同3.1,實驗前禁食不禁水15 h,乙醚淺麻醉,無菌條件下大鼠背部剃毛,75%乙醇及0.2%利凡諾消毒后,切開皮膚,將已滅菌干燥的20 mg棉球植入背部皮膚下。術后當日給藥,1次/d,連續7 d,第8天處死大鼠,剝離肉芽組織,濾紙吸干,烘箱干燥24 h后稱質量,比較各肉芽組織的質量,計算增加百分率及抑制率,比較組間差異。

3.3 對蛋清所致大鼠足腫脹的作用[2]取大鼠40只,分組及劑量同3.1,實驗前禁食不禁水15 h,測定每鼠右后足體積為基數,給藥30 min后,以新配制的10%蛋清致大鼠足趾腫脹,分別于 0.5、1、2、3、4、5 h測大鼠右后足體積,求出腫脹增長百分率[(給藥后值-給藥前值)/給藥前值],比較組間差異。

3.4 對醋酸誘發小鼠扭體反應的影響[3]選取小鼠50只,隨機分為5組,分組及劑量同3.1,實驗前禁食不禁水15 h,腹部注射給藥6 min后,腹部注射0.5%醋酸0.01 mL/g,0.5 h后記錄25 min內小鼠扭體次數,與模型組相比較,求出減少百分率,比較組間差異。

4 結果

4.1 各組小鼠給藥后對醋酸誘發小鼠毛細血管通透性增高的作用的比較 結果桃葉鴉蔥各劑量組與模型組比較,均能顯著抑制醋酸誘發小鼠毛細血管通透性增高(P<0.01),且高劑量組的作用與0.01 mg/g的消炎痛相當,結果見表1。

表1 桃葉鴉蔥浸膏對小鼠毛細血管通透性的影響Tab.1 Effects on Capillary permeability of the mice

4.2 各組大鼠給藥后對棉球所致肉芽組織增生的作用的比較 連續7 d腹部注射桃葉鴉蔥各劑量組與模型組相比較,均對棉球所致肉芽組織增生有明顯的抑制作用(P<0.01),且高劑量組的作用與0.1 mg/g的消炎痛相當,結果見表2。

表2 桃葉鴉蔥浸膏對棉球肉芽組織增生的影響Tab.2 Effects on tampon granuloma of the rats %

4.3 各組大鼠給藥后對蛋清所致大鼠足腫脹的作用的比較 結果桃葉鴉蔥各劑量組與模型組比較,均有顯著抑制蛋清所致大鼠足腫脹的作用,且高劑量組的作用與0.01 mg/g的消炎痛相當,結果見表3。

4.4 各組小鼠給藥后對醋酸誘發小鼠扭體反應的比較 結果桃葉鴉蔥各劑量組與模型組比較,對醋酸誘發的小鼠扭體反應有一定的抑制作用,但其作用強度不及消炎痛,結果見表4。

4 討論

炎癥是具有血管系統的活體組織對局部損傷的反應。腫脹是炎癥早期的重要指標,在炎癥晚期和慢性炎癥期,由于巨噬細胞和纖維母細胞等增生,形成肉芽組織。本實驗用醋酸、棉球和蛋清作為致炎因子,觀察了桃葉鴉蔥乙醇提取物對實驗性滲出、腫脹、增生和疼痛的影響。

表3 桃葉鴉蔥浸膏對蛋清所致大鼠足腫脹的影響(±sTab.3 Effects on swelling degrees of rat’s toes(±s%

表3 桃葉鴉蔥浸膏對蛋清所致大鼠足腫脹的影響(±sTab.3 Effects on swelling degrees of rat’s toes(±s%

注:與模型組比較,△P<0.05,△△P<0.01。

組別 n 腫脹增長百分率劑量(mg/10 g)-1002004000.1模型組桃葉鴉蔥浸膏桃葉鴉蔥浸膏桃葉鴉蔥浸膏消炎痛888881 h 32.9±7.129.3±4.425.1±6.820.6±2.5△18.5±3.7△△2 h 43.5±7.341.2±6.336.5±4.2△24.5±6.0△△22.6±4.3△△3 h 57.9±8.450.1±6.4△43.7±3.5△△37.2±3.8△△36.0±2.1△△4 h 78.5±5.864.5±6.9△51.2±4.0△△43.2±4.2△△40.1±5.3△△5 h 95.8±5.773.5±6.1△△63.1±3.7△△54.1±4.6△△55.2±4.2△△

表4 桃葉鴉蔥浸膏對醋酸誘發小鼠扭體反應的影響(±sTab.4 Effects on the twist reaction of the mice(±s

表4 桃葉鴉蔥浸膏對醋酸誘發小鼠扭體反應的影響(±sTab.4 Effects on the twist reaction of the mice(±s

注:與模型組比較,△P<0.01。

組別模型組桃葉鴉蔥浸膏桃葉鴉蔥浸膏桃葉鴉蔥浸膏消炎痛n劑量(mg/10 g)-1002004000.11010101010扭體次數(次)32.1±4.527.8±2.825.0±3.4△21.0±2.6△18.5±1.5△抑制率(%)-13.422.131.542.4

桃葉鴉蔥75%乙醇提取物低、中、高劑量組及消炎痛組與空白組比較,對醋酸誘發小鼠毛細血管通透性增高、棉球所致肉芽組織增生、蛋清所致大鼠足腫脹的抑制作用均有顯著性差異。醋酸所致小鼠扭體試驗的中、高劑量組和消炎痛組同空白對照組相比較具有顯著性差異,低劑量組對腫脹也有較弱的抑制作用。顯示其對化學因素引起的疼痛和炎癥有明顯的對抗作用。

急性炎癥是“熱毒”證候的一個重要表現,《滇南本草》謂清熱解毒藥:“清熱,解諸瘡,癰疽發背,丹流瘰疬?!碧胰~鴉蔥抗炎鎮痛作用當與其清熱解毒功效有關。

本實驗證明其具有良好的抗炎、鎮痛作用,為今后桃葉鴉蔥的開發、應用提供了理論依據。目前,桃葉鴉蔥抗炎鎮痛作用的物質基礎及作用原理還不甚清楚,在以后的研究中將進一步對此進行研究。

[1]吳 巍,萬軍梅,吳亦帆.燒燙靈對動物實驗性燙傷創面愈合與抗炎鎮痛作用的研究[J].時珍國醫國藥,2004,15(7):465-466.

[2]徐淑云,卡如濂,陳 修.藥理實驗實驗方法學[M].第3版.北京:人民衛生出版社,2003:905-911.

[3]陳 奇.中藥藥理研究方法學[M].北京:人民衛生出版社,2000:378-379.

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