花葉萬年青組織培養工廠化育苗的研究

周 鑫 劉偉強 孫海龍

(黑龍江林業職業技術學院，黑龍江 牡丹江 157011)

花葉萬年青(DieffenbachiapictaLodd)，又名黛粉葉，天南星科花葉萬年青屬植物。原產南美巴西，為常綠灌木狀草本，莖干粗壯多肉質，株高可達1.5m，葉片大而光亮，著生于莖干上部，橢圓狀卵圓形或寬披針形，全緣，長20～50cm、寬5～15cm，葉片兩面深綠色，其上鑲嵌著密集、不規則的白色、乳白、淡黃色等色彩不一的斑點，花單性，佛焰花序，佛焰苞呈橢圓形。花葉萬年青色彩明亮，四季青翠，枝繁葉茂，充滿生機，優美高雅，極耐蔭，特別適合在現代建筑中配置，是目前備受推崇的室內觀葉植物之一，深受人們的喜愛，市場需求量很大。花葉萬年青常規繁殖采用分株和扦插繁殖，年繁殖系數低，一般在5～20倍。組織培養工廠化育苗可在短期內獲得大量無病蟲害、優質苗木，滿足市場需求。

1 材料與方法

1.1 實驗材料選取與處理

選取幼葉葉柄為外植體材料。采集外植體材料用自來水沖洗，用70%乙醇消毒5～10s，傾去乙醇，用無菌水沖洗。在超凈工作臺上用0.1%的氯化汞溶液浸泡6min后，注入適量的無菌水，反復沖洗8遍，每次3min，用無菌紗布吸干水分，無菌接種到培養基上。

1.2 試驗方法

1.2.1 最佳誘導培養基選擇實驗

將外植體接種在MS為基本培養基，細胞分裂素BA或KT，濃度分別為5.0mg/L、4.0mg/L、3.0mg/L、2.0mg/L、1.0mg/L，生長素NAA或IBA，濃度分別為1.0mg/L、0.5mg/L、0.1mg/L的培養基上培養。根據生長情況選擇適宜的生長調節劑和最佳誘導培養基。

1.2.2 最佳增殖培養基選擇實驗

根據誘導實驗選擇適宜的生長調節劑，進行增殖培養基實驗，將誘導成功的0.5cm×0.5cm的材料接種在以MS為基本培養基，BA濃度分別為3.0mg/L、2.0mg/L、1.0mg/L，NAA濃度分別為1.0mg/L、0.5mg/L、0.1mg/L的培養基上培養。根據生長情況選擇最佳增殖培養基。

1.2.3 最佳生根培養基選擇實驗

將2cm以上芽接種到生根培養基，以1/2MS為基本培養基，生長素選用NAA，濃度分別2.0mg/L、1.0mg/L、0.5mg/L、0.1mg/L，細胞分裂素BA，濃度分別為0.5mg/L、0.3mg/L、0.1mg/L。根據生長情況選擇最佳生根培養基。

2 結果與分析

2.1 最佳誘導培養基選擇實驗結果

外植體培養4周后統計生長情況見表1。細胞分裂素BA5.0mg/L時，植物表現生長調節劑過高現象，BA4.0mg/L時，配合適當的生長素濃度(NAA0.5mg/L)產生大量愈傷組織，BA3.0mg/L，配合適當的生長素濃度(NAA0.1mg/L)形成大量叢生芽，BA2.0mg/L時，都能形成叢生芽，BA1.0mg/L時表現出細胞分裂素不足，表明細胞分裂素BA對花葉萬年青誘導作用明顯；添加KT培養基外植體無顯著變化，KT對植物生長影響不顯著，對花葉萬年青無誘導作用。不同濃度NAA下，外植體形成愈傷組織、叢生芽，說明NAA作用明顯；不同濃度IBA下，外植體變化不明顯，說明IBA對外植體影響作用不顯著。

綜合生長情況見表1、表2，工廠化育苗最佳誘導培養基為MS+BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L。

表1外植體誘導生長情況

續表

培養基不同生長素濃度生長情況1．0mg/L0．5mg/L0．1mg/LMS+BA4．0mg/L+IBA部分愈傷組織粗厚、卷曲部分愈傷組織粗厚、卷曲部分愈傷組織粗厚、卷曲MS+KT4．0mg/L+NAA膨大、突起，有少量愈傷組織外植體膨大外植體無反應MS+KT4．0mg/L+IBA外植體無反應外植體無反應外植體無反應MS+BA3．0mg/L+NAA部分愈傷組織粗厚、卷曲形成叢生芽和愈傷組織形成叢生芽MS+BA3．0mg/L+IBA形成少量叢生芽形成少量叢生芽形成少量叢生芽MS+KT3．0mg/L+NAA膨大、突起，有少量愈傷組織外植體膨大外植體無反應MS+KT3．0mg/L+IBA外植體無反應外植體無反應外植體無反應MS+BA2．0mg/L+NAA形成叢生芽形成叢生芽形成叢生芽MS+BA2．0mg/L+IBA形成叢生芽形成叢生芽形成叢生芽MS+KT2．0mg/L+NAA膨大、突起，有少量愈傷組織外植體膨大愈傷組織MS+KT2．0mg/L+IBA外植體無反應外植體無反應外植體無反應MS+BA1．0mg/L+NAA形成少量愈傷組織、生長緩慢形成少量愈傷組織、生長緩慢外植體無反應MS+BA1．0mg/L+IBA外植體無反應外植體無反應外植體無反應MS+KT1．0mg/L+NAA膨大、突起，有少量愈傷組織外植體膨大外植體無反應MS+KT1．0mg/L+IBA外植體無反應外植體無反應外植體無反應

表2不同培養基平均形成叢生芽數量統計表

2.2 最佳增值培養基選擇實驗結果

誘導材料在不同增殖培養基生長4周后統計芽增殖數量，結果見表3。經過SPSS統計分析，進行主體間效應的檢驗，見表4。方差齊次性檢驗表明：BA與NAA組合，Sig=0.043，小于0.05，方差不齊次性顯著，說明不同BA與NAA組合培養基芽增殖差異顯著。5號培養基芽增殖數量最多(見圖1)，增值最佳培養基選擇MS+BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L。

表3不同培養基的芽增殖數

表4主體間效應的檢驗

2.3 生根培養基選擇實驗結果

增殖苗轉接到生根培養基培養，4周后統計生根率結果見表5、圖2。NAA濃度0.5～1.0mg/L，配合BA濃度0～0.3mg/L都能生根，生根率20.9%～94.8%，最佳生根培養基為1/2MS+NAA0.5mg/L+BA0.1mg/L，生根率為94.8%。

表5生長調節劑濃度對生根率的影響 單位：%

3 結論

細胞分裂素BA、生長素NAA對花葉萬年青生長作用明顯。花葉萬年青工廠化育苗誘導最佳培養基MS+BA3mg/L+NAA0.5mg/L，增殖培養最佳培養基MS+BA2mg/L+NAA0.5mg/L，生根最佳培養基1/2MS+NAA0.5mg/L+BA0.1mg/L，生根率94.8%。

[1]譚文澄，戴策剛.觀賞植物組織培養技術[M].北京：中國林業出版社，1991.

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