手工制作組織芯片及其在病理實訓教學中的應用①

李維山 王艷偉

(漯河醫學高等專科學校 河南漯河 462000)

手工制作組織芯片及其在病理實訓教學中的應用①

李維山 王艷偉

(漯河醫學高等專科學校 河南漯河 462000)

目的 實現組織芯片技術在病理實訓教學中的應用。方法 取鱗狀上皮,腺上皮,平滑肌組織等相應的正常組織,良性腫瘤,不典型增生I～III級和惡性腫瘤等組織,采用組織芯片技術制作組織微陣列蠟塊并切片,常規HE染色后做成組織芯片教學切片;隨機選擇3年制臨床專業2個班分實驗組和對照組,實訓4學時并進行雙盲測驗,統計優秀率并統計學分析。結果 實驗組優秀率明顯高于對照組,并具有統計學意義。結論 與傳統的病理實訓教學相比,組織芯片技術有帶教老師易講解,學生易理解的不可替代的優勢,值得在實踐中進行推廣。

組織芯片 病理學 教學 實訓

組織芯片技術是將數十個、數百個乃至上千個小組織片,按實驗設計的需求整齊地排列在一張載玻片上,制備成的微縮組織切片。它具有高信息量、體積小、高效、快速、低耗、易于標準化等優點。可以彌補傳統病理教學很多不足,利用此項技術,我們參照文獻[1～2]并加以改良,按照章節分類并手工制作病理學和組織學芯片,應用于病理學實訓教學,取得顯著效果。本文以腫瘤這一章節為例來探討組織芯片在病理實訓教學中的應用。

1 臨床資料

1.1 教學組織芯片的制作

1.1.1 組織標本的收集和制作 選取正常鱗狀上皮,鱗狀上皮乳頭狀瘤,鱗狀上皮不典型增生I～Ⅲ級,高分化鱗狀細胞癌;低分化鱗狀細胞癌;正常腺體,腺瘤,腺上皮不典型增生Ⅰ～Ⅲ級,高分化腺癌,低分化腺癌;正常平滑肌,平滑肌瘤,平滑肌肉瘤;正常纖維組織,纖維瘤,纖維肉瘤等20個組織塊,供體蠟塊收集自濟源市第一人民醫院病理科。所有的標本均經過4%中性甲醛固定24h,常規浸蠟并包埋。

1.1.2 組織芯片的手工制作 用手電鉆(鉆頭外徑1.8mm)在2.5cm×2cm的受體蠟塊上構建7×6個點陣,間距2mm。所選的石蠟標本,經過顯微鏡下定位后,用手工改造過的腹穿針(內徑1.8mm)把目標組織穿刺取下圓柱狀標本,分別種植到對應的點陣中,并根據坐標記錄標本所對應的組織。然后在38℃恒溫箱中烘烤2h,使與空白蠟塊融合為一體。切片厚度5um,芯片信息完全丟失的病例,使用完整切片。

1.1.3 切片制備 將蠟塊放入冰箱中凍10min后,拿出快速連續切片,厚度4um,常規HE染色并保存備用。

1.2 教學過程的設計

實驗分組。隨機選取2個3年制臨床班(每個班180人),分實驗組和對照組,實驗組采用組織芯片教學法進行實訓,對照組采用傳統教學方法進行實訓,4學時后進行雙盲測驗,測驗內容:(1)理論筆試;(2)切片診斷。總分為100分。

1.3 結果判定標準

成績＞75分為優秀,統計實驗組和對照組的優秀率。

1.4 統計學處理

應用SPSS 11.5統計軟件進行數據分析,采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

實驗組180人122人優秀,優秀率為67.77%,對照組180人91人優秀,優秀率50.55%,實驗組優秀率明顯高于對照組,差異具有統計學意義(P<0.05)。

3 討論

組織微陣列是由美國國家衛生院的科學家Kononen J[3]等在1998年在《自然醫學》雜志中首先提出來的,經過幾年的發展,目前的組織芯片制作儀做出的芯片組織標本數目在50～800個之間[4],在很多領域都得到應用,近年來組織芯片被逐步應用到醫學形態學教學領域,并體現出一定的優越性[5～6]。

實驗中發現一些現象,(1)實驗組實驗室老師給學生發放切片速度快而不容易出錯,使學生節省了不少時間。(2)組織芯片上所選的組織都是非常典型的病變,便于學生自己尋找病變,因此實驗組學生普遍比對照組學生提前10min左右完成實訓任務并上交布置的作業。(3)因為就一張切片可以觀察,因此實驗組學生不小心打碎切片的現象極少發生,這為學生全心全意的實訓提供了一個良好的環境,(4)實驗組學生實訓中提出的疑問明顯少于對照組,正是上面這些因素,造成實驗組學生對腫瘤章節的學習有更深程度的把握和理解,使得對理論課的學習也起到極大的幫助。這些可能都是實驗組優秀率明顯高于對照組的原因。

因此,在病理實訓教學中引入組織芯片技術,將會極大的提高學生的學習效率和學習效果。

[1]陳士超,何春年.自制組織芯片穿刺工具及芯片手工制作技巧[J].中國組織化學與細胞化學雜志,2008,17(1):114～115.

[2]孫廷誼,張云漢.組織芯片的研制及效果[J].鄭州大學學報(醫學版),2007,42(1):116～117.

[3]Kononen J,Bubendorf L,Kallioniemi A,et al.Tissue microarrays for high-throughput molecular profiling of tumor specimens[J].Nat Med,1998,4:844～847.

[4]Moch H,Kononen T,Kallioniemi OP,et al.Tissue microarrays:what will they bring to molecular and anatomic pathology[J].Adv Anat Pathol,2001,8:14～20.

[5]江濤,呂少文.組織學考試用組織芯片制作初探[J].解剖學研究,2005,27(3):202～204.

[6]王清良,卞修武.組織芯片在病理學教學中的應用前景[J].醫學教育探索,2006,5(3):268～269.

R735

A

1674-0742(2011)10(a)-0085-01

李維山:男,34歲,研究生,病理學碩士,講師/主治醫師,從事臨床工作10年,病理教學工作5年,已發表論文5篇。

2011-08-23