七葉皂甙鈉對肝臟缺血再灌注損傷的保護作用

劉金彪 王新征 侯永強 丁斌

七葉皂甙鈉對肝臟缺血再灌注損傷的保護作用

劉金彪 王新征 侯永強 丁斌

為探討七葉皂甙鈉對肝臟缺血再灌注損傷的作用，通過預先對大鼠肝臟缺血再灌注模型靜脈注射七葉皂甙鈉，經測定肝組織內ATP、AMP、ADP的含量，肝臟的細胞能荷，及血清谷丙轉氨酶，谷草轉氨酶，堿性磷酸酶、γ-GT等各項指標，結果發現用藥組單純缺血再灌注對照肝組織內ATP含量高，損害較輕，結果表明:七葉皂甙鈉對肝臟缺血再灌注造成的損傷有明顯的預防作用。

肝臟;缺血再灌注;七葉皂甙

七葉皂甙系由婆羅子的干燥成熟果實中提取的一種皂甙制成。我們在原位肝臟缺血再灌注模型上，觀察七葉皂甙對I/R損傷的影響，旨在探討該藥減輕I/R，損傷的作用，為臨床應用七葉皂甙鈉防治肝臟I/R損傷提供依據。

1 資料與方法

1.1 藥品及動物 注射用七葉皂甙鈉為武漢愛民制藥廠生產。雄性wistar大鼠25只，體重200～250 g，有同濟醫科大學實驗動物中心提供。

1.2 實驗方法及觀察指標

1.2.1 實驗鼠隨機分3組:正常組9只，缺血再灌注組8只和七葉皂甙鈉治療組8只。實驗前12 h進食，飲水不限，采用戊巴比妥50 mg/kg體重腹腔麻醉，正中切口開腹，暴露肝門部，小血管夾阻斷尾狀葉及左葉肝臟血流，但不阻斷右葉血流。以防門靜脈及腸道淤血，待檢查肝組織標本取自尾狀葉前部，用巾鉗暫時關閉腹腔，在阻斷血流40 min后，放開血管夾，再灌注2 h。正常對照組僅作肝門部血管稍分離而不阻斷。用藥組按20 mg/kg體重靜脈注射七葉皂甙鈉，分別在阻斷血流前及再灌注前10 min，各按上述劑量半量，從股靜脈緩慢推注。

1.2.2 肝組織ATP，ADP AMP的測定:取肝臟組織后標本立即置液氮中冷凍保存至檢測，首先從液氮內取出標本立即稱重500 mg，加HclO4勻漿，置高速冷凍離心機內1200轉/min共15 min，提取上清液，再加K2CO3，充分混勻，離心5000轉/min共10 min，取上清液，樣品處理完后，用高效液相色譜法檢測波長測定ATP，ADP，AMP含量。肝細胞的能量狀態用能荷表示，能荷的計算公式:

1.2.3 血清酶檢測取下腔靜脈血標木送生化室測，ALT、AST、AKP、γ-GT 等

1.2.4 數據處理全部數據采用計算機SAS程序SLM過程處理。

2 結果

2.1 肝組織ATP、ADP、AMP及能荷變化，見表1。

2.2 肝功能檢測結果用七葉皂貳鈉治療組ALT、AST、AKP、γ-GT等均較缺血再灌注組下降差異有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

表1 七葉皂貳鈉對缺血再灌注損傷肝細胞ATP、ADP、AMP含量及能荷影響(例，±s)

表1 七葉皂貳鈉對缺血再灌注損傷肝細胞ATP、ADP、AMP含量及能荷影響(例，±s)

注:△同對照組比P＜0.01，▲同對照組比P＞0.05，﹡同缺血再灌注組比P＜0.05

組別 例數 ATP(g/mg) ADP(g/mg) AMP(g/mg)08 0.64±0.15 I/R損傷 8 724.03±143.09 2.89.04±303.05 4580.43±1734.08△ 0.25±0.07△藥物治療 8 1376.28±34.8 1610.36±510.21 317.94±241.32▲ 0.52±0.18 Engery charge對照 9 1081.99±155.08 898.53±323.8 1284.15±982.﹡

組別 例數 ATP(g/mg) ADP(g/mg) AMP(g/mg)86±1.81 I/R損傷 8 2103.50±976.20 1485070±778.88△ 394.82±63.93 07.50±4.46△藥物治療 8 599.38±95.35 588.38±215.12﹡ 183.22±64.35 4.14±1.57 Engery charge對照 7 131.33±77.25 378.50±211.77 89.00±14.85 3.﹡

3 討論

缺血肝臟再灌注后，常使原缺血的組織細胞的損傷加重，謂之肝臟的缺血再灌注損傷，肝臟的I/R是臨床工作經常面臨的一個問題，如休克后的肝臟功能衰竭，肝移植及肝臟損傷及腫瘤的手術等。雖然肝細胞的損害可直接由缺血引起，但大量的證據說明大部分損傷發生于再灌注［1］，造成肝臟I/R損傷的原因是多因素的且十分復雜［2，3］，臨床工作中尚無十分有效的預防措施。實驗證明某些藥物可一定程度緩解損傷。七葉皂貳鈉具有抗滲出、維持細胞膜穩定性、恢復毛細血管正常通透性、改善微循的作用［4］。國內張氏等的實驗結果表明，其抑制炎性滲出的作用為氫化可的松的4～5倍，并有抑制毛細血管通透性增加的作用，其強度為氫化可的松的7～8倍。具有對抗磷酸組織胺和緩激膚等炎性介質的作用［6］。我們通過預先對大鼠肝臟I/R模型靜脈注射七葉皂甙鈉后，觀察到用藥組較組大鼠的肝細胞內ATP含量明顯提高，能荷有所恢復，血清酶ALT、AST、AKP、γ-GT等的釋出減少實驗結果表明七葉皂貳鈉具有抗I/R損傷的作用，七葉皂甙鈉保護肝臟的機制尚不十分清楚，結合本實驗結果及該藥的藥理作用，我們推測七葉皂甙鈉可能通過以下幾個環節減輕I/R造成的損傷:

3.1 增加肝細胞的能量，抑制ATP的過分消耗。七葉皂貳鈉可顯著減少缺血再灌注大鼠肝細胞ATP含量及能荷的下降，進而減少次黃喋吟大量堆積，因此可使再灌注時OFR的生成減少，七葉皂甙鈉增加肝細胞的能量，抑制了I/R生成的OFR啟動環節。

3.2 抗炎、維護細胞膜的穩定性:七葉皂甙鈉可提高ACTH和皮質酮類的血濃度，血液中，糖皮質激素增加將會抑制水腫，毛細血管擴張可減少中性白細胞數目抑制白細胞的附壁及移行血管外，并可抑制磷酸脂酶A2、花生四稀酸、白三稀等的形成這些物質對化學趨向和炎癥起重要的作用［5，6］。

［1］ Parks DA，Granger DN.Contribution of ischemia and reperfusion to mucosal lesion formation.Am J Physiol，1986，250:749.

［2］ Ratych RE.Chukyiska RS，BullKley GB.The primary localization of free radical generation after anoxia/reoxy genetion in isolated endothehal cell.Surgery，1987，102:122.

［3］ Welbourn CRB.Goldman G，Paterson IS.Pathophysiogy of ischaemia reperfusion injury:rentral roal of the neutrophil.Br Sury，1991;78:651.

［4］ 新藥手冊.中國藥學雜志.天津科學技術出版社，1991，5:450-452.

［5］ 李家泰.臨床藥理學.人民衛生出版社，1991，799.

［6］ 張麗新.婆羅子皂甙的藥理研究.中國醫院藥學雜志，1997，7:337.

471003河南科技大學第一附屬醫院普外三科